Uji kualitatif aktivitas penangkap radikal bebas isolat

1. Uji kualitatif aktivitas penangkap radikal bebas isolat

Gambar 11. Uji Kualitatif Aktivitas Antioksidan Isolat 1 A dan Isolat 2 B dari kiri-kanan : ekstrak mass loading 10 μg, isolat 1 mass loading 10, 20, dan 30 μg Isolat yang sudah didapatkan diuji aktivitas penangkap radikal bebas menggunakan metode DPPH, di mana volume penotolan pada pelat KLT diukur dan dapat diketahui mass loading isolat yang ditotolkan yaitu 10 μg, 20 μg, 30 μg sehingga dapat menggambarkan konsentrasi minimum yang dapat memberikan aktivitas penangkapan radikal bebas DPPH. Pada isolat 1 mass loading 10 μg spot pemisahan Rf 0,36 warna violet memudar setelah 18jam dan spot pemisahan Rf 0,80 warna violet memudar setelah 5 jam. Pada mass loading 20 dan 30 μg, spot pemisahan dengan Rf 0,36 dapat memudarkan warna violet setelah 12jam dan spot pemisahan dengan Rf 0,80 dapat memudarkan warna violet setelah 5jam. Pada isolat 2 mass loading 10 μg spot pemisahan dengan Rf 0,34 muncul pemudaran warna violet setelah 20 jam, sedangkan pada Rf 0,80 pemudaran warna violet terjadi setelah 5 jam pengamatan. Mass loading 20 μg dan 30 μg pada isolat 2 dengan spot pemisahan Rf 0,34 dan 0,38 dapat memudarkan warna 1 1 A B Rf 1 Rf 1 Rf 0 Rf 0 violet setelah 18 jam pengamatan sedangkan, pada Rf 0,80 dan 0,81 terjadi pemudaran warna setelah 5 jam pengamatan. Tabel 6. Uji Kualitatif Aktivitas Penangkap Radikal Bebas Isolat 1 Mass Loading μg Rf Waktu 10 0,36 tipis 18 jam 0,80 + 5 jam 20 0,40 + 12jam 0,80 ++ 5 jam 30 0,40 ++ 12jam 0,80 +++ 5 jam Ekstrak etanolik 10 μg 0,13 + 20 menit 0,21 + 20 menit 0,31 + 20 menit 0,48 +++ 2 menit 0,77 ++ 10 menit 0,81 ++ 10 menit Hasil pengujian aktivitas penangkap radikal bebas isolat ini dapat memberikan informasi bahwa pada mass loading terendah, yaitu 10 μg saja sudah mampu memberikan aktivitas penangkap radikal bebas walaupun kerjanya lemah namun seiring dengan kenaikan jumlah mass loading maka kerja aktivitas antioksidan semakin kuat. Berbeda dengan ekstrak dengan mass loading 10 μg pemudaran pada tiap spot dapat terlihat dengan jelas mulai dari 2 menit saja. Perbandingan aktivitas dilakukan menggunakan ekstrak etanolik dapat menunjukkan bahwa masih terdapat senyawa aktif penangkap radikal bebas lainnya yang tidak terisolasi. Isolat yang didapatkan terbukti dapat berperan terhadap adanya aktivitas antioksidan pada ekstrak etanolik daun pegagan. Tabel 7. Uji Kualitatif Aktivitas Penangkap Radikal Bebas Isolat 2 Mass Loading μg Rf Waktu 10 0,34 tipis 20 jam 0,80 + 5 jam 20 0,34 + 18 jam 0,80 ++ 5 jam 30 0,38 ++ 18 jam 0,81 +++ 5 jam Ekstrak etanolik 10 μg 0,13 + 20 menit 0,21 + 20 menit 0,31 + 20 menit 0,48 +++ 2 menit 0,77 ++ 10 menit 0,81 ++ 10 menit

2. Uji kualitatif aktivitas UV protection isolat