Isolasi Kapang Endofit Prosedur Penelitian

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta Kemudian 0,1 mL suspensi bakteri tersebut dimasukkan kedalam 10 mL media NB dan diinkubasi dengan shaker incubator 120 rpm, suhu 37 o C sesuai dengan fase log masing-masing bakteri. Selanjutnya, masing-masing suspensi bakteri uji pada fase log diambil 0,1 mL lalu diratakan diatas medium NA yang telah memadat Xu, 2010. Media NA ini selanjutnya digunakan untuk seleksi dan pengujian antimikroba. Suspensi Candida albicans dibuat dengan cara, sebanyak satu ose biakan Candida albicans yang berumur 3 hari dimasukkan kedalam 2 mL larutan NaCl fisiologis 0,9 steril, kemudian dihomogenkan dengan vortex. Kekeruhannya diseragamkan dengan menggunakan standar Mc Farland III yang setara dengan 9x10 8 CFUmL. Selanjutnya, suspensi Candida albicans 10 9 diencerkan hingga pengenceran 10000 kali sehingga diperoleh suspensi 10 5 . Pengenceran dilakukan dengan cara suspensi 10 9 dipipet 1 mL ke dalam tabung reaksi berisi 9 mL NaCl 0,9 sehingga diperoleh suspensi mikroba 10 8 . Suspensi mikroba 10 8 dipipet 1 mL ke dalam tabung reaksi berisi 9 mL NaCl 0,9 sehingga diperoleh suspensi mikroba 10 7 . Demikian seterusnya hingga diperoleh suspensi Candida albicans 10 5 Rachmayani, 2008. Suspensi Candida albicans 10 5 diambil 0,1 mL lalu diratakan diatas medium PDA yang telah memadat Xu, 2010. Media PDA ini selanjutnya digunakan untuk seleksi dan pengujian antimikroba. Untuk kapang Aspergillus niger suspensi dibuat dengan cara biakan kapang pada medium PDA miring yang telah diinkubasi selama 7 hari pada suhu 29 o C dimasukkan 1 mL akuadest steril, spora dikerik dengan ose dan dimasukkan secara aseptis kedalam tabung reaksi yang berisi 9 mL akuadest streril, lalu dihomogenkan dengan menggunakan vortex sehingga diperoleh suspensi spora pengenceran 10 -1 . Kemudian dlakukan pengenceran secara bertingkat sehingga diperoleh pengenceran sampai 10 -6 . Pengenceran dilakukan dengan cara suspensi 10 -1 dipipet 1 mL ke dalam tabung reaksi berisi 9 mL akuadest streril sehingga diperoleh suspensi mikroba 10 -2 . Suspensi mikroba 10 -2 dipipet 1 mL ke dalam tabung reaksi berisi 9 mL akuadest streril sehingga diperoleh suspensi mikroba 10 -3 . Demikian seterusnya hingga diperoleh suspensi mikroba 10 -6 Atika, 2007; Handayani, 2007. Media PDA ini selanjutnya digunakan untuk seleksi dan pengujian antimikroba.