Definisi operasional Pengaruh Variasi Fase Minyak Virgin Coconut Oil Dan Medium-Chain Triglycerides Oil Terhadap Stabilitas Fisik Nanoemulsi Minyak Biji Delima Dengan Kombinasi Surfaktan Tween 80 Dan Span 80.

dicelupkan ke dalam sediaan nanoemulsi kemudian nilai pH sediaan akan terbaca dan muncul di monitor. c. Uji tipe nanoemulsi. Pengujian ini dilakukan dengan metode dilusi. Sediaan nanoemulsi didispersikan dalam akuades 1:100 dan fase minyak 1:100. Jika nanoemulsi dapat terdispersi sempurna dalam akuades, maka tipe nanoemulsi adalah minyak dalam air. Jika nanoemulsi dapat terdispersi sempurna dalam fase minyak, maka tipe nanoemulsi adalah air dalam minyak. d. Uji persen transmitan. Sediaan nanoemulsi sebanyak 1 mL dilarutkan dalam 100 mL akuades kemudian diukur persen transmitannya pada panjang gelombang 650 nm menggunakan spektrofotometer uv-vis. Nilai persen transmitan akan terbaca pada monitor spektrofotometer uv-vis. Akuades digunakan sebagai blanko saat pengujian. e. Uji turbiditas. Pengukuran turbiditas dilakukan dengan mengukur absorbansi sediaan nanoemulsi pada panjang gelombang 502 nm dengan spektrofotometer uv-vis. Turbiditas dihitung dengan persamaan: turbiditas x lebar kuvat cm = 2,303 x absorbansi Fletcher and Suhlin, 1998. f. Uji viskositas. Pengukuran viskositas menggunakan alat viskometer Merlin VR. Sediaan nanoemulsi sebanyak 14 mL dimasukkan ke dalam cup, kemudian spindle viskometer dimasukkan dan diukur viskositasnya pada kecepatan 200 rpm. Nilai viskositas sediaan akan terbaca pada monitor komputer menggunakan software MICRA. g. Uji ukuran droplet. Ukuran droplet sediaan nanoemulsi diukur menggunakan particle size analyzer tipe dynamic light scattering. Pada masing-masing formula hanya satu sampel replikasi yang diuji. Sampel dimasukkan ke dalam kuvet kaca, kemudian dimasukkan ke dalam particle size analyzer dan ditembakkan cahaya pada sudut 90º. Jumlah partikel pada ukuran tertentu akan terbaca pada monitor komputer yang dihubungkan dengan alat menggunakan software Horiba SZ-100. Prinsip pengukuran dengan DLS yaitu cahaya yang ditembakkan pada sampel akan dihamburkan karena adanya partikel, cahaya yang terhambur akan diterima oleh detektor dan terbaca sebagai ukuran partikel Kalantar-zadeh and Fry, 2008.

3. Evaluasi stabilitas fisik nanoemulsi minyak biji delima

a. Uji sentrifugasi. Sediaan nanoemulsi sebanyak 10 mL disentrifugasi dengan kecepatan 3750 rpm selama 5 jam dalam sentrifugator. Pengujian ini setara dengan efek gravitasi yang ditimbulkan selama 1 tahun Lachman, Lieberman, and Kanig, 1994. Sediaan nanoemulsi kemudian diamati adanya pemisahan fase atau tidak. b. Freeze-thaw cycle. Sediaan nanoemulsi disimpan pada suhu -10 ºC dan 30 ºC RH 75 selama 24 jam sebanyak 3 siklus. Pada akhir siklus ketiga dilakukan uji organoleptis, pH, persen transmitan, viskositas, turbiditas, serta ukuran droplet sediaan Huynh-Ba, 2009.

F. Analisis Data

Pengolahan data secara statistik dilakukan dengan software R 3.2.2 dengan taraf kepercayaan 95. Data yang didapat diuji normalitasnya dengan uji Shapiro-Wilk, data yang tidak normal memiliki p-value kurang dari sama dengan 0,05. Parameter uji antara formula A dan B seperti pH, persen transmitan, turbiditas, dan viskositas dibandingkan dengan uji T tidak berpasangan untuk data yang terdistribusi normal, untuk data yang tidak normal digunakan uji Wilcoxon