16 cuplikan adalah pelarut yang atsiri. Pengembangan plat KLT preparatif dilakukan
dalam bejana kaca yang dapat menampung beberapa plat. Bejana dijaga tetapjenuh dengan pelarut pengembang dengan bantuan kertas saring yang
diletakkan berdiri disekeliling permukaan bagian dalam bejana. Pita ditampakkan dengan cara yang tidak merusak maka senyawa yang tidak berwarna dengan
penjerap dikerok dari plat kaca. Cara ini berguna untuk memisahkan campuran beberapa senyawa sehingga diperoleh senyawa murni Gritter dkk., 1991.
2.4.3 Kromatografi lapis tipis dua arah
KLT dua arah atau KLT dua dimensi ini bertujuan untuk meningkatkan resolusi sampel ketika komponen-komponen solut mempunyai karakteristik kimia
yang hampir sama, karena nilai Rf juga hampir sama, selain itu dua sistem fase gerak yang sangat berbeda dapat digunakan secara berurutan pada suatu campuran
tertentu sehingga memungkinkan untuk melakukan pemisahan analit yang mempunyai tingkat polaritas yang hampir sama Rohman, 2009.
KLT dua arah dilakukan dengan melakukan penotolan sampel disalah satu sudut lapisan lempeng tipis dan mengembangkannya sebagaimana biasa dengan
eluen pertama.Lempeng kromatografi selanjutnya dipindahkan dari chamber yang menggunakan eluen kedua sehingga pengembangan dapat terjadi pada arah kedua
yang tegak lurus dengan arah pengembangan yang pertama.Suksesnya pemisahantergantung pada kemampuan untuk memodifikasi selektifitas eluen
kedua dibandingkan dengan selektifitas eluen pertama Rohman, 2009.
2.5 Spektrofotometri Ultra Violet
17 Spektrofototmetri Ultra Violet merupakan suatu analisis berdasarkan atas
pengukuran serapan radiasi monokromatis oleh molekul zat terlarut dalam suatu larutan.Penyerapan sinar ultra violet sering dikenal sebagai spektroskopi
elektronik Aksara dkk., 2013. Spektrofotometer UV pada umumnya digunakan untuk menentukan jenis
kromofor, ikatan rangkap yang terkonjugasi dan auksokrom dari suatu senyawa organik, menjelaskan informasi dari struktur berdasarkan panjang gelombang
maksimum suatu senyawa dan mampu menganalisis senyawa organik secara kuantitatif dengan menggunakan hukum Lambert-Beer Dachriyanus, 2004.
Elektron yang terlibat dalam beberapa molekul organik pada penyerapan sinar UV adalah electron sigma δ, elektro phi π dan non bonding electron
n .Elektron δ merupakan electron yang membentuk ikatan tunggal dan electron π
terdapat ikatan rangkap Gandjar dan Rohman, 2012.
2.6 Spektrofotometri Infra Merah
Spektra infra merah mengandung banyak serapan yang dihubungkan dengan sistem vibrasi yang berinteraksi dalam molekul, dan karena mempunyai
karakteristik yang unik untuk setiap molekul maka dalam spektrum memberikan pita-pita serapan yang karakteristik juga Sastrohamidjojo, 1985.
Spektrofotometer infra merah pada umumnya digunakan untuk menentukan gugus fungsi yang tedapat dalam suatu senyawa organik dan untuk
mengetahui informasi tentang struktur suatu senyawa organik dengan membandingkan daerah sidik jarinya.Daerah spektra infra merah dibagi dalam
tiga kisaran yaitu IR dekat 12500-4000 cm
-1
, IR tengah 4000-400 cm
-1
dan IR
