Adanya pembesaran pada ginjal diperkirakan terjadi karena ada beban kerja yang tinggi pada ginjal. Plasma darah setiap harinya difiltrasi melalui
glomerulus ginjal. Senyawa toksik berukuran kecil dapat lolos filter glomerulus dan dieksresikan melalui urin. Senyawa toksik ini jika berikatan
dengan protein plasma yang berukuran kecil dan mencapai sel tubulus proksimal dapat menimbulkan efek toksik Omaye, 2004, yaitu kerusakan
ginjal. Sedangkan senyawa toksik yang berukuran besar dan tidak lolos filter glomerulus akan direabsorpsi dan kembali ke aliran darah. Diperkirakan
terjadi kenaikan jumlah senyawa yang harus difitrasi oleh ginjal yang berasal dari kecambah kacang komak. Senyawa-senyawa tersebut dapat berupa
xenobiotik larut air maupun larut lemak yang dibuat larut air melalui proses biotransformasi dan memperberat kerja ginjal sebagai organ utama
pengeluaran senyawa toksik Omaye, 2004. Hal ini didukung Deka dan Sarkar 1990 yang menyatakan bahwa kacang komak mengandung tanin
dalam jumlah yang besar dan penurunan kandungannya akibat perkecambahan hanya 56.2 Ramakrishna et al., 2006. Senyawa tanin yang tersisa dan
terserap dalam tubuh akan dimetabolisme melalui jalur metabolisme toksikan fase I dan II .
C. PROFIL LIPID DAN PEROKSIDASI TIKUS PERCOBAAN
1. Kadar Total Kolesterol
Berdasarkan penelitian Mahfouz dan Kummerow 2000, tikus percobaan tidak sensitif terhadap efek aterogenik akibat diet kolesterol tinggi
dibandingkan dengan kelinci. Sejalan dengan itu Mahley 1979 juga telah menyatakan bahwa kelinci dan babi lebih mudah mengalami hiperlipidemia
dan kerusakan arteri akibat diet yang dimodifikasi dibadingkan tikus percobaan. Cole et al. 1984 mengembangkan penelitian untuk
membandingkan pengaruh diet tinggi lemak 5 lemak babi, tinggi kolesterol 2 dan diet tinggi kolesterol 2 dengan penambahan
propiltiourasil PTU 0.1 terhadap profil lipid tikus Sprague Dawley jantan. Hasilnya menunjukkan bahwa selama 21 hari pemberian ransum, diet
43
tinggi kolesterol+PTU jauh lebih efektif menyebabkan hiperlipidemia. Oleh karena itu, pada penelitian ini, pemberian ransum dilakukan dengan
penambahan kolesterol 1 dan PTU 0.1 kecuali pada kelompok kontrol negatif.
Propiltiourasil PTU merupakan suatu zat antitiroid yang dapat merusak kelenjar tirod sehingga dapat menghambat sintesis hormon tiroid Ganong,
1995. Hormon tiroid berperan dalam menginduksi peningkatan jumlah reseptor LDL pada sel-sel hepar menyebabkan pembuangan yang cepat rapid
removal LDL dari plasma oleh hati, dimana kolesterol yang pada awalnya terdapat pada LDL disekresi melalui empedu menuju feses Guyton dan Hall,
2006. Penambahan PTU pada ransum berperan untuk menghambat sintesis hormon tiroid, sehingga menurunkan pembuangan kolesterol LDL dan
menyebabkan kadar kolesterol serum tikus dapat meningkat dengan diet tinggi kolesterol.
