57
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
1. Fraksi etil asetat ekstrak metanolik kulit batang apel beludru tiap gram memiliki kandungan fenolik total sebesar 1311,3 ±72,80 mg ekivalen asam
galat taraf kepercayaan 95
2. Nilai aktivitas antioksidan fraksi etil asetat ekstrak metanolik kulit batang apel beludru dengan menggunakan radikal bebas DPPH yang dinyatakan sebagai
IC
50
sebesar 14,3 ± 1,42 µgmL taraf kepercayaan 95 dan tergolong sangat kuat.
B. Saran
Perlu dilakukan pemanenan kulit batang apel beludru yang diambil dari tanaman yang telah tua atau umur yang tepat pada musim kemarau sehingga kulit
kayu mudah dikelupas untuk mendapatkan metabolit sekunder yang maksimal.
DAFTAR PUSTAKA
Andayani, R., Lisawati Y., dan Maimunah, 2008, Penentuan Aktivitas Antioksidan Kadar Fenolat Total dan Likopen Pada Buah Tomat Solanum
Lycopersicum L., Jurnal Sains dan Teknologi Farmasi., 121, 31-37.
Andersen, O. M., Markham, dan Kenneth R., 2006, Flavonoids, Chemistry
Biochemistryand Applications, Taylor and Francis Group, United States of America, pp. 2-3.
Apak, R., Guclu, K., Demirata, B., Özyürek, M., Celik, S. E., Bektaşoğlu , B., et
al., 2007, Comparative Evaluation of Various Total Antioxidant Capacity Assays Applied to Phenolic Compounds with the CUPRAC Assay, 12,
1496-1547.
Aqil, F., Ahmad, I., dan Mehmood, Z., 2006, Antioxidant and Free Radical Scavenging Propertis of Tweleve Traditionally Used Indian Medical
Plants, Turk J Biol., 30, 177-183. Badarinath, A.V., Mallikarjuna, R. K., Chetty, C., Madhu, S. R., Rajan, T.V.S.,
Gnanaprakash, K., 2010, A Review on In-vitro Antioxidant Methods: Comparisions, Correlations and Considerations, Int. J. Pharm. Tech.
Research., 22, 1276-1285.
Bondet, V., Brand-Williams, W., dan Berset, C., 1997, Kinetics and Mechanisms of Antioxidant Activity using the DPPH• Free Radical Method, Lebensm.-
Wiss.U.-Technol., 30, 609 –615.
Dahlan, M. S., 2012, Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan, Salemba Medika, Jakarta, p.17.
Das, S.C., Hamid, K., Bulbul, I.I., Sultana, S., dan Islam, S., 2010, In Vitro Antioxidant Activity of Different Parts of the Plant Diospyros discolor,
J.Agric.Biol.Sci.Research., 64, 472-475.
Dehpour, A.A., Ebrahimzadeh, M.A., Fazel, N.S., dan Mohammad, N.S., 2009, Antioxidant Activity of The Methanol Extract of Ferula assafoetida and
Its Essential Oil Composition, Grasas Y Aceites, 604, 405-412. Depkes RI, 1986, Sediaan Galenik, Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan
Makanan, Jakarta, pp.10-12. Depkes RI, 2000, Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat, cetakan
pertama, Departemen Kesehatan RI, Jakarta, pp. 6, 10-13.
Depkes RI, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi, IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, pp. 7, 1036, 1061.
Duke, J.A., 2001, Handbook of Phytochemical Constituents of Gras Herbs and Other Economic Plants, CRC Press, Washington, D.C., p. 235.
Fadhli, 2008, Uji Fitokimia, http :www.scribd.comdoc16766643UjiFitokimia? Secret_password=autodown=pdf,diakses tanggal 15 Juni 2013.
Fatimah, 2012, Uji Kuantitatif Dna, Tesis, PBT Ahli Pertamina. Gandjar, I.G., dan Rohman, A., 2007, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar,
Yogyakarta, pp.229, 234, 255. Gutteridge, J. M. C., dan Halliwell, B., 2000, Free Radical in Biology and
Medicine; Oxford University Press: New York, 136-138. Howlader, M.S.I., Rahman, M.M., Khalipha, A.B.R., Ahmed, F., dan Rahman,
M.M., 2012, Antioxidant anad Antidiarrhoeal Potentiality of Diospyros blancoi, Int. J. Pharm., 85, 403-409.
International Plant Names Index, 2013, Author Details : Candolle, Alphonse Louis Pierre Pyramus de 1806-1893, http:www.ipni.orgipniauthorsearch
page. do diakses 11 Juli 2013.
Kalita, D., Kar, R., dan Handique, J. G., 2011, A Theoretical Study On The Antioxidant Property Of Gallic Acid And Its Derivatives, J.Theor.
