UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
100 ppmμ Sebanyak 50 L dari larutan induk di tambahkan 4.950
L metanol.
10 ppmμ Sebanyak 5 L dari larutan induk di tambahkan 4.λλ5 L metanol.
d. Pembuatan Larutan BSA 0,2 mv
Sebanyak 0,5 g BSA dilarutkan dalam 250 mL Tris Buffer Saline
TBS pH 6,3 Williams et al, 2008.
3.4.5 Uji In vitro Antiinflamasi Williams et al, 2008
Tahapan pengujian aktivitas senyawa hasil modifikasi terhadap denaturasi Bovine Serum Albumin adalah sebagai berikut:
a. Pembuatan Larutan Uji
Sebanyak 5 mL larutan uji terdiri dari 4.950 L BSA dan 50 L
larutan sampel. Larutan uji dibuat berbagai macam konsentrasi, yaitu:
100 ppm: Sebanyak 50 L dari larutan sampel 10.000 ppm
ditambahkan dengan 4.
λ50 L larutan BSA.
10 ppm: Sebanyak 50 L dari larutan sampel 1.000 ppm
ditambahkan dengan 4.
λ50 L larutan BSA.
1 ppm: Sebanyak 50 L dari larutan sampel 100 ppm ditambahkan
dengan 4.
λ50 L larutan BSA.
0,1 ppm: Sebanyak 50 L dari larutan sampel 10 ppm ditambahkan
dengan 4.
λ50 L larutan BSA. b.
Pembuatan Larutan Kontrol Negatif
Sebanyak 5 mL larutan kontrol negatif terdiri dari 4.950 L BSA
dan 50
L metanol pro analisis. c.
Pembuatan Larutan Kontrol Positif
Sebanyak 5 mL larutan kontrol positif terdiri dari 4.950 L BSA
dan 50 L larutan Natrium diklofenak. Larutan kontrol positif dibuat
berbagai macam konsentrasi, yaitu:
100 ppmμ Sebanyak 50 L dari larutan kontrol positif 10.000 ppm
ditambahkan dengan 4.
λ50 L larutan BSA.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
10 ppmμ Sebanyak 50 L dari larutan kontrol positif 1.000 ppm
ditambahkan dengan 4.
λ50 L larutan BSA.
1 ppmμ Sebanyak 50 L dari larutan kontrol positif 100 ppm
ditambahkan dengan 4.
λ50 L larutan BSA.
0,1 ppmμ Sebanyak 50 L dari larutan kontrol positif 10 ppm
ditambahkan dengan 4.
λ50 L larutan BSA.
Masing-masing larutan diinkubasi selama 30 menit di suhu ruang 27
o
C. Sebelum diinkubasi di vortex terlebih dahulu agar larutan yang dibuat homogen.
Setelah itu dipanaskan selama 5 menit pada suhu 72
o
C. Kemudian dibiarkan di suhu ruang 27
o
C selama 25 menit. Lalu diukur kekeruhannya dengan
spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 660 nm. Presentase inhibisi dari denaturasi BSA diapat dihitung dengan rumus berikut:
x 100
