Pemisahan Ig G dari serum
48
Isolasi dan Identifikasi secara Konvensional ISODIS 10272-1994
Sebanyak 298 sampel masing-masing sampel diambil 25 gram dimasukkan ke dalam kantong steril yang berisi media Nut Broth No 2 Oxoid yang telah
ditambah growth suplement Oxoid SR 232E dan dihancurkan menggunakan stomacher kemudian diinkubasikan pada suhu 42
o
C selama 24 jam dalam kondisi mikroerofilik 5 O
2
, 10, CO
2
, 85 N
2
. Inkubasi dilakukan menggunakan jar yang telah diisi CampyGen oxoid. Setelah diinkubasi selanjutnya kultur
diinokulasikan pada media Campylobacter Blood Free Selective Agar Base modified CCDA-Preston Oxoid yang mengandung CCDA selective suplement
Oxoid SR 155E, kemudian diinkubasikan kembali pada kondisi mikroerofilik seperti di atas selama 24-48 jam. Selanjutnya dilakukan pewarnaan Gram dan
pemeriksaan mikroskopis. Identifikasi dilakukan dengan uji oksidase, motilitas, fermentasi glukosa, laktosa, sukrosa Barrow Feltham 2003. Untuk konfirmasi
dilakukan secara biokimia menggunakan API Campy test BioMerieux, Perancis untuk menentukan spesies C. jejuni atau C. coli.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada penelitian ini sebanyak 298 sampel karkas ayam dari pasar tradisional dan swalayan di daerah DKI Jakarta, Jawa Barat Bogor dan Sukabumi dan Jawa
Tengah Kudus dan Demak telah dilakukan isolasi untuk mengetahui adanya kontaminasi Campylobacter sp. dari tahun 2009 sampai 2011. Sampel diambil
setiap tahun pada lokasi yang berbeda dengan jumlah yang tidak berbeda signifikan pada pasar tradisional dan swalayan. Sampel karkas ayam sebanyak 149 yang
diperoleh dari pasar tradisional dan 149 dari swalayan dilakukan isolasi secara konvensional sesuai dengan ISODIS 10272-1994.
Isolasi secara konvensional menggunakan media cair yang telah ditambahkan growth supplement dan selective supplement kemudian dilakukan
inkubasi secara mikroaerophilic menggunakan jar Gambar 10 pada suhu 42
o
C. Selanjutnya dilakukan subkultur pada media agar selektif modified CCDA-Preston
diperoleh 59 isolat Campylobacter sp. Isolat murni yang tumbuh pada media agar selektif disajikan pada Gambar 11. Selanjutnya dilakukan uji konfirmasi secara
mikroskopis dengan pewarnaan Gram Gambar 12 dan uji katalase Gambar 13 serta oksidase Gambar 14. Identifikasi isolat yang diperoleh dilakukan
49 menggunakan API Campy BioMerieux, Perancis dapat dilihat pada Gambar 15.
Hasil identifikasi dapat dilihat pada Tabel 6.
Gambar 10 Jar yang digunakan untuk inkubasi secara mikroaerofilik
Gambar 11 Koloni C. jejuni yang ditumbuhkan pada media CCDA