31
C. Alat dan Bahan Penelitian
1. Alat-alat Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini sebagai berikut:
a. Seperangkat alat gelas
b. Seperangkat alat spektronik-20
c. Neraca analitik
d. Sentrifuga
e. Inkubator
2. Bahan-bahan Penelitian
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah bahan kimia pro- analis E-Merck, kecuali akuades. Bahan-bahan yang digunakan adalah:
a. Larutan Buffer Fosfat 0,1 M pH 7; 8; dan 9
Larutan buffer fosfat 0,1 M pH 7, 8 dan 9 dibuat dengan melarutkan 2,4 gram NaH
2
PO
4
ke dalam 200 mL akuades. Kemudian ditambahkan NaOH 0,5 M tetes demi tetes hingga diperoleh pH yang diinginkan pH 7; 8; dan 9, dengan
menggunakan pH-meter. Setelah itu memasukkan larutan tersebut ke dalam labu takar 250 mL, kemudian menambahkan akuades hingga tanda batas, lalu
dihomogenkan. b.
Larutan 10 TCA asam trikloroasetat 500 mL Larutan 10 TCA dibuat dengan melarutkan 50 gram kristal TCA ke
dalam 200 mL akuades, kemudian encerkan menggunakan akuades ke dalam 500 mL labu ukur hingga tanda batas.
32
c. Larutan Enzim Tripsin
Larutan enzim tripsin dibuat dengan melarutkan 8 mg padatan enzim tripsin ke dalam 20 mL buffer fosfat 0,1 M sesuai pH yang diinginkan pH 7; 8;
dan 9. d.
Regaen Folin-Ciocalteau 1 N sebanyak 200 mL Reagen Folin-Ciocalteau 1 N dibuat dengan mengencerkan larutan induk
Folin-Ciocalteau sebanyak 100 mL dengan akuades 100 mL perbandingan 1 : 1. Kemudian menghomogenkan larutan tersebut.
e. Larutan Kasein 1 mgmL 1 pH 7, 8, dan 9 sebanyak 50 mL
Larutan induk kasein dengan menimbang 0,5 gram bubuk kasein dan menambahkan NaOH 0,5 M tetes demi tetes hingga bubuk kasein berbentuk gel,
kemudian menambahkan 20 mL akuades. Selanjutnya memanaskan larutan kasein sambil diaduk hingga kasein benar benar larut. Terakhir menambahkan larutan
buffer fosfat 0,1 M pH yang diinginkan pH 7; 8; dan 9 ke dalam labu ukur 50 mL hingga tanda batas.
f. Larutan NaOH 0,5 M 100 mL
Larutan ini dibuat dengan menimbang 2 gram kristal NaOH, kemudian dilarutkan dengan sedikit akuades menggunakan gelas beker lalu dimasukkan ke
dalam labu ukur 100 mL. Tambahkan akuades hingga tanda batas kemudian dihomogenkan.
33
g. Pereaksi Lowry
1 Reagen A sebanyak 75 mL
Melarutkan 1,5 gram Na
2
CO
3
dalam 75 mL NaOH 0,1 M dan mengaduknya hingga larut sempurna.
2 Reagen B sebanyak 10 mL
Melarutkan 0,05 gram CuSO
4
.5H
2
O dalam 10 mL Kalium Natrium Tartrat 1 melarutkan 0,1 gram Kalium Natrium Tartrat pada 10 mL akuades dan
mengaduknya hingga larut sempurna. 3
Reagen C sebanyak 76,5 mL Mencampurkan 75 mL reagen A dengan 1,5 mL reagen B.
4 Reagen D sebanyak 10 mL
Reagen D dibuat dengan menambahkan 5 mL akuades pada larutan induk Folin-Ciocalteau 5 mL perbandingan 1 : 1 dan menghomogenkan larutan reagen
Folin-Ciocalteau 1N. h.
Ion logam Cu
2+
0,01 M sebanyak 100 mL Variasi konsentrasi yang digunakan 0,0010 M; 0,0015 M; 0,0020 M;
0,0025 M; dan 0,0030 M. Larutan induk CuCl
2
0,01 M dibuat dengan melarutkan 0,134 gram kristal CuCl
2
.2H
2
O dengan akuades sebanyak 100 mL.
D. Prosedur Penelitian
Kategori