30
3.9.1.7.Pereaksi Mayer
Sebanyak 5 gram kalium iodida dilarutkan dalam 10 ml air suling kemudian ditambahkan larutan 1,36 gram merkuri II klorida dalam 60 ml air suling.
Larutan dikocok dan ditambahkan air suling hingga 100 ml.
3.9.1.8.Pereaksi Molish
Sebanyak 3 gram α-naftol dilarutkan dalam asam nitrat 0,5N secukupnya hingga 100 ml.
3.9.2. Penyiapan Bahan
Penyiapan bahan meliputi determinasi tumbuhan, pengumpulan bahan dan pembuatan simplisia.
3.9.2.1.Determinasi Tumbuhan
Determinasi tumbuhan dilakukan oleh Laboratorium Taksonomi Tumbuhan FMIPA USU.
3.9.2.2.Pengumpulan Bahan
Sampel yang digunakan adalah daun pepaya yang biasa dikonsumsi oleh masyarakat sebagai bahan baku sayuran. Sampel diambil dari kebun pepaya di
Medan. Pengambilan
sampel dilakukan
secara purposif
yaitu tanpa
membandingkan dengan tempat tumbuh di daerah lain.
3.9.3 Pembuatan Simplisia
Daun pepaya dibersihkan dari kotoran, dicuci dengan air bersih, ditiriskan. Daun dikering anginkan tanpa terkena cahaya matahari. Simplisia yang diperoleh
diserbuk dengan blender dan disimpan dalam wadah yang sesuai.
Universitas Sumatera Utara
31
3.9.3.1. Pemeriksaan Pendahuluan Kandungan Kimia Serbuk Simplisia
Dilakukan pemeriksaan golongan alkaloid, flavonoid, glikosida, saponin, tannin, steroid.
3.9.3.1.1. Pemeriksaan alkaloid
Sebanyak 500 mg serbuk simplisia ditambahkan 1 ml HCl 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan diatas penangas air selama 2 menit, didinginkan dan disaring.
Filtrat dipakai untuk percobaan berikut: a.
Filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes pereaksi Mayer, akan terbentuk endapan menggumpal berwarna putih atau kuning.
b. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes pereaksi Bouchardat, akan
terbentuk endapan berwarna coklat sampai hitam. c.
Filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorff, akan terbentuk endapan berwarna merah atau jingga.
Alkaloid positif jika terjadi endapan atau kekeruhan paling sedikit dengan 2 atau 3 percobaan diatas.
3.9.3.1.2. Pemeriksaan Glikosida
Sebanyak 3 gram serbuk simplisia disari dengan 30 ml etanol 95 dan air suling 7:3 dan 10 ml asam sulfat 2 N, lalu direfluks selama 1 jam. Didinginkan
dan disaring. Pada 20 ml filtrat ditambah dan didiamkan selama 5 menit, disaring. Filtrat disari tiga kali, tiap kali dengan 20 ml campuran 3 bagian kloroform dan 2
bagian isopropanol. Kumpulan sari air diuapkan pada suhu tidak lebih dari 50 C.
Sisa dilarutkan dengan 2 ml metanol. Larutan sisa dimasukkan ke tabung reaksi, selanjutnya diuapkan di atas penangas air. Pada sisa ditambahkan 2 ml air dan 5
Universitas Sumatera Utara
32
tetes larutan pereaksi Molish. Ditambahkan hati-hati 2 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung, akan terbentuk cincin ungu pada batas kedua cairan
menunjukkan adanya glikosida.
3.9.3.1.3. Pemeriksaan Saponin
Sebanyak 0,5 gram serbuk dimasukkan dalam tabung reaksi, ditambahkan 10 ml air panas, kemudian dikocok selama 10 detik, jika terbentuk busa setinggi 1
cm sampai 10 cm yang stabil selama tidak kurang dari 10 menit dan tidak hilang dengan penambahan 1 tetes asam klorida 2 N, menunjukkan adanya saponin.
3.9.3.1.4. Pemeriksaan Flavonoid
Sebanyak 0,5 g serbuk direfluks dengan 10 ml metanol selama 10 menit, kemudian disaring. Filtratnya diencerkan dengan 10 ml air suling. Setelah dingin
ditambahkan 5 ml eter minyak tanah, dikocok hati-hati, dan didiamkan. Lapisan metanol diambil, lalu diuapkan pada suhu 40
C, sisanya dilarutkan dalam 1 ml etanol, kemudian ditambahkan 0,1 g serbuk magnesium dan 10 ml asam klorida
pekat, jika terjadi warna merah jingga sampai merah ungu menunjukkan adanya flavonoida.
3.9.3.1.5. Pemeriksaan Tanin
Sebanyak 500 mg sampel disari dengan 10 ml air, disaring, lalu diencerkan sampai hampir tidak berwarna. Kepada 2 ml larutan sampel ditambahkan 1-2 tetes
larutan FeCl
3
10 dan diperhatikan warna yang terjadi, warna biru, biru-hitam, hijau atau biru-hijau dan endapan menunjukkan adanya tanin.
3.9.3.1.6. Pemeriksaan Steroida
Sejumlah 1 g serbuk simplisia dimaserasi dengan 20 ml eter selama 2 jam, disaring. Filtrat digunakan untuk reaksi berikut: 5 ml larutan eter diuapkan di
Universitas Sumatera Utara
33
dalam cawan penguap, ke dalam sisa ditambahkan 2 tetes asam asetat anhidrat dan 1 tetes asam sulfatp. reaksi steroida positif bila terjadi warna merah-ungu atau
biru-hijau.
3.9.4. Pembuatan Ekstrak Metanol dan n-Heksana 3.9.4.1. Pembuatan Ekstrak Metanol Daun Pepaya