Berdasarkan hasil analisis total kolesterol serum setelah masa perlakuan 36 hari Gambar 19 dapat diketahui bahwa tikus pada grup kontrol positif
memiliki kadar total kolesterol serum yang paling tinggi, yaitu sebesar 143.45 mgdl, diikuti dengan grup kontrol negatif dan perlakuan kecambah kacang
komak yang besarnya berturut-turut 60.23 mgdl dan 60.34 mgdl. Grup kontrol positif memiliki kadar total kolesterol serum paling tinggi,
namun masih berada di dalam level normal, yaitu 200mgdl Chen et. al., 2008. Hal ini menunjukkan bahwa masa perlakuan selama 36 hari belum
cukup untuk meningkatkan kadar kolesterol serum total tikus kontrol positif hingga mencapai kondisi hiperkolesterol 200mgdl. Masa perlakuan ini
jauh lebih cepat dibandingkan dengan penelitian yang dilakukan oleh Nugroho 2007, yang berlangsung selama 75 hari dan berhasil meningkatkan kadar
kolesterol serum tikus kontrol positif hingga 204.0 mgdl. Masa perlakuan yang lebih cepat ini dilakukan dengan pertimbangan berat
badan tikus grup kecambah kacang komak yang terus menurun dan penurunan beratnya mencapai 49.39 Tabel 14 pada hari perlakuan ke-36. Berat badan
akhir yang rendah akan menyebabkan kesulitan dalam mendapatkan jumlah
44
serum yang ideal untuk analisis profil lipid sehingga pada hari ke-37 diputuskan dilakukan terminasi serta pengambilan darah dan organ tikus.
Keterangan : Kelompok kontrol negatif diberi ransum standar. Kontrol positif diberi ransum standar, kolesterol 1 dan PTU 0.1. Kelompok kecambah diberi ransum standar tanpa
kasein, tepung kecambah komak 57.1 bb, kolesterol 1 dan PTU 0.1. Nilai yang diikuti oleh huruf yang berbeda pada gambar menunjukkan nilai berbeda nyata
pada one way anova uji lanjut Duncan p0.05.
Gambar 19 . Kadar Total Kolesterol Serum Tikus Percobaan
Meskipun tikus percobaan tidak mencapai kondisi hiperkolesterol dan diketahui bahwa efek hipokolesterolemik dari berbagai pangan khususnya
kedelai jelas terlihat pada subjek yang hiperkolesterolemia sedangkan subjek dengan kondisi normolipidemia tidak Anderson et al., 1995, namun
perbedaan antara grup kontrol positif dengan kecambah kacang komak pada penelitian ini jelas terlihat seperti pada Gambar 19. Analisis statistik
menunjukkan bahwa grup kontrol positif berbeda nyata dengan kontrol negatif dan kecambah kacang komak p0.05, sedangkan grup kecambah kacang
komak tidak berbeda nyata dengan kontrol negatif p0.05 Lampiran 12. Jika dilihat berdasarkan kadar total kolesterol serum, perlakuan kecambah
kacang komak dapat menurunkan kolesterol sebesar 57.9. Hasil ini sejalan dengan penelitian Ramakrishna 2007 yang menunjukkan bahwa kecambah
kacang komak yang berasal dari India dapat menurunkan kolesterol serum tikus albino strain Wistar. Namun karena asupan intake kolesterol antar
perlakuan berbeda, hasil diatas perlu disandingkan dengan rasio total kolesterol dengan asupan kolesterol Gambar 20. Rasio grup perlakuan
45
kecambah kacang komak lebih rendah secara signifikan p0.05 dibandingkan kontrol positif Lampiran 13. Hal ini menunjukkan bahwa
setiap jumlah intake kolesterol yang sama, tikus grup kecambah kacang komak memiliki kadar total kolesterol serum yang jauh lebih rendah dari
kontrol positif sehingga menguatkan dugaan bahwa kecambah kacang komak memiliki sifat hipokolesterolemik.
Keterangan : Keterangan : Kelompok kontrol negatif diberi ransum standar. Kontrol positif diberi ransum standar, kolesterol 1 dan PTU 0.1. Kelompok kecambah diberi ransum
standar tanpa kasein, tepung kecambah komak 57.1 bb, kolesterol 1 dan PTU 0.1. Nilai yang diikuti oleh huruf yang berbeda pada gambar menunjukkan nilai berbeda nyata
pada one way anova uji lanjut Duncan p0.05.
