3.4.1 Pembuatan media
Media yang digunakan adalah media Eeuwens Y3, dimana masing- masing unsur hara makro, mikro, vitamin dan zat pengatur tumbuh komposisi
lengkap media Eeuwens Y3 dapat dilihat pada Lampiran 2. Semua larutan stok media yang akan dibuat dimasukkan kedalam labu takar, dilarutkan dengan
penambahan aquadest sebanyak 1 L, dan diberi penambahan zat pengatur tumbuh, selanjutnya penambahan 30 gL gula. Setelah semua unsur-unsur larut kemudian
dikalibrasi pada pH 6 dipanaskan sampai hampir mendidih selanjutnya diberi penambahan bacto agar sebanyak 7 gL aduk larutan selama 2-3 menit sampai
medium tampak bening, setelah itu diberi penambahan arang aktif sebanyak 2 gL aduk larutan hingga merata, tahap berikutnya larutan dimasukkan kedalam botol
kultur masing-masing sebanyak 10 ml, selanjutnya media disterilisasi menggunakan autoklaf 121
C selama 15 menit. Setelah suhu media sama dengan suhu kamar maka simpanlah media didalam ruangan stok. Pembuatan media
dilakukan satu minggu sebelum penanaman eksplan. Eewuen, 1976
3.4.2 Sterilisasi Eksplan
Sterilisasi eksplan menggunakan metode Zulkarnain 2009 yang dimodifikasi. Eksplan berupa apical bud kelapa sawit dibersihkan dengan air
mengalir dan direndam dalam detergen selama + 10 menit, kemudian dibilas dengan akuades steril hingga bersih. Eksplan dishaker dalam larutan fungisida
0,2 yang diberi 200 µL tween 80
®
selama 30 menit. Selanjutnya dibilas dengan akuades steril. Eksplan direndam dalam larutan antibiotik Betadine
®
selama 10 menit dan dibilas dengan akuades steril. Bahan tanaman dimasukkan ke dalam
larutan Na-hipoklorit 1,0 selama 5 menit dan dibilas dengan akuades steril. Tahap selanjutnya bahan tanaman direndam dalam larutan HgCl
2
0,1 selama 30 menit, dan dibilas tiga kali dengan akuades steril masing-masing 5 menit. Eksplan
steril dikeringkan di atas cawan petri steril yang berisi kertas saring. Eksplan siap ditanam.
3.4.3 Analisis Histologi
Kategori