BAB III METODOLOGI PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian “Sitotoksisitas Fraksi Protein Umbi Rumput Teki Cyperus rotundus L. FP
20
, FP
40
, FP
60
, dan FP
80
Terhadap Sel HeLa” ini termasuk penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola satu arah.
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional
1. Variabel
a. Variabel bebas dalam penelitian ini adalah konsentrasi fraksi protein
umbi rumput teki FP
20
, FP
40
, FP
60
dan FP
80
dengan seri kadar 125µgml ; 250µgml ; 500 µgml ; 1000 µgml ; 2000 µgml dan 4000 µgml.
b. Variabel tergantung dalam penelitian ini adalah prosentase kematian sel
HeLa dan sel Vero. c.
Variabel pengacau terkendali dalam penelitian ini yaitu : 1
Medium tumbuh sel dikendalikan dengan menggunakan medium RPMI 1640 yang mengandung FBS Fetal Bovine Serum 10 untuk sel HeLa dan medium
M199 untuk sel Vero. 2
Tempat tumbuh dan waktu pemanenan umbi rumput teki dikendalikan dengan mengambil umbi pada tempat dan waktu yang sama.
3 pH serta suhu pembuatan dan penyimpanan fraksi protein, dikendalikan pada pH
7,2 dan suhu ± 4
o
C.
18 PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
d. Variabel pengacau tak terkendali dalam penelitian ini yaitu kematian sel
HeLa - sel Vero secara alami dan umur tumbuhan rumput teki.
2. Definisi operasional
a. Uji sitotoksisitas adalah uji toksisitas secara in vitro menggunakan kultur
sel HeLa dan sel Vero. b.
Fraksi protein FP protein fraction PF adalah bagian dari tumbuhan yang berisi protein yang didapat dengan cara menambahkan amonium
sulfat pada derajat kejenuhan tertentu. c.
LC
50
adalah konsentrasi fraksi protein yang dibutuhkan untuk membunuh sebanyak 50 populasi sel uji.
C. Alat dan Bahan
1. Alat
Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain: alat-alat gelas, stamper, mortir, timbangan analitik AND ER-400 H, alumunium foil, magnetic
stirrer , tabung conical, autoklaf, tissue culture flask, swing rotor sentrifuge PLC,
inkubator Nuaire, mikropipet, membran dialisis Sigma, lemari pendingin, cell counter
Nunc, 96-well plate Nunc, spektrofotometer UV Cecil CE-292, ELISA reader
SLT 340 ATC, laminar air flow Nuaire, mikroskop Olympus IMT-2, haemocytometer
Nebauer, kain monel, gloves, masker, autoklaf, dan freezer.
2. Bahan
a. Sampel umbi rumput teki yang diambil di daerah Sumberarum, Moyudan, Sleman tepi Sungai Progo pada bulan Juli 2006.
Kategori