e. tiga puluh lima ekor untuk perlakuan kontrol negatif karagenin 1, kontrol
negatif CMC Na 1, kontrol positif natrium diklofenak dan kelompok perlakuan ektrak etanol senggani dalam empat peringkat dosis, yaitu 850
mgkgBB, 1000 mgkgBB, 1330 mgkgBB, dan 1670 mgkgBB, masing- masing lima ekor.
4. Pembuatan suspensi karagenin 1
Timbang 100 mg karagenin, kemudian larutkan dalam 10 ml larutan NaCl fisiologis dan diaduk sehingga diperoleh konsentrasi suspensi karagenin 1. Agar
bisa digunakan kembali, suspensi karagenin disimpan dalam freezer.
5. Pembuatan CMC Na 1
Timbang 1 gram CMC-Na, disuspensikan sampai 100 ml dengan aquadest hangat, kemudian aduk sampai homogen.
6. Pembuatan larutan natrium diklofenak
Ditimbang seksama sejumlah natrium diklofenak dan dilarutkan dalam CMC-Na 1 sampai diperoleh konsentrasi tertentu berdasar uji pendahuluan dosis.
CMC-Na 1 dalam kondisi masih hangat sangat membantu kelarutan natrium diklofenak.
7. Pembuatan suspensi ekstrak etanol daun senggani
Ditimbang seksama ekstrak etanol daun senggani dan disuspensikan ke dalam larutan CMC-Na 1 sampai diperoleh konsentrasi tertentu berdasarkan orientasi.
8. Penetapan dosis
a. Karagenin 1
Menurut Williamson 1996, konsentrasi karagenin yang digunakan pada mencit adalah 1 dengan volume 0,05 ml. 0,05 ml karagenin 1 adalah volume
pemberian untuk mencit dengan berat 20 gram sehingga dosis bisa dicari dengan rumus:
V ml =
ml mg
C kg
BB X
kgBB mg
D
0,05 ml =
ml mg
kg X
kgBB mg
D 10
02 ,
D = 25 mgkg BB dan V = {2,5 x BB kg} ml b.
Natrium Diklofenak Dosis yang digunakan berdasarkan dosis natrium diklofenak yang pernah
digunakan pada penelitian anti inflamasi yang sudah pernah dilakukan yaitu 9,75 mgkg BB; 10,795 mgkg BB, dan 11,95 mgkg BB Novita, 2003. Dosis ini
berdasarkan dosis pemakaian natrium diklofenak pada manusia sebesar 75-150 mg70kgBB. Dosis pada manusia tersebut dikonversikan ke mencit 20g dengan
faktor konversi sebesar 0,0026. Contoh perhitungannya : Dosis I
: untuk manusia 70 kgBB = 75 mg
konversi ke mencit 20 gBB = 75 mg70kgBB x 0,0026 = 0,195 mg20 gBB
= 9,75 mgkgBB Dosis II : untuk manusia 70 kgBB
= 83,0385 mg konversi ke mencit 20 gBB = 83,0385 mg70kgBB x 0,0026
= 0,2195 mg20 gBB PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
= 10,79 mgkgBB Dosis III : untuk manusia 70 kgBB
= 91,923 mg konversi ke mencit 20 gBB = 91,923 mg70kgBB x 0,0026
= 0,239 mg20 gBB = 11,95 mgkgBB
c. CMC 1
Sebagai kontrol negatif CMC 1 diberikan secara per oral, dan volume pemberian maksimal pada mencit adalah 1ml, diketahui berat mencit maksimal
dalam penelitian ini adalah 30 g sehingga bisa dihitung dengan rumus: V ml =
ml mg
C kg
BB X
kgBB mg
D
1 ml =
ml mg
kg X
kgBB mg
D 10
03 ,
D = 333,3 mgkg BB dan V = {33,3 x BB kg} ml d.
Ekstrak etanol daun senggani Dosis maksimum dan peringkat dosis ekstrak etanol daun senggani yang
digunakan berdasarkan orientasi dan penelitian Tusthi 2006. Adapun peringkat dosis yang digunakan adalah 850 mgkg BB, 1000 mgkg BB, 1330 mgkg BB,
dan 1670 mgkg BB.
9. Uji pendahuluan rentang waktu pemotongan kaki setelah injeksi karagenin