24
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
BAB 3 METODE PENELITIAN
3.1 Waktu dan Tempat
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Biosains, Bidang Botani, Pusat Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia LIPI,
Cibinong. Waktu pelaksanaan penelitian dimulai dari bulan April hingga Agustus 2013.
3.2 Alat dan Bahan
3.2.1 Alat
Alat –alat yang digunakan dalam penelitian ini antara lain: autoklaf
Hiclave HVE 5.0 Hirayama, cawan petri, jarum ose, lampu bunsen, kolom, kapas steril, pipa kapiler, pinset, pipet mikro, tabung reaksi
pyrex, spatula, shaker incubator, inkubator, vacuum rotary evaporator Heidolph WB 2000, UV cabinet CAMAG, chamber, Lamina Air Flow
LAF, 96 microwell titer plate, labu evaporator pyrex, neraca analitik and hr-202i, corong pisah, erlenmeyer dan alat-alat gelas lainnya.
3.2.2 Bahan
Bahan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah 23 isolat jamur endofit yang diisolasi dari bagian akar, batang, daun dan biji
tumbuhan Rennellia elliptica koleksi Laboratorium Biosains, Bidang Botani, Puslit Biologi LIPI Cibinong Tabel 3.1
Bakteri uji yang digunakan meliputi bakteri uji Gram positif Staphylococcus aureus
LIPIMC 114, bakteri uji Gram negatif Escherichia coli LIPIMC 186.
Media Potato Dextrose Agar PDA difco
TM
, media Potato Dextrose Broth PDB difco
TM
, media Mueller-Hinton Broth MHB criterion, media Mueller-Hinton Agar MHA criterion, media Brain
Heart Infussion BHI cair BBL
TM
, pelat Kromatografi Lapis Tipis KLT silica gel 60 F
254
Merck, Silika gel 70-230 mesh Merck,
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
sephadex LH-20, pelarut kimia etil asetat, aseton, kloroform, metanol, n- heksana, alkohol 96 , alkohol 70, aquades, aquades steril, reagen
warna p-iodonitrotetrazolium INT Sigma, pewarna trypan blue, kristal violet, safranin, larutan iodin, kloramfenikol Sigma, eritromisin Sigma,
kertas saring, gas nitrogen dan penampak noda serium sulfat. Tabel 3.1. Data 23 isolat jamur endofit dari tumbuhan Ginseng Kuning
Rennellia elliptica Korth No Asal Isolat
Nama Jamur No
Asal Isolat Nama Jamur
1 Akar
GKA ¼ 1
Daun GKD 2
2 GKA 2
2 GKD 34
3 GKA 3
3 GKD 5
4 GKA 5
4 GKD 6
5 GKA 6
5 GKD 7
6 GKA 7
6 GKD 8
1 Biji
GKB 1 1
Batang GKBt 1
2 GKB 2
2 GKBt 2
3 GKB 3
3 GKBt 34
4 GKB 4
4 GKBt 56
5 GKB 5
6 GKB 6
7 GKB 7
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
3.3 Tahapan Penelitian