E. Hasil Optimasi Metode Uji Fenolik Total 1.
Penentuan operating time OT
Penentuan operating time bertujuan untuk mendapatkan waktu optimum dimana reaksi antara larutan baku pembanding asam galat dan larutan uji fraksi
etil asetat ekstrak metanolik kulit batang apel beludru terhadap reagen Folin- Ciocalteu. Penentuan operating time diperoleh ketika waktu absorbansi baku
pembanding dan larutan uji terhadap reagen sudah mulai stabil. Estimasi waktu yang digunakan adalah dalam tiga puluh menit dengan selang waktu lima menit.
Waktu akan dihitung setelah reagen dicampurkan dan absorbansi pertama dihitung setelah lima menit pertama. Panjang gelombang maksimum yang dipakai adalah
panjang gelombang maksimum teoritis, yaitu 750 nm.
Gambar 9. Grafik penentuan operating time asam galat
Gambar 10. Grafik penentuan operating time fraksi etil asetat
Gambar 9 merupakan gambar yang mewakili penentuan operating time asam galat dari 3 replikasi dan dan diperoleh operating time asam galat, yaitu 20
menit karena pada waktu ini reaksi sudah bereaksi sempurna dan reaksi mulai stabil. Gambar 10 adalah penentuan operating time fraksi etil asetat ekstrak
metanolik kulit batang apel beludru dan diperoleh OT 40 menit. Makin lama waktu yang digunakan maka absorbansi yang dihasilkan juga semakin tinggi.
2. Penent uan panjang gelombang serapan maksimum maks
Penentuan panjang gelombang maksimum bertujuan untuk mendapatkan daerah serapan maksimum DPPH. Pada panjang gelombang maksimum akan
memberikan sensitifitas yang tinggi, sehingga dengan sedikit perubahan konsentrasi akan memberikan perubahan absorbansi yang besar. Absorbansi
sampel dihitung dengan autozero menggunakan pelarut metanol : air 1:1 dengan tujuan untuk mengetahu tidak adanya gangguan interferensi serapan dari pelarut
atau kontaminasi yang tercemar dalam metanol.
Tabel I. Hasil scanning panjang gelombang maksimum asam galat yang direaksikan
dengan Folin-Ciocalteu
Konsentrasi larutan Asam galat
µgmL
maksimum hasil scanning nm
maksimum yang
digunakannm maksimum
teoritis nm
50
751 751
750
100
751
150
751
Hasil scanning panjang gelombang maksimum asam galat yang direaksikan dengan Folin-Ciocateu dengan menggunakan tiga konsentrasi dan
diperoleh panjang gelombang maksimum, yaitu 751 nm.
F. Hasil Estimasi Kandungan Fenolik Total
Kategori