12 Kehadiran  astaxanthin  dalam  makro-alga  terbentuk  sebagai  ester  dari  beberapa
asam  lemak,  yang  memiliki  pengaruh  signifikan  sebagai  prekursor  untuk pembentukan  karoten  yang  seringkali  terdeteksi  sebagai  senyawa  karoten  minor
terdeteksi sebagai  senyawa echinenone atau senyawa cathaxanthin Delia 2001 in  Munifah 2007.
2.1.5  Metode pengukuran  aktivitas antioksidan
Aktivitas  antioksidan  dapat  dievaluasi  dengan  cara  menentukan  proteksi antioksidan  terhadap  oksidasi  lemak  atau  minyak,  dengan  kata  lain  sejauh  mana
daya  tahan  minyak  atau  lemak  tersebut  terhadap  proses  oksidasi.  Oksidasi  lipid dipengaruhi oleh suhu, cahaya, oksigen dan adanya ion logam Tensika 2001.
Penentuan aktivitas antioksidan bisa pada tahap oksidasi yang berbeda, yaitu tahap awal oksidasi menghasilkan produk primer seperti bilangan peroksida PV,
diene terkonyugasi. Semua antioksidan alami memiliki fungsi yang berbeda-beda dalam  bahan  makanan  yang  kompleks  dan  bermacam-macam,  dimana
aktivitasnya tidak dapat diuji hanya berdasarkan satu metode saja. Banyak metode analisis menghasilkan hasil yang tidak konsisten, yang disebabkan karena ketidak
cocokan  aplikasi  dan  spesifikasi  kapasitas  antioksidan  Prior  2005  in  Oufnac 2006.
Analisis  DPPH  2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl  merupakan  salah  satu metode  dalam  menganalisis  aktivitas  antioksidan.  Molekul  1,1-diphenyl-2-
picrylhydrazyl  dikarakteristik  sebagai  radikal  bebas  yang  stabil  karena  ada dekolisasi  elektron  cadangan  melewati  seluruh  molekul.  Delokalisasi  juga
menghasilkan  warna  ungu  yang  kuat  dikarakterisasi  oleh  pita  absorspsi  dalam larutan etanol pada panjang gelombang 520 nm Molyneux 2004.
DPPH  adalah  radikal  bebas  yang  stabil  dan  menerima  elektron  dan  radikal
hidrogen  menjadi  molekul  diamagnetic  stabil  Siddaraju  dan  Dharmesh  2007  in
Ghimeray  2009.  Elektron  ganjil  pada  radikal  bebas  DPPH  menghasilkan penyerapan kuat maksimum pada panjang gelombang 517 nm dan berwarna ungu.
Warna ungu berubah menjadi kuning ketika elektron ganjil radikal DPPH menjadi berpasangan  dengan  hidrogen  dari  antioksidan  penangkal  radikal  bebas  untuk
membentuk  DPPH-H  Prakash  2001.  Efek  dari  senyawa  fenolik  pada
13 penghambatan  radikal  DPPH  disebabkan  karena  kemampuannya  mendonorkan
hidrogen.
2.2  Pengenalan Genus Caulerpa