52 karotenoid metil ester tetap tinggi sehingga suhu maksimum reaksi
esterifikasi dalam penelitian ini adalah 60
o
C. Ambarita 2002 melaporkan bahwa perlakuan waktu reaksi
memberikan pengaruh yang nyata terhadap kandungan metil ester. Rendemen metil ester tertinggi dicapai pada 90 menit waktu reaksi dan
terendah dicapai pada 10 menit waktu reaksi. Lamanya waktu reaksi akan memberikan kesempatan molekul-molekul dalam substrat bereaksi
sehingga akan diperoleh hasil yang optimal. Waktu yang biasa digunakan untuk metanolisis dengan katalis basa 1 adalah 1 jam. Noureddini dan
Zhu 1997 mendapatkan rendemen metil ester sebesar 80 pada metanolisis selama 1 jam dan suhu 60
o
C. Karena suhu reaksi dibatasi hingga 60
o
C maka diduga waktu yang diperlukan dalam penelitian lebih lama, sehingga penambahan waktu reaksi diharapkan memberikan waktu
terbaik untuk reaksi metanolisis dalam penelitian. Kombinasi perlakuan konsentrasi NaOH, waktu reaksi dan suhu
reaksi yang menghasilkan metil ester kasar dengan tingkat ester dan konsentrasi karotenoid tinggi masing-masing diseleksi melalui penerapan
tiga tingkatan konsentrasi NaOH, waktu reaksi dan suhu reaksi. Konsentrasi NaOH yang diterapkan yaitu 1, 1.5, dan 2. Penggunaan
katalis hingga 2 dilakukan karena produk yang dihasilkan harus memiliki kandungan karotenoid yang tinggi sehingga suhu proses yang
diterapkan harus rendah. Dengan penerapan suhu yang rendah, diduga jumlah katalis yang digunakan harus lebih tinggi. Waktu reaksi yang
diterapkan yaitu 60, 90, dan 120 menit. Hal ini dengan asumsi bahwa dengan penerapan suhu yang rendah, waktu reaksi yang diperlukan akan
lebih lama. Suhu reaksi yang diterapkan yaitu 40, 50 dan 60
o
C.
a. Pengaruh konsentrasi NaOH, suhu dan waktu reaksi terhadap konsentrasi karotenoid CME
Konsentrasi karotenoid CME tertinggi dihasilkan pada perlakuan konsentrasi NaOH 2, suhu reaksi 50
o
C dan waktu reaksi 90 menit, sedangkan konsentrasi karotenoid CME terkecil dihasilkan pada
53
4060 4090 40120
5060 5090
50120 6060
6090 60120
1.0 1.5
2.0 500.0
520.0 540.0
560.0 580.0
600.0 620.0
640.0 660.0
680.0
Ko n
sen tr
as i Karot
e n
o id
µ g
g
Suhu
o
CWaktu me nit Konse ntrasi
NaOH
perlakuan konsentrasi NaOH 1, suhu reaksi 40
o
C dan waktu reaksi 90 menit. Konsentrasi karotenoid tertinggi adalah 663.74 µgg dan
konsentrasi terkecil adalah 538.65 µgg Tabel 9. Data pengukuran konsentrasi karotenoid CME selengkapnya dapat dilihat pada Lampiran
9. Secara umum dengan semakin meningkatnya konsentrasi NaOH semakin meningkat pula konsentrasi karotenoid CME Gambar 17.
Berdasarkan analisis sidik ragam konsentrasi NaOH berpengaruh nyata terhadap konsentrasi karotenoid CME p0.05 Lampiran 10. Hal ini
diduga berkaitan dengan jumlah metil ester yang terbentuk. Katalis NaOH pada dasarnya tidak secara langsung mempengaruhi konsentrasi
karotenoid CME, NaOH hanya mempengaruhi perolehan metil ester tanpa mempengaruhi karotenoid di dalamnya.
Gambar 17. Konsentrasi karotenoid metil ester pada kombinasi perlakuan konsentrasi NaOH, suhu dan waktu reaksi
Sama halnya dengan konsentrasi NaOH, suhu dan waktu reaksi juga memberikan pengaruh yang nyata terhadap konsentrasi karotenoid
CME p0.05. Semakin tinggi suhu yang diberikan semakin tinggi pula konsentrasi karotenoid, dan semakin lama waktu yang diberikan
54 semakin tinggi konsentrasi karotenoid. Interaksi antara konsentrasi
NaOH, suhu dan waktu reaksi tidak berpengaruh nyata terhadap konsentrasi karotenoid CME. Hal ini menggambarkan bahwa antara
konsentrasi NaOH, suhu dan waktu reaksi tidak berkaitan satu sama lain dalam menentukan konsentrasi karotenoid CME.
Tabel 9. Konsentrasi karotenoid dan perolehan karotenoid CME pada kombinasi perlakuan konsentrasi NaOH, suhu dan waktu reaksi
Suhu
o
C Waktu
menit Konsentrasi
NaOH bb
Konsentrasi Karotenoid
µgg Perolehan
Karotenoid
40 60
1 538.91
86.31 1.5
558.56 37.69
2 563.93
18.82 90
1 538.65
85.56 1.5
572.62 70.49
2 565.02
16.90 120
1 548.10
82.54 1.5
600.93 69.71
2 576.56
14.38
50 60
1 556.42
87.93 1.5
585.44 79.74
2 647.04
18.21 90
1 554.72
82.86 1.5
603.41 67.03
2 663.74
15.55 120
1 559.99
70.92 1.5
604.76 62.36
2 638.17
30.42
60 60
1 557.74
85.05 1.5
626.39 65.53
2 615.05
33.97 90
1 572.59
85.74 1.5
639.24 50.18
2 614.90
23.29 120
1 588.34
77.35 1.5
648.43 50.25
2 638.70
23.19
55
b. Pengaruh konsentrasi NaOH, suhu dan waktu reaksi terhadap perolehan karotenoid CME