55 C setelah kegiatan tersebut selesai, semua parafin diganti dengan parafin murni
pada suhu 60 C. perendaman dengan perafin murni dilakukan minimal selama
satu hari.
3.4.3.4 Embedding
Embedding adalah penanaman sampel yang sudah diproses sebelumnya kedalam blok parafin untuk mempermudah penyayatan. Penanaman dilakukan
pada kotak dari cetakan kertas. Sampel yang sudah difiksasi dimasukkan kedalam cetakan yang telah berisi parafin cair dengan menggunakan pinset. Setelah parafin
mengeras sampel dikeluarkan dari cetakan.
3.4.3.5 Penyayatan
Penyayatan dilakukan dengan menggunakan mikrotom manual. Blok parafin yang sudah jadi dipasang pada pemegang yang terdapat pada mesin
mikrotom putar. Sisi horizontal dari permukaan parafin dibuat sejajar dengan pisau penyayat. Pemegang dapat diatur dengan skrup sedemikian rupa sehingga
ketebalan sayatan sesuai dengan yang dikehendaki. Sayatan yang baik apabila menghasilkan bentuk pita tipis yang lurus dan tidak terputus-putus.
3.4.3.6 Penempelan Sayatan Pada Objek Gelas
Sayatan yang baik ditempelkan pada objek gelas menggunakan zat perekat putih telur Meyer putih telur ditambah air dan gliserin dalam volume yang sama
dan Kristal thinol. Setelah penempelan dilakukan, objek gelas diletakkan pada hot plate dengan suhu 40
C agar sayatan melekat dengan baik, dan sebagian parafin yang mengisi jaringan akan mencair untuk mempercepat proses
penjernihan.
3.4.3.7 Penjernihan
Penjernihan bertujuan untuk menghilangkan parafin dari jaringan dengan cara memasukkan preparat kedalam xilol, xilol - alkohol, alkohol - air hidrasi,
dengan perbandingan 100 xilol, 1 : 1 xilol-alkohol, dan alkohol secara bertahap 100, 95, 70, 50, 30 dan aquades selama 3 menit.
3.4.3.8 Pewarnaan
Pewarnaan bertujuan agar bagian-bagian tertentu dari sel atau jaringan menjadi lebih jelas sehingga mudah untuk diamati. Tahapan pewarnaan meliputi
preparat yang sudah jernih dimasukkan ke dalam larutan pewarna Safranin 1 selama 12 jam. Selanjutnya preparat dicuci dengan aquadest sampai warna benar-
benar hilang. Dehidrasi pada 30, 50, 70, dan 95 ,etanol 2-5 menit langkah. Kemudian preparat dimasukkan kedalam larutan etanol 95 ditambah
larutan Fast Green 2 selama 30 detik, bilas dengan etanol 100 sebanyak dua kali masing-masing selama 2 menit. Selanjutnya preparat didalam larutan karbol
xilol atau campuran metal salisilat dan xilol 1:1 selama 5 detik untuk melepaskan sisa-sisa air yang menempel pada preparat. Kemudian bilas dengan
xilol 100 sebanyak dua kali. Selanjutnya preparat ditutup dengan entellan atau Canada balsm dan diamati dengan mikroskop.
3.5 Parameter yang diamati
