Uji Ekspresi ERα menggunakan Metode Imunositokimia

Pengujian ekstrak etanol daun L. Officinalis Chaix pada sel kanker payudara T47D memberikan hasil bahwa ekstrak tersebut telah mampu menekan ekspresi ERα dengan mekanisme kematian sel apoptosis. Senyawa yang berperan langsung dalam mekanisme tersebut dapat diketahui dengan melakukan sebuah pengujian lebih lanjut untuk mengkonfirmasi kandungan-kandungan yang terdapat dalam ekstrak etanol daun L.Officinalis Chaix. Salah satu penelitian yang pernah dilakukan oleh Nevein dkk. 2014 menunjukkan bahwa kandungan tertinggi dalam L. Officinalis Chaix adalah monoterpen dan penelitian lain yang serupa pernah dilakukan oleh Saadatian dkk. 2013 yang menganalisis kandungan senyawa dalam ekstrak etanol 70 L. Officinalis Chaix menggunakan Gas Chromatography Mass Spectrometry GC-MS, namun senyawa yang teridentifikasi senyawa volatil, sehingga perlu adanya metode analisis lain seperti menggunakan High Performance Liquid Chromatography HPLC dan kromatografi lapis tipis KLT. Menurut penelitian yang dilakukan oleh Crowell 1997, monoterpen memiliki aktivitas kemopreventif pada kanker payudara dengan menghambat proses karsinogenesis pada fase inisiasi maupun promosi atau progesi. Fase inisiasi merupakan tahapan awal dalam proses karsinogenesis, senyawa inisiator tidak reaktif terhadap DNA, namun diubah melalui enzim pemetabolime obat didalam tubuh yang dapat menyebabkan mutasi DNA Devi, 1989. Apabila proses karsinogenesis pada proses inisiasi dapat dihambat, maka perubahan genetik DNA yang permanen akibat ikatan irreversible senyawa inisiator dapat dicegah dan DNA dapat menghasilkan kode genetik yang sesuai. Selain itu, monoterpen juga memiliki aktivitas molekuler yang berpotensi untuk mendasari index terapetik yang positif, pada penelitian Gould 1997 dikatakan bahwa monoterpen mampu menghambat isoprenilasi small G protein, isoprenilasi protein memegang peranan penting dalam fungsionalisasi protein yang mampu memacu terjadinya kanker McTaggart, 2006. Penghambatan ini dapat mengubah sinyal transduksi dan mengakibatkan ekspresi gen yang berubah, hasil dari ekspresi gen yang baru telah diidentifikasi mampu menurunkan regresi dari karsinoma kelenjar payudara.