Comput.Chem., 112, 391-402. Lee, M.H., Jiang, C.B., Juan, S.H., Lin R.H., dan Hou, W.C., 2006, Antioxidant
and heme oxygenase-1 HO-1-induced effects of selected Taiwanese plants, J.Fitote., 77, 109
–115. Markham, K.R., 1988, Techniques of Flavoniods Identification, diterjemahkan
oleh Padmawinata, K., hal.15, Penerbit ITB, Bandung. Marxen, K., Vanselow, K.H., Lippemeier, S., Hitsze, R., Ruser, A., dan Hansen,
U., 2007, Determination of DPPH Radical Oxidation Caused by Methanolic Extract of Some Mircroalgal Species by Linear Regression
Analysis of Spectrofotometric Measurements, Sensors, 7.
Muharni, 2010, Profil Kandungan Kimia dan Potensi Tumbuhan Manggis Hutan
Garcinia bancan Miq. sebagai Sumber Senyawa Antioksidan , Jurnal Pembangunan Manusia, 412.
Mursyidi, A., 1990, Analisis Metabolit Sekunder , Proyek Pengembangan Pusat Fasilitas Bersama Antar Universitas , UGM, p.175.
Molyneux P., 2004, The Use of Stable Free Radical Diphenylpicryl HydrazylDPPH for Estimating Antioxidant Activity, J.Sci.Technol., 6.
Morton, J.F., 1987, Fruits of warm climates: Mabolo, http:www.hortpurdue.edu newcorpmortonmabolo, diakses tanggal 17 Juni 2013.
Nely, F., 2007, Aktivitas Antioksidan Rempah Pasar dan Bubuk Rempah Pabrik dengan Metode Polifenol dan Uji Atom Active Oxygen Method, Tesis,
3, Institut Pertanian Bogor, Bogor Ningsih,W., 2007, Evaluasi Senyawa Fenolik Asam Ferulat dan Asam P-
Kumarat pada Biji, Kecambah dan Tempe Kacang Tunggak Vigna Unguiculata, Tesis, Institut Pertanian Bogor, Bogor
Nusarini, N.M.R., 2007, Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi Etil Asetat Ekstrak metanolik Herba Ketul Bidens pilosa L., Tesis, 15-20, Universitas
Gadjah Mada, Yogyakarta Prakash, A., Rigelhof, F., dan Miller, E., 2001, Antioxidant Activity, Medalliaon
Laboratories. Prior, R.L., Wu, X., dan Schaich, K., 2005, Standardized Methods for the
Determination of Antioxidant Capacity and Phenolics in Foods and Dietary Supplements, J. Agric. Food Chem., 5510, 4290.
Sambada, D. L. E., 2011, Uji Aktivitas Antioksidan Menggunakan Radikal DPPH dan Penetapan Kandungan Fenolik Total Fraksi Air Ekstrak Etanolik Daun
Selasih, Tesis, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta
Singleton, V. L, dan Rossi, J. A., 1965, Colorimetry of Total Phenolics with Phosphomolybdic-phosphotungstic Acid Reagents, Am. J. Enol. Vitic., 16,
144-158. Snyder L. R., dan Kirkland, J. J., 1997, Practical HPLC Method Development,
2nd Ed, John Wiley and Sons, pp. 273-290. Sultana, B., Anwar, F., dan Ashraf, M., 2009, Effect of Extraction Solvent or
Technique on the Antioxidant Aivity of Selected Medicinal Plant Extracts, Inter.J.Mol.Sci., 14, 2167-2180.
Sunardi, K. I., 2007, Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Belimbing Wuluh Averrhoa Bilimbi, L. terhadap 1,1-Diphenyl-2-Picrylhidrazyl DPPH,
Seminar Nasional Teknologi, 1-9.
Rathee. J., Patro, B., Mula, S., Gamre, S., dan Chattopadadhyay, S., 2006, Antioxidant activity of Piper betle leaf extract and its constituents with
gradient HPLC, JAVC., 54, 9046 –9054.
Rohman, A., Riyanto, S., Dahliyanti, R., Pratomo, D. B., 2009, Penangkapan Radikal 2,2-difenil-pikrihirazil oleh ekstrak buah Psidium guajava. L dan
Averrhoa carambola L, Jurnal Kefarmasian Indonesia., 71, 1-5. United
States Department
of Agriculture
NRCS, 2013,
Mabolo , http:plants.usda.govjavaprofile?symbol=dibl3, diakses 17 Juni 2013.
Wibawa, I., 2007, Ekstraksi Cair-Cair, http:indrawibawads.files.wordpress.com 201201ekstraksi-cair-cairindra-wibawa-tkim-unila.pdf, diakses tanggal
15 Juni 2013 Winarsi, W., 2007, Antioksidan Alami dan Radikal Bebas, Kanisius, Yogyakarta,
pp. 13, 77. Witt, S., Lalk, M., Hager, C., dan Voigt, B., 2010, DPPH-Test: Determination of
Scavenger Properties, http:www.baltic-analytics.deindex.php?id=7L=, diakses tanggal 18 Juni 2013.
