UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
5. Isolat kapang diamati dengan menggunakan mikroskop cahaya dengan perbesaran 100x, 200x, dan 400x Hafsari Asterina, 2012. Skema cara kerja
identifikasi isolat kapang endofit secara mikroskopik dapat dilihat pada lampiran 5.
3.3.6 Peremajaan Bakteri Uji
Peremajaan bakteri uji dilakukan dengan mengambil bakteri dari stok bakteri dalam media agar miring NA Nutrient Agar lalu diremajakan kembali pada media
agar miring NA yang baru dengan cara menggoreskan masing-masing bakteri uji menggunakan ose yang telah disterilkan dengan cara ose dipijarkan pada api
bunsen. Bakteri yang sudah digoreskan pada media agar miring NA yang baru kemudian diinkubasi pada suhu 37ºC selama 24 jam Atikah, 2013. Pengerjaan
dilakukan secara steril di dalam Laminar Air Flow Jauhari, 2010.
3.3.7 Identifikasi Bakteri Uji
Identifikasi bakteri uji dilakukan secara makroskopik dan mikroskopik pada bakteri uji yang berusia 24 jam Atikah, 2013.
3.3.7.1 Identifikasi Makroskopik
Identifikasi makroskopik dilakukan dengan cara mengamati morfologi dan pertumbuhan koloni yang meliputi; warna koloni, bentuk koloni, dan permukaan
koloni Rustanti, 2007.
3.3.7.2 Identifikasi Mikroskopik
Identifikasi Mikroskopik dilakukan dengan pewarnaan Gram. Bakteri uji diambil sebanyak satu ose kemudian diletakkan di atas kaca objek yang telah
ditetesi sedikit dengan NaCl 0,9. Bakteri disebar pada kaca objek dengan menggunakan ose bulat kemudian difiksasi dengan cara melewatkan preparat
tersebut di atas api bunsen. Larutan kristal violet diteteskan di atas preparat dan biarkan 1 menit, kemudian preparat dibilas dengan air mengalir. preparat kemudian
ditetesi dengan cairan lugol dan dibiarkan selama 45-60 detik, kemudian dibilas dengan air mengalir. Preparat selanjutnya diteteskan dengan alkohol 96 dan
digoyang-goyangkan selama 30 detik dan dibilas menggunakan air mengalir. Preparat selanjutnya ditetesi dengan safranin dan didiamkan selama 1-2 menit.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Preparat dibilas kembali menggunakan air mengalir dan dilakukan pengamatan dibawah mikroskop dengan perbesaran 100 kali Rachmayani, 2008.
3.3.8 Seleksi Isolat Kapang Endofit Penghasil Antibakteri
