19
BAB III METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian yang berjudul “Efek Antikanker Ekstrak Etanolik Daun Lavender Lavandula Officinalis Chaix terhadap Sel Kanker Payudara T47D
melalui Penekanan Ekspresi Reseptor Estrogen-α” termasuk penelitian eksperimental murni dengan menggunakan rancangan penelitian acak lengkap
pola searah. Penelitian ini termasuk jenis ekperimental karena terdapat perlakuan terhadap subyek uji. Rancangan penelitian acak lengkap pola searah karena
penelitian ini memiliki satu faktor dengan banyak level.
B. Variabel dan Definisi Operasional
1. Variabel Penelitian
a. Variabel utama 1 Variabel bebas
: tujuh peringkat konsentrasi ekstrak etanol daun lavender yaitu 1585, 1150, 1000, 300, 178, 100, 10 µgmL.
2 Variabel tergantung : viabilitas sel, persentase sel apoptosis, level
ekspresi protein ERα. b. Variabel Pengacau
1 Variabel pengacau terkendali
Variabel pengacau terkendali dalam penelitian ini adalah kondisi sel uji, yaitu sel kanker payudara T47D. Bahan uji yang digunakan berupa daun Lavandula officinalis
Chaix yang didistribusikan oleh Dipokusumo Farm Rasamala A4, Semarang Kota 50189, Jawa Tengah, Indonesia berasal dari kebun di Malang, Jawa Timur dipanen
pada bulan Juni 2014, serta lama pengeringan daun L. Officinalis Chaix.
2 Variabel pengacau tak terkendali Usia tanaman, cuaca, kontaminasi lingkungan, kondisi lingkungan, dan waktu
inkubasi.
2. Definisi Operasional
a. Ekstrak etanol daun Lavandula officinalis Chaix adalah larutan kental hasil ekstraksi total daun lavender yang diperoleh dengan cara mengekstraksi.
b. Uji MTT adalah metode yang digunakan untuk mengetahui jumlah sel yang masih hidup setelah pemberian ekstrak etanol daun Lavandula officinalis
Chaix. c. Konsentrasi IC
50
adalah konsentrasi sampel yang mampu mematikan sel sebanyak 50 dari total sel.
d. Apoptosis sel yang teramati adalah sel hidup berfluoresensi hijau terang, sel yang mengalami nekrosis berwarna oranye merata seperti sel normal, sel yang
mengandung ERα berwarna coklat dan sel yang tidak mengandung ERα berwarna biru.
e. Imunositokimia adalah metode yang digunakan untuk mengetahui adanya ekspresi suatu protein spesifik di dalam sel.
f. Level ekspresi ERα populasi atau persentase sel yang berwarna coklat baik pada sitoplasma dan atau nukleus dalam tiga lapang pandang.