Metode Adisi Proses Preparasi Sampel : Ektraksi dengan Metode QuEChERS, Clean-up Fraksinasi Elusi SPE C

H. Rancangan Penelitian

1. Metode Adisi

Pada metode adisi dilakukan adisi jalur A, B, dan C untuk membuktikan hipotesis 1. Sampel blanko Adisi A: Sampel + standard Ekstraksi Adisi B : Sampel +standard Cleanup Adisi C: Sampel + standard Sampel sesungguhnya Kesalahan ekstraksi + cleanup + determinasi Kesalahan cleanup + determinasi Kesalahan determinasi

2. Proses Preparasi Sampel : Ektraksi dengan Metode QuEChERS, Clean-up

SPE C 18 dan Determinasi GC-ECD sampling melon dilakukan secara acak dari beberapa pasar di Yogyakarta Preparasi sampel secara kuartering, kemudian blender dan ditimbang sebanyak 5 gram sampel dalam seuah tabung sentrifugasi tambahkan 5 mL pelarut asetonitril dan campuran garam QuEChERS kemudian gojog kuat selama 1 menit, vortex selama 2 menit dan lakukan sentrifugasi selama 5 menit dalam 5000 rpm. supernatan pada lapisan yang paling atas yang atas diambil. lakukan reekstraksi dengan menambahkan 5 ml asetonitril ke dalam tabung sentrifugasi, gojog, vortex dan sentrifugasi. supernatan yang terbentuk dimasukan dalam 1 flakon supernatan awal. keringkan supernatan di atas hotplate dengan bantuan gas nitrogen. tambahkan 500 µL akuabides ke dalam flakon yang beerisi ekstrak kemudian lakukan degassing selama 5 menit. aplikasikan hasil degassing ke dalam kolom SPE yang telah di conditioning dengan 5 mL metanol dan 5 mL akuabides. washing SPE dengan 5 mL akuabides dan elusi sampel dalam kolom SPE dengan 3 mL metanol. tampung eluat yang keluar dalam sebuah flakon kemudian keringkan di atas hotplate dengan bantuan gas nitrogen . larutkan ekstrak dalam 100 µL heksan ambil 2 µL untuk diinjeksikan ke dalam GC- ECD. analisis kromatogram yang dihasilkan. untuk membuktikan Hipotesis 3. Tahap 1 : Proses Sampling dan ekstraksi Tahap 2 : Proses Cleanup Tahap 3: Proses Determinasi

3. Fraksinasi Elusi SPE C

18 Metanol melon melon melon Potong melon secara kuartering dan blender Timbang 5 gram melon yang telah diblender Tambahkan campuran garam QuEChERS : 2 gram MgSO 4 0,5 gram NaCl 0,5 gram Na3Sitrat 0,25 gram Na2HCitR 55 Tambahkan 5 ml asetonitril Gojog 1 menit dan vortex 2 Sentrifugasi selama 5 menit dalam 5000rpm Ambil semua supernatan. lakukan reekstraksi dan gabung supernatan yang terbentuk dan Tambahkan 50 µL standar A Uapkan di atas hotplate dengan bantuan gas nitrogen Tambahkan 1mL akuabides Degassing selama 5 menit Loading pada SPE yang telah di conditioning Fraksinasi masing-masing 1 mL Washing dengan 5 mL akuabides Keringkan 1 5 2 3 4 Larutkan dengan 200 µL heksan Dan tambah 2 µL DCB. Ambil 2 µL kemudian injeksikan ke dalam GC-ECD Analisis hasil untuk membuktikan HIPOTESIS 2

4. Optimasi Washing SPE