Desain Penelitian Lokasi dan Waktu Penelitian Alat dan Bahan Uji

30

BAB 3 METODE PENELITIAN

3.1. Desain Penelitian

Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah penelitian eksperimental. Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan alat Light Cycler 480 ® Roche 04 909 631 001 dengan menggunakan primer spesifik rs855791 CT untuk melakukan skrining Iron Refractory Deficiency Anemia dan pemeriksaan kadar hemoglobin dengan menggunakan Easy Touch ® GCHb meter.

3.2. Lokasi dan Waktu Penelitian

Penelitian dilakukan di Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta dengan mengambil data primer yakni genom mahasiswa Program Studi Pendidikan Dokter angkatan 2012 hingga 2014. Penelitian dilakukan dari bulan Mei hingga Oktober 2015.

3.3. Populasi dan Sampel

3.3.1 Populasi Terjangkau

Populasi terjangkau penelitian ini adalah mahasiswa Program Studi Pendidikan Dokter angkatan 2012 hingga 2014.

3.3.2 Kriteria Pemilihan

Kriteria pemilihan sampel dalam penelitian ini terdiri dari kriteria inklusi dan ekslusi. Kriteria inklusi mahasiswa Pendidikan Dokter angkatan 2012 hingga 2014 yang telah mengisi lembar informed consent lampiran 1. Pada penelitian ini kriteria eksklusi tidak ditentukan karena peneliti ingin melihat hasil skrining seluruh sampel dan melihat hubungan antara hasil skrining dan nilai kadar Hb.

3.3.3 Perkiraan Besar Sampel

Dalam penentuan jumlah sampel, peneliti menggunakan perhitungan Slovin dengan alasan total jumlah mahasiswa PSPD dari 2012-2014 kurang dari 500 orang. Rumus perhitungan adalah: n = N1+Ne 2 Keterangan: n = Besarnya sampel N = Jumlah sampel e = Batas toleransi kesalahan 10 0.1 Maka ditemukan: n = 3001+300x0.1 2 = 3004 = 75 orang Jadi besar sampel minimal yang dibutuhkan untuk penelitian ini adalah 75 orang sampel.

3.3.4 Teknik Pemilihan Sampel

Sampel yang dipilih berdasarkan Simple Random Sampling dimana sampel diambil secara acak berdasarkan tabel.

3.4 Alat dan Bahan Uji

Alat dan bahan yang digunakan dalam penelitian ini dijelaskan dalam tabel sebagai berikut. Tabel 3.1. Alat dan bahan penelitian Alat Bahan Keterangan Pengambilan sampel darah Spuit 3 cc Torniquet Tabung berisi EDTA Handscoon Alcohol swab - - Lanjutan Alat Bahan Keterangan Pengukuran kadar hemoglobin Easy Touch ® GCHb meter Alcohol swab Blood Hemoglobin Test Strips Nilairujukan : Normal Laki-laki 13,5-16,5 gdL Normal perempuan 12,1-15,1 gdL Isolasi Genom DNA dari darah Tabung mikrosentrifugasi 1,5 ml steril Water bath AS ONE TRW-42TP, 60 o C untuk rehidrasi DNA yang cepat GD column 2 mL collection tube Microcentrifuge Eppendorf 5417 R Vortex DAAD Pipetmikro Nichipet EX Nichiryo ukuran 2- 20 μL dan 20-200 μL Pipetmikro BIORAD ukuran 100- 1000 μL Tipmikro Biologix ukuran 10 μL, 200 μL, dan 1000 μL Biomedical Freezer SANYO Aluminium foil Whole Blood RBC Lysis Buffer GB Buffer Ethanol Absolut W1 Buffer Wash Buffer Elution Buffer 300 μL 900 μLdan 100 μL 200 μL 200 μL 400 μL 600 μL 50 μL Pengukuran kemurnian dan konsentrasi hasil isolasi DNA Maestro Nano Drops Aquadest Micropipet Tip Genom DNA 1 μL Elektroforesis genom DNA Elektroforesis ATTO My Power II 300 AE-8135 Microwave SHARP low wattage Timbangan analitik Adventure TM Gel doc system Printgraph ATTO AE-6905 CF CCD camera controller Penggaris sumur Gelas kimia Gelas ukur sibata Agarose Ethidium bromide Loading dye Plastic Wrap Buffer Tris Asetat EDTA TAE 1x Lanjutan Real Time PCR HRM Light Cycler 480 ® II Roche 04 909 631 001 Multiwall Plate Light Cycler ® Roche HRM Kit MgCl 2 Primer Forward dan Reverse dH 2 O sampel DNA 7,5 μL 1,2 μL 0,75 μL 1,8 μL 3,75 μL

3.5. Cara Kerja Penelitian