Gambar 20. Kadar Total Kolesterol Serum Relatif Tikus Percobaan
Meskipun demikian, perlu diperhatikan pula bahwa efektifitas PTU dalam meningkatkan kadar total kolesterol serum berbeda-beda tergantung jumlah
ransum yang dikonsumsi. Meskipun dalam setiap mg kolesterol yang dikonsumsi tikus grup kecambah kacang komak menyebabkan kenaikan
kolesterol serum yang lebih rendah dari kontrol positif, namun kenaikan yang lebih rendah ini dapat saja terjadi karena efekifitas PTU menghambat
pembuangan kolesterol serum lebih rendah. Seberapa besar pengaruh perbedaan asupan PTU terhadap efektifitasnya menghambat pembuangan
secara normal kolesterol serum tikus tidak diketahui secara pasti. Sifat hipokolesterolemik dari kacang komak tanpa perkecambahan telah
dilaporkan Nugroho 2007 dan Khayrani 2008. Nugroho 2007 menguji fraksi protein kacang komak pada tikus Wistar dan memberikan hasil protein
46
kacang komak mampu menurunkan kadar kolesterol serum tikus secara signifikan. Begitu pula Khayrani 2008 melaporkan penurunan kolesterol
total serum tikus diabetes yang diberi protein kacang komak secara signifikan. Jika dibandingkan, penurunan kadar total kolesterol serum kecambah
kacang komak 57.94 143.45 mgdl menjadi 60.34 mgdl lebih besar dari penurunan kadar kolesterol fraksi protein kacang komak pada penelitian
Nugroho 2007, yaitu sebesar 44.66 204.0 mgdl menjadi 112. 9 mgdl. Namun kedua hasil ini tidak dapat dijadikan dasar untuk menarik kesimpulan
apakah perkecambahan meningkatkan efek hipokolesterolemik dari kacang komak. Hal ini dikarenakan masa perlakuan yang lebih singkat dan jumlah
konsumsi ransum yang lebih rendah dibandingkan hasil penelitian Nugroho 2007 sehingga terdapat perbedaan jumlah kolesterol dan PTU yang
dikonsumsi. Efek hipokolesterolemik kecambah kacang komak diperkirakan karena
kandungan protein, serat dan senyawa lain seperti antinutrisi. Jenis protein yang bersifat hipokolesterolemik dan bagaimana mekanismenya belum
diketahui secara jelas dan masih menjadi bagian dari studi yang berkelanjutan. Chen et al. 2008 mengungkapkan ada lima kemungkinan cara suatu
pangan menurunkan kolesterol. Mekanisme tersebut antara lain melalui penghambatan enzim HMG-CoA reduktase yaitu enzim penting dalam sintesis
kolesterol, aktivasi reseptor LDL, penghambatan Acyl Co-A cholesterol acyltransferase ACAT yang berperan penting dalam absorpsi kolesterol,
penghambatan penyerapan asam empedu, dan penghambatan cholesteryl ester transport protein CETP yang menyebabkan peningkatan kadar HDL. CETP
diketahui tidak terdapat pada tikus, maka mekanisme penurunan kolesterol oleh kecambah kacang komak mungkin disebabkan oleh empat kemungkinan
lainnya. Lovati et al. 1992 berdasarkan penelitiannya menyimpulkan bahwa
peptida hasil hidrolisis fraksi globulin 7S protein kedelai secara langsung meningkatkan LDL reseptor dan secara bersamaan menaikkan degradasi LDL.
