dengan konsentrasi 500 ppm, 200 ppm, 100 ppm, dan 50 ppm dengan menggunakan rumus pengenceran:
V
1
M
1
=V
2
M
2
keterangan : V
1
= volume awal M
1
= konsentrasi awal V
2
= volume akhir M
2
= konsentrasi akhir
3.7.4 Prosedur Uji Toksisitas dengan Metode BSLT.
5 buah tabung reaksi disiapkan sebagai media uji. Menuangkan 5 mL air laut ke dalam masing-masing tabung reaksi. Memindahkan
sebagian larva Artemia salina Leach berumur 48 jam ke dalam cawan petri untuk memudahkan pengambilan larva. Pada masing-masing tabung reaksi,
dituangkan 10 larva udang menggunakan pipet tetes. Untuk memudahkan pengamatan, maka digunakan lup. Setelah itu, meneteskan 1 mL ekstrak
pada tabung reaksi menggunakan mikropipet. Kemudian, menambahkan air laut sehingga volume dalam masing-masing tabung reaksi menjadi 10
mL. Tabel 3.1 Data Konsentrasi Ekstrak pada Tabung Reaksi
Tabung reaksi I
Tabung reaksi II Tabung reaksi
III Tabung reaksi
IV Tabung reaksi V
10 larva udang + 1
mL konsentrasi
ekstrak 1000 ppm
+ 9 mL air laut
10 larva udang + 1 mL konsentrasi
ekstrak 500 ppm + 9 mL air laut
10 larva udang + 1 mL konsentrasi
ekstrak 200 ppm + 9 mL air laut
10 larva udang + 1 mL konsentrasi
ekstrak 100 ppm + 9 mL air laut
10 larva udang + 1 mL konsentrasi
ekstrak 50 ppm + 9 mL air laut
Masing-masing tabung reaksi ditutup atasnya dengan alumunium foil yang sedikit dilubangi untuk aliran udara. Dilakukan 3 kali
pengulangan triplo pada setiap konsentrasi. Dilakukan pengadukan agar
32
larutan menjadi homogen. Menyiapkan kontrol negatif, yaitu tabung reaksi yang berisi air laut dan 10 larva udang tanpa penambahan larutan ekstrak.
Setelah itu, larutan dibiarkan selama 24 jam. Setelah 24 jam, kemudian dihitung jumlah larva yang masih hidup pada masing-masing tabung
reaksi. Kriteria standar untuk mengukur kematian larva udang yaitu apabila larva udang tidak menunjukkan pergerakan selama beberapa detik
pengamatan. Perhitungan larva secara manual yaitu dengan mengamati larva di dalam tabung reaksi dengan bantuan lup, kemudian diamati dalam
kaca arloji dengan bantuan cahaya. Jumlah larva yang mati dihitung dengan mengurangkan jumlah total larva pada tiap konsentrasi dengan
jumlah larva yang masih hidup.
33,39
3.8 Alur Penelitian