UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
yang diberi kapur barus untuk menghindari kontaminasi serangga kecil. Skema cara kerja sterilisasi permukaan dan isolasi kapang endofit dapat dilihat pada lampiran
3.
3.3.4 Pemurnian Isolat Kapang Endofit
Pemurnian dilakukan
berdasarkan penampakan
morfologi secara
makroskopis yang meliputi warna dan bentuk koloni Ariyono, 2014. Kapang endofit yang tumbuh pada medium PDA hasil isolasi kemudian dimurnikan dengan
cara kapang diinokulasikan dengan menggunakan ose dan diletakan pada medium PDA yang baru. Isolat kapang endofit selanjutnya diinkubasi pada suhu ruang 27-
29 ⁰C selama 5-7 Noverita dkk., 2009. Pemurnian isolat kapang endofit dibuat
duplo pada agar miring sebagai stock culture dan working culture Handayani, 2015. Skema cara kerja pemurnian kapang endofit dapat dilihat pada lampiran 4.
3.3.5 Identifikasi Isolat Kapang Endofit
Karakteristik morfologi isolat kapang endofit dilakukan dengan cara isolat kapang endofit diremajakan pada media PDA, selanjutnya diinkubasi pada suhu
ruang selama 7 hari. Isolat kapang endofit kemudian diamati secara makroskopis untuk mengetahui karakteristik morfologi isolat kapang endofit yang meliputi;
diameter, permukaan koloni, terbentuknya zonasi, dan warna miselium Srikandace dkk, 2007.
Pengamatan morfologi secara mikroskopis pada kapang endofit dilakukan dengan cara membuat preparat terlebih dahulu untuk dilakukan pengamatan
menggunakan mikroskop cahaya. Cara pembuatan preparat sebagai berikut: 1. Inokulum kapang pada media agar diambil dari cawan petri dengan
menggunakan jarum ose. 2. Inokulum kapang tersebut diletakkan di atas kaca objek steril yang sudah
diteteskan dengan media PDA. 3. Kaca objek ditutup dengan cover glass kemudian ditekan secara perlahan.
4. Preparat ditetesi dengan alkohol 96, lalu ditetesi dengan methylene blue sebanyak 1 tetes. Morfologi kapang yang diamati meliputi; bentuk hifa, konidia,
dan spora yang terbentuk Ariyono, 2014.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
5. Isolat kapang diamati dengan menggunakan mikroskop cahaya dengan perbesaran 100x, 200x, dan 400x Hafsari Asterina, 2012. Skema cara kerja
identifikasi isolat kapang endofit secara mikroskopik dapat dilihat pada lampiran 5.
3.3.6 Peremajaan Bakteri Uji