Aktivitas fraksi globulin 7S ini yang diduga bertanggungjawab terhadap sifat hipokolesterolemik protein kedelai. Diduga fraksi globulin 7S kacang komak,
47
yang terdapat dalam jumlah sangat tinggi Subagio, 2006, memiliki aktivitas serupa dengan fraksi globulin 7S kedelai. Hal ini didasarkan penelitian
Khodijah 2003 yang menemukan kemiripan pola elektroforesis konsentrat protein globulin 7S dan 11S kacang komak dengan pola elektroforesis kacang
kedelai. Oleh karena itu, penurunan kolesterol serum tikus kemungkinan terjadi akibat aktivitas hipokolesterolemik dari fraksi globulin 7S protein
kecambah kacang komak. Kemungkinan peranan serat kecambah kacang komak bukan yang utama
dalam menurunkan kolesterol serum tikus. Komponen serat pangan dari tepung kecambah kacang komak didominasi oleh serat tidak larut Anita,
2009 sehingga serat larut ransum kecambah kacang komak yang berperan penting dalam menurunkan kolesterol serum Anderson et al., 1999 hanya
terdapat dalam jumlah yang sedikit, yaitu sebanyak 2.26. Serat pangan larut berperan mengikat asam empedu, mencegah reabsorpsi empedu sehingga
meningkatkan konversi kolesterol dari serum darah menjadi asam empedu Muchtadi, 2001. Peranan serat tidak larut dalam menurunkan kadar
kolesterol serum adalah dengan menurunkan tingkat konsumsi dan mencegah pembentukan misel di dalam usus Anderson et al., 1999 sehingga
penyerapan lipid, termasuk kolesterol, menurun. Senyawa-senyawa antinutrisi yang terdapat dalam kecambah kacang
komak yaitu antitripsin, fitat dan tanin dapat berperan dalam menurunkan kolesterol total serum. Antitripsin mampu membentuk kompleks dengan
protein tripsin Muchtadi, 1989 menyebabkan peningkatan sekresi hormon kolesistokinin CCK. Hormon CCK merangsang aktivitas pankreas untuk
melepaskan enzim tripsin lebih banyak Muchtadi, 1989 dan merangsang sintesis asam empedu dari kolesterol sehingga mendorong pengeluaran
kolesterol Erdman, 2000 melalui empedu. Namun, sekitar 98 dari asam empedu diabsorpsi ulang oleh hati Muchtadi et al., 1983. Diperkirakan efek
hipokolesterolemik dari antitripsin tidak berdiri sendiri, namun bersinergi bersama komponen-komponen lain pada kacang komak yang mampu
mengikat dan mengurangi reabsorpsi asam empedu sehingga menunjang pengeluaran kolesterol melalui feses.
48
Asam fitat juga diketahui berperan dalam menurunkan kolesterol total serum. Lee et al. 2006 mengungkapkan adanya penurunan kolesterol serum
dan peningkatan kadar kolesterol feses tikus yang diberi diet fitat. Hal ini menunjukkan mekanisme penurunan kolesterol dengan pembuangan melalui
feses. Mekanisme lain diungkapkan Shi et al. 2004, yaitu fitat menghambat enzim
-amilase sehingga menurunkan kadar glukosa darah dan konsentrasi insulin. Penurunan kadar insulin ini menghambat biosintesis kolesterol oleh
hati Chen et al., 2008. Penghambatan terhadap sintesis kolesterol menurut Chen et al. 2008 merupakan mekanisme yang paling efektif dalam
menurunkan kolesterol serum. Senyawa antinutrisi lainnya yang terdapat dalam kacang komak, yaitu tanin juga berperan dalam menurunkan kolesterol
serum. Mekanisme penurunan yang diungkapkan Park et al. 2002 adalah dengan menghambat aktivitas HMG-CoA reduktase dan ACAT. Oleh karena
itu, diduga kandungan fitat dan tanin dalam kecambah kacang komak ikut berperan dalam menurunkan kadar kolesterol serum.
Meskipun berperan dalam menurnkan kadar kolesterol serum, perlu diperhatikan bahwa mengkonsumsi fitat dan tanin dalam jumlah yang tinggi
akan menyebabkan defisiensi mineral tertentu Potter, 1995. Oleh karena itu, efek dari senyawa-senyawa antinutrisi ini akan bernilai fungsional hanya pada
orang yang mempunyai status gizi dan kecukupan mineral yang baik.
2. Kadar Trigliserida
