11. Residu ditambahkan 10 ml H
2
SO
4
72. 12. Larutan direndam pada suhu kamar selama 4 jam.
13. Larutan ditambahkan 150 ml H
2
SO
4
1N. 14. Larutan direfluks pada suhu 100
o
C dengan penangas air selama 1 jam. 15. Hasilnya disaring dengan kertas saring.
16. Residu dicuci dengan air panas sampai netral 400 mL. 17. Residu dikeringkan pada 105
o
C sampai konstan dan ditimbang d. 18. Kadar hemiselulosa dihitung dengan rumus:
ℎ
= × 100
......................................... 3.1 19. Kadar selulosa dihitung dengan rumus:
= × 100
......................................... 3.2 20. Kadar lignin dihitung dengan rumus:
= × 100
............................................. 3.3
3.3.12. Prosedur Analisis Kadar Air
Prosedur analisis kadar air adalah sebagai berikut: 1. Sebanyak 5 g sampel ditaruh di cawan porselin yang sudah dialasi aluminium
foil. 2. Sampel dikeringkan dalam oven pada 120
o
C selama 2 jam. 3. Massa hilang dikalkulasikan sebagai persentase kadar air.
4. Prosedur diulangi sebanyak 2 kali.
Universitas Sumatera Utara
3.3.13. Prosedur Analisis Kadar Gula
Prosedur analisa kadar gula adalah sebagai berikut: 1. Reagen DNS disiapkan.
2. Sebanyak 0,5 ml sampel dimasukkan ke tabung reaksi. 3. Sebanyak 0,5 ml reagen ditambahkan.
4. Campuran dipanaskan pada 90
o
C selama 10 menit. 5. Campuran dibiarkan mendingin.
6. Sebanyak 3 ml aquades ditambahkan. 7. Campuran digoyang atau divorteks sampai merata.
8. Cuvet dicuci dengan methanol dan dibiarkan kering. 9. Spektrofotometer disiapkan untuk pembacaan.
10. Campuran dimasukkan ke cuvet. 11. Cuvet dilap dengan tisu lensa dan dimasukkan ke spektrofotometer.
12. Nilai bacaan spektrofotometer dicatat dan dikonversi ke konsentrasi glukosa ekuivalen menggunakan kurva kalibrasi larutan glukosa standar dengan
konsentrasi 0 – 3 mgl.
3.3.14. Prosedur Assay Enzim
Prosedur assay enzim adalah sebagai berikut: 1. Larutan buffer sitrat pH 5 disiapkan.
2. Enzim yang hendak dianalisis diencerkan dengan buffer pada faktor pengenceran tertentu.
Universitas Sumatera Utara
3. Sebanyak 0,5 ml enzim dimasukkan ke tabung reaksi. 4. Sebanyak 5 mg CMC dan 0,5 ml aquades ditambahkan.
5. Campuran diinkubasi selama 30 menit pada 50
o
C. 6. Enzim diinaktivasi pada 90
o
C selama 10 menit. 7. Campuran dibiarkan mendingin.
8. Sebanyak 0,5 ml campuran dianalisis sesuai prosedur analisis kadar gula. 9. Prosedur diulang untuk faktor pengenceran lain.
10. Nilai faktor pengenceran dan kadar gula diplot pada grafik logaritma. 11. Faktor pengenceran kritis pada nilai kadar gula 0,5 mg diekstrapolasi.
12. Nilai aktivitas enzim dikalkulasi dengan rumus:
=
,
.......................... 3.4
3.3.15. Prosedur Analisis Kadar Etanol Prosedur Analisis Kadar Etanol adalah sebagai berikut:
