III. METODOLOGI PENELITIAN
A. BAHAN DAN ALAT
1. Bahan
Bahan-bahan yang digunakan pada penelitian terdiri dari umbi garut varietas Ciamis dan ganyong varietas ganyong putih yang didapatkan dari
Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Genetika Cimanggu - Bogor, media pertumbuhan dan fermentasi, larutan standar
dan larutan ekstraksi. Media pertumbuhan dan fermentasi yang digunakan meliputi MRS deMan, Rogosa and Sharpe broth, MRS Agar, NA
Nutrient Agar, NB Nutrient Broth, EMBA Eosin Metil Bile Agar, bacto agar, Gas generating kit, proteose peptone, yeast extract, Tween 80,
gliserol, dipotassium hidrogen fosfat, sodium asetat, MgSO
4
.7H
2
O, dan MnSO
4
.4H
2
O. Sebagai sumber gula pembanding digunakan larutan sukrosa, glukosa,
maltosa, fruktosa, rafinosa, inulin, oligofruktosa. Larutan ekstraksi yang digunakan meliputi etanol 70 dan 95 vv, akuades, alkohol, 1-
butanol, etil asetat, asam asetat, α-naphtol dan asam ortofosfat.
Bakteri Asam Laktat yang digunakan pada penelitian ini adalah Lactobacillus casei strain rhamnosus, L. casei strain shirota,
Lactobacillus F1, Lactobacillus G1, Lactobacillus G3, Bifidobacterium bifidum, B. longum
. Bakteri patogen yang digunakan adalah Salmonella sp., Escherichia coli, Bacillus cereus.
Kultur murni kedua BAL diperoleh dari Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan, Institut Pertanian Bogor.
Gambar 1. Umbi garut varietas Ciamis
14
Gambar 2. Umbi ganyong varietas ganyong putih
2. Alat
Alat-alat yang digunakan pada penelitian terdiri dari peralatan pembuatan tepung, peralatan ekstraksi dan analisis oligosakarida dan
peralatan analisis pertumbuhan dan fermentasi. Alat-alat pembuatan tepung yang digunakan meliputi oven, slicer, dry mill, neraca dan pisau.
Alat-alat ekstraksi dan analisis oligosakarida yang digunakan meliputi mikropipet 10-100 µl, tips, sentrifus, evaporator vakum, kertas Whatman
No. 1, tabung reaksi, botol penyemprot, chamber kromatografi. Alat-alat untuk analisis pertumbuhan dan fermentasi yang digunakan meliputi
mikropipet 100-1000 µl, tabung reaksi, cawan petri, anaerobic jar, ANOXOMAT
tm
, bunsen, spektrofometer, membran filter steril 0.2 µl, membran filter 0.45 µl, aluminium foil, kapas, kertas label, tissue, dan
manik-manik.
B. METODE PENELITIAN
Kategori