Zou, Y., Lu, Y., dan Wei, D., 2004, Antioxidant Activity of a Flavonoid-Rich Extract of Hypericum perforatum L. in Vitro, J.Agric.Food Chem., 52,
5032-5039.
LAMPIRAN Lampiran 1. Surat Pengesahan Determinasi Tanaman Apel Beludru
Diospyros Blancoi A. DC.
Lampiran 2. Gambar Tanaman Apel Beludru Yang Diambil di Kampus III Universitas Sanata Dharma Yogyakarta
Lampiran 3. Kulit Batang Apel Beludru
Lampiran 4. Hasil Ekstrak Metanol dan Perhitungan Rendemen Fraksi Etil Asetat
a. Hasil ekstrak metanol yang diperoleh dari maserasi sebesar 400 mL b. Rendemen fraksi etil asetat
Penimbangan Cawan 1 g Cawan 2 g
Bobot cawan 34,090
52,540
Bobot cawan+ekstrak
37,410 57,470
Bobot ekstrak
3,320 4,930
Bobot ekstrak total
8,250
Bobot kulit batang yang digunakan = 200 g
Rendemen ekstrak metanolik =
� 100 =
x 100 =4,125
Lampiran 5. Data Penimbangan Bahan Untuk Pengujian Aktivitas Antioksidan
1.DPPH Operating time kuersetin
Penimbangan Replikasi 1
Replikasi 2 Replikasi 3
Bobot kertas 0,2125 g
0,2086 g 0,2167 g
Bobot kertas +DPPH 0,2286 g
0,2245 g 0,2324 g
Bobot kertas + sisa 0,2126 g
0,2088 g 0,2186 g
Bobot DPPH 0,0160 g
0,0157 g 0,0156 g
2. DPPH Seri konsentrasi kuersetin
Penimbangan Replikasi 1
Replikasi 2 Replikasi 3
Bobot kertas 0,2132 g
0,2093 g 0,2251 g
Bobot kertas +DPPH 0,2291 g
0,2254 g 0,2375 g
Bobot kertas + sisa 0,2133 g
0,2095 g 0,2216 g
Bobot DPPH 0,0158 g
0,0159 g 0,0158 g
3. DPPH Operating time sampel + seri sampel
Penimbangan Replikasi 1
Replikasi 2 Replikasi 3
Bobot kertas 0,2077 g
0,2115 g 0,2203 g
Bobot kertas +DPPH 0,2237 g
0,2275 g 0,2363 g
Bobot kertas + sisa 0,2079 g
0,2117 g 0,2204 g
Bobot DPPH 0,0158 g
0,0158 g 0,0159 g
4. Kuersetin
Penimbangan Replikasi 1
Replikasi 2 Replikasi 3
Bobot kertas 0,2136 g
0,2082 g 0,2192 g
Bobot kertas +kuersetin 0,2239 g
0,2185 g 0,2294 g
Bobot kertas + sisa 0,2137 g
0,2084 g 0,2195 g
Bobot kuersetin 0,0102 g
0,0101 g 0,0099 g
5. Penimbangan fraksi etil asetat kulit batang apel beludru
Penimbangan Replikasi 1 Replikasi 2
Replikasi 3 Bobot kertas
0,2132 g 0,2129 g
0,2073 g Bobot kertas +fraksi etil asetat
0,2235 g 0,2230 g
0,2173 g Bobot kertas + sisa
0,2134 g 0,2130 g
0,2074 g Bobot fraksi etil asetat
0,0101 g 0,0100 g
0,0099 g
Lampiran 6. Data Perhitungan Konsentrasi DPPH, Larutan Pembanding dan Larutan Uji
a. Konsentrasi DPPH Operating time kuersetin
1. Replikasi 1
BM = 394,33 Mol =
= = 0,0406 mmol
M= =
= 0,4060 mM
2. Replikasi 2
BM = 394,33 Mol =
= = 0,0398 mmol
M= =
= 0,3980 mM
3. Replikasi 3
BM = 394,33 Mol =
= = 0,0396 mmol
M= =
= 0,3960 mM
b. Konsentrasi DPPH Seri konsentrasi kuersetin 1. Replikasi 1
BM = 394,33 Mol =
= = 0,0401 mmol
M= =
= 0,4010 mM
2. Replikasi 2
BM = 394,33 Mol =
= = 0,0403 mmol
M= =
= 0,4030 mM
3. Replikasi 3
BM = 394,33 Mol =
= = 0,0401mmol
M= =
= 0,4010 mM
