11
3 KULTUR MERISTEM TIP UNTUK ELIMINASI VIRUS
OYDV PADA BAWANG MERAH
Abstract
The purposes of this study were to determine the best media with PGR for meristem tip growth and to evaluate meristem tip culture potential for OYDV
elimination in shallot. This study used combination of PGRs 0.25 mg L
-1
GA
3
, 0.25 mg L
-1
2-ip, BAP
,
kinetin with or without 0.1 mg L
-1
IAA and media without PGR. This research was conducted saparately in two shallot cultivars Bima Brebes and
Tiron. The research was arranged in completely randomized block design with 8 combination of media levels and 3 replications. The result showed that media
without PGR was the most efficient for meristem tip growth. Primary shoot was growing without callusing. RT-PCR analysis showed that all the tested samples
were still infected by OYDV. It indicated that meristem tip culture method did not eliminate OYDV. It is suggested that this method must be combined with other
methods in order to eliminate virus effectively.
Keywords: in vitro, PGR, RT-PCR.
Abstrak
Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan media dengan kandungan ZPT yang paling baik untuk pertumbuhan meristem tip dan untuk mengevaluasi potensi
kultur meristem tip dalam mengeliminasi virus OYDV pada tanaman bawang merah. Penelitian ini menggunakan 0.25 mg L
-1
GA
3,
0.25 mg L
-1
2-ip, BAP, kinetin dengan penambahan atau tanpa 0.1 mg L
-1
IAA serta media tanpa ZPT. Percobaan dilakukan secara terpisah pada cv. Bima Brebes dan Tiron yang disusun
menggunakan rancangan kelompok lengkap teracak dengan 8 komposisi media dan 3 ulangan. Hasil yang didapat menunjukkan bahwa media tanpa penambahan ZPT
paling efisien untuk pertumbuhan meristem tip. Tunas utama yang tumbuh tanpa diikuti pembentukan kalus. Analisis RT-PCR menunjukkan bahwa seluruh sampel
yang dianalisis masih terinfeksi OYDV. Hal ini menunjukkan bahwa kultur meristem tip masih belum dapat mengeliminasi virus OYDV, sehingga metode ini
perlu dikombinasikan dengan metode lainnya agar dapat mengeliminasi virus secara efektif.
Katakunci: in vitro, RT-PCR, ZPT.
12
3.1 Pendahuluan
Virus merupakan salah satu masalah yang dianggap penting karena berdampak terhadap menurunnya kualitas dan kuantitas hasil panen Elnagar et al.
2009. Virus dapat menyebar dengan mudah melalui perbanyakan tanaman yang dilakukan secara vegetatif, yaitu menggunakan benih yang terinfeksi virus dan
selanjutnya umbi yang tumbuh dapat menjadi inokulum bagi tanaman sehat lainnya Gunaeni et al. 2011. Onion yellow dwarf virus OYDV merupakan virus yang
dianggap berbahaya bagi tanaman bawang Brewster 2008. Infeksi OYDV dapat mengurangi bobot umbi dan menurunkan hasil panen yang dapat mencapai 60.
Dampak infeksi menjadi lebih parah apabila terdapat infeksi gabungan dengan virus lainya seperti Leek yellow stripe virus Lot et al. 1998. Namun permasalahan
tersebut dapat diatasi, salah satunya yaitu dengan cara penggunaan bahan tanam bebas virus Agrios 2002. Penggunan bahan tanam bebas virus dapat
meningkatkan hasil panen dan mengurangi dampak negatif dari penanaman umbi yang telah terinfeksi virus kronis Conci et al. 2003.
Kultur meristem tip merupakan metode yang umum digunakan untuk mendapatkan tanaman bebas virus. Hal ini didasari oleh asumsi bahwa bagian
kubah apikal bebas dari infeksi virus atau mengandung sedikit konsentrasi virus Wang dan Hu 1980. Metode ini telah diaplikasikan oleh Verbeek et al. 1995 dan
Taşkin et al. 2013 pada bawang putih dan berhasil mendapat tanaman yang bebas dari OYDV.
Kultur meristem tip membutuhkan penambahan zat pengatur tumbuh ZPT agar meristem tip dapat tumbuh dengan optimal. ZPT yang umum digunakan untuk
kultur meristem tip, yaitu auksin, sitokinin maupun giberelin Bhojwani dan Dantu 2013. Aplikasi sitokinin 2-ip, BAP, dan kinetin dengan konsentrasi 0.5 - 2.0 mg
L
-1
dilaporkan dapat menginduksi terjadinya multiplikasi tunas pada meristem tip bawang putih, baik pemberian dalam bentuk kombinasi auksin-sitokinin ataupun
sitokinin tunggal Taşkin et al. 2013 ; Gull et al. 2014. Penggunaan GA
3
dilaporkan menghasilkan pada pertumbuhan tunas anyelir yang normal tanpa disertai
multiplikasi Ashnayi et al. 2012. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan media dengan kandungan ZPT yang paling baik untuk pertumbuhan tunas meristem
tip bawang merah secara in vitro dan mengevaluasi potensi kultur meristem tip dalam mengeliminasi OYDV.
3.2 Bahan dan Metode 3.2.1 Waktu dan Tempat
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Kultur Jaringan 3 dan Labroraturium Mikroteknik, Departemen Agronomi dan Hortikultura IPB serta
Laboratorium Virologi Tumbuhan, Departemen Proteksi Tanaman IPB, pada bulan Juni 2015 hingga Juni 2016.
3.2.2 Deteksi Awal Virus terhadap Umbi Bawang Merah
Deteksi awal hanya dilakukan pada bawang merah cv. Tiron, karena diasumsikan Bima Brebes telah terinfeksi OYDV yang merujuk pada laporan
Wulandari 2016 bahwa umbi yang dideteksi 100 telah terinfeksi virus. Deteksi
