26
BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN
3.1 Desain Penelitian
Penelitian ini menggunakan jenis penelitian uji eksperimental secara in vitro dengan post test control only design menggunakan teknik disk diffusion
untuk melihat peranan ekstrak madu karet dalam menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli.
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian
Lokasi pembelian dan determinasi dilakukan di Taman Wisata Lebah Madu Cibubur daerah Bumi Perkemahan Pramuka Cibubur. Sedangkan
pengekstrakan dan uji sensitivitas madu karet dilakukan di Balai Besar Teknik Kesehatan Lingkungan dan Pengendalian Penyakit Jakarta. Penelitian
ini dilakukan mulai pada bulan Februari sampai Agustus 2014.
3.3 Sampel Penelitian
Penelitian ini menggunakan bakteri Escherichia coli yang ditanamkan dalam media nutrien agar. Pada penelitian ini menggunakan uji in vitro.
Pada penelitian ini, peneliti menggunakan jumlah kelompok sebanyak 7 kelompok yaitu madu karet tanpa ekstraksi, ekstrak madu dengan variasi
konsentrasi 20, 25 , 50 , 100, serta kontrol positif menggunakan antibiotik amoksisilin 25 ug maupun kontrol negatif menggunakan pelarut
aseton dan n-heksan.
Penentuan jumlah sampel menggunakan rumus federer :
Keterangan : k = jumlah kelompok perlakuan
n = jumlah sampel dalam tiap kelompok
k-1.n- 1 ≥ 15
Sehingga hasil penghitungan sampel menurut rumus federer, sebagai berikut :
k-1.n-1 ≥ 15
7-1.n-1 ≥ 15
6.n-1 ≥ 15
6n - 6 ≥ 15
6n ≥ 21
n ≥ 216
n
≥ 4 hasil pembulatan
Maka jumlah pengulangan yang dipakai pada penelitian ini berjumlah 4 pengulangan.
3.4 Identifikasi Variabel 3.4.1
Variabel Bebas
Madu karet 100 dan hasil ekstraksi madu karet yang berasal dari lebah Apis mellifera berupa sedimen maupun residu dari pelarut aseton
dan n-heksan dengan berbagai variasi konsentrasi 20 , 25 , 50 , 100, kontrol positif menggunakan antibiotik amoksisilin 25 ug serta
kontrol negatif menggunakan pelarut aseton dan n-heksan.
3.4.2 Variabel Terikat
Zona hambat zona bening pada pertumbuhan bakteri Escherichia
coli di media nutrien agar yang diukur diameternya menggunakan jangka sorong dengan satuan milimeter mm