c. Konsentrasi DPPH Operating time + seri sampel
1. Replikasi 1
BM = 394,33 Mol =
= = 0,0401 mmol
M= =
= 0,4010 mM
2. Replikasi 2
BM = 394,33 Mol =
= = 0,0401 mmol
M= =
= 0,4010 mM
3. Replikasi 3
BM = 394,33 Mol =
= = 0,0403 mmol
M= =
= 0,403 mM
d. Konsentrasi Kuersetin 1. Konsentrasi larutan stok
Replikasi 1 Replikasi 2
Replikasi 3
10,2 mg = 10200 µg 10,1 mg = 10100 µg
9,9mg =9900 µg = 1020 µgmL
= 1010 µgmL = 990 µgmL
2. Konsentrasi larutan intermediet Replikasi 1
C
1
x V
1
= C
2
x V
2
1020 µgmL x 1,0 mL = C
2
x 10 mL C
2
= 102 µgmL
Replikasi 2
C
1
x V
1
= C
2
x V
2
1010 µgmL x 1,0 mL = C
2
x 10 mL C
2
= 101 µgmL
Replikasi 3
C
1
x V
1
= C
2
x V
2
990 µgmL x 1,0 mL = C
2
x 10 mL C
2
= 99 µgmL
3. Konsentrasi seri larutan pembanding kuersetin
Seri larutan pembanding
Konsentrasi larutan pembanding kuersetin Replikasi 1
Replikasi 2 Replikasi 3
Seri 1 5,10 µgmL
5,05 µgmL 4,95 µgmL
Seri 2 7,65 µgmL
7,58 µgmL 7,43 µgmL
Seri 3 10,20 µgmL 10,10 µgmL
9,90 µgmL Seri 4
12,75 µgmL 12,63 µgmL 12,38 µgmL Seri 5
15,30 µgmL 15,15 µgmL 14,85 µgmL
Contoh perhitungan konsentrasi larutan pembanding Replikasi 1 :
Larutan intermediet =
102 µgmL Konsentrasi larutan pembanding seri 1
C
1
x V
1
= C
2
x V
2
102 µgmL x 0,5 mL = C
2
x 10 mL C
2
= 5,10 µgmL
Contoh perhitungan konsentrasi larutan pembanding Replikasi 2 :
Larutan intermediet =
101 µgmL Konsentrasi larutan pembanding seri 1
C
1
x V
1
= C
2
x V
2
101 µgmL x 0,5 mL = C
2
x 10 mL C
2
= 5,05 µgmL
Contoh perhitungan konsentrasi larutan pembanding Replikasi 3 :
Larutan intermediet =
99 µgmL Konsentrasi larutan pembanding seri 1
C
1
x V
1
= C
2
x V
2
99 µgmL x 0,5 mL = C
2
x 10 mL C
2
= 4,95 µgmL
e. Fraksi etil asetat larutan uji 1.Konsentrasi larutan stok
Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
= 1010 µgmL = 1000 µgmL
= 990 µgmL
2.Konsentrasi larutan intermediet Replikasi 1
C
1
x V
1
= C
2
x V
2
1010 µgmL x 1,0 mL = C
2
x 10 mL C
2
= 101,0 µgmL
Replikasi 2
C
1
x V
1
= C
2
x V
2
1000 µgmL x 1,0 mL = C
2
x 10 mL C
2
= 100 µgmL
Replikasi 3
C
1
x V
1
= C
2
x V
2
990 µgmL x 1,0 mL = C
2
x 10 mL C
2
= 99 µgmL
3. Konsentrasi seri larutan uji
Seri larutan uji Konsentrasi larutan uji
Replikasi 1 Replikasi 2
Replikasi 3 Seri 1
7,58 µgmL 7,50 µgmL
7,43 µgmL Seri 2
10,10 µgmL 10,00 µgmL
9,90 µgmL Seri 3
12,63 µgmL 12,50 µgmL
12,38 µgmL Seri 4
15,15 µgmL 15,00 µgmL
14,85 µgmL Seri 5
17,68 µgmL 17,50 µgmL
17,33 µgmL Contoh perhitungan konsentrasi larutan uji Replikasi 1 :
Larutan intermediet
= 101 µgmL
Konsentrasi larutan uji seri 1 =
C
1
x V
1
= C
2
x V
2
101,0 µgmL x 0,75 mL =
C
2
x 10 mL C
2
= 7,57 µgmL
Lampiran 7. Optimasi Metode Uji Aktivitas Antioksidan a.
Penentuan maksimum 1.
Scanning DPPH 0,020 mM
2. Scanning DPPH 0,040 mM
3 .Scanning DPPH 0,080 mM
4.Plot scanning panjang gelombang maksimum gabungan
B. Penentuan operating time
