25
BAB III METODE PENELITIAN
Metode yang digunakan adalah metode deskriptif meliputi pengumpulan dan pengolahan sampel, pemeriksaan karakterisasi, pemeriksaan golongan
senyawa kimia, pembuatan ekstrak n-heksan, analisis ekstrak secara kromatografi lapis tipis KLT, yang dilanjutkan dengan KLT preparatif. Isolat yang diperoleh
diuji kemurniannya dengan KLT satu arah dan dua arah, identifikasi isolat secara spektrofotometri ultraviolet dan spektrofotometri inframerah. Penelitian dilakukan
di Laboratorium Fitokimia dan Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
3.1 Alat-alat yang digunakan
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah alat-alat gelas laboratorium Pyrex, Iwaki, neraca kasar Saherand, lemari pengering, blender
Panasonic, eksikator, mikroskop Olympus, seperangkat alat destilasi, seperangkat alat penetapan kadar air, oven listrik Stork, hair dryer Maspion,
neraca analitik Vibra AJ, penangas air Yenaco, seperangkat alat kromatografi lapis tipis preparatif, spektrofotometer ultraviolet Shimadzu dan
spektrofotometer inframerah Shimadzu.
3.2 Bahan-bahan yang digunakan Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah sponge
Suberites diversicolor Becking Lim sebagai sampel. Bahan-bahan kimia yang
26 digunakan kecuali dinyatakan lain adalah berkualitas pro analisa yaitu n-heksan
pro analisa, benzen, etilasetat, amil alkohol, asam asetat anhidrat, asam sulfat pekat, toluen, asam klorida pekat, kalium bromida, plat pra lapis silika gel 60
GF
254
, metanol, kloroform, asam nitrat dan akuades.
3.3 Penyiapan Sampel 3.3.1 Pengumpulan sponge
Pengumpulan sampel dilakukan dengan cara purposif yaitu tanpa
membandingkan dengan hewan yang sama dari daerah lain. Hewan yang digunakan adalah sponge Suberites diversicolor Becking Lim yang diambil dari
Pulau Mursala, Tapanuli Tengah provinsi Sumatera Utara.
3.3.2 Identifikasi sponge
Identifikasi sponge dilakukan di Laboratorium Ekologi Prodi Biologi FMIPA-Institut Teknologi Sepuluh November ITS Surabaya adalah jenis
Suberites diversicolor Becking Lim, suku Suberitiidae. Hasil identifikasi dapat dilihat pada Lampiran 1, halaman 49.
3.3.3 Pengolahan sponge
Sponge yang telah dikumpulkan, disortasi basah yaitu memisahkan sponge dari pengotornya, kemudian sponge yang telah terkumpul dicuci dengan
air mengalir untuk menghilangkan pengotor yang masih melekat, ditiriskan dan ditimbang berat sponge Suberites diversicolor Becking Lim adalah 2,2 kg.
Sponge dipotong-potong, kemudian dimasukkan ke dalam lemari pengering pada suhu 40-50
o
C selama 6 hari. Berat simplisia sponge Suberites diversicolor Becking Lim adalah 400 g. Simplisia selanjutnya diserbuk dengan