Pembuatan Media Nutrient Broth NB Pembuatan Medium Potato Dextrose Broth PDB Pembuatan Media Potato Dextrose Yeast PDY Pembuatan Media Nutrient Agar NA miring

3.3. Cara Kerja

3.3.1. Pembuatan Media

3.3.1.1. Pembuatan Media Nutrient Broth NB

Media NB sebanyak 6,5 gram dilarutkan dengan 500 ml aquadest dalam beaker glass 1000 ml. Media tersebut dicampur sampai merata dengan cara pengadukan dan pemanasan menggunakan hot plate and stirrer. Campuran media tersebut dimasukkan ke dalam 5 labu Erlenmeyer 500 ml masing-masing sebanyak 100 ml, kemudian disterilisasi dalam autoklaf pada suhu 121 C, tekanan 1 atm selama 15 menit.

3.3.1.2. Pembuatan Medium Potato Dextrose Broth PDB

Media PDB sebanyak 0,66 gram dilarutkan dengan 20 ml aquadest dalam labu Erlenmeyer 250 ml. Media tersebut dicampur sampai merata dengan cara pengadukan dan pemanasan menggunakan hot plate and stirrer. Campuran media tersebut disterilisasi dalam autoklaf pada suhu 121 C, tekanan 1 atm selama 15 menit.

3.3.1.3. Pembuatan Media Potato Dextrose Yeast PDY

PDB dan YE masing-masing sebanyak 26,5 gram dan 2 gram dilarutkan dengan 1000 ml aquadest dalam gelas ukur 1500 ml. Media tersebut dicampur sampai merata dengan cara pengadukan dan pemanasan menggunakan hot plate and stirrer. Sambil diaduk, campuran media tersebut diukur pH sampai 6 dengan cara penambahan beberapa tetes larutan NaOH. Campuran media tersebut dimasukkan ke dalam 5 tabung reaksi masing-masing sebanyak 5 ml dan ke dalam 10 Erlenmeyer 500 ml masing-masing 100 ml duplo. Media tersebut disterilisasi dalam autoklaf pada suhu 121 C, tekanan 1 atm selama 15 menit.

3.3.1.4. Pembuatan Media Nutrient Agar NA miring

Media NA sebanyak 2,8 gram dilarutkan dengan 100 ml aquadest dalam labu Erlenmeyer 250 ml. Media tersebut dicampur sampai merata dengan cara pengadukan dan pemanasan menggunakan hot plate and stirrer dan microwave. Campuran media tersebut dimasukkan ke dalam 10 tabung reaksi masing-masing sebanyak 8 ml, kemudian disterilisasi dalam autoklaf pada suhu 121 C, tekanan 1 atm selama 15 menit. Setelah disterilisasi, tabung reaksi tersebut diletakkan dalam posisi miring, sehingga saat media menjadi padat akan terbentuk media agar miring dalam tabung reaksi.

3.3.1.5. Pembuatan Media Potato Dextrose Agar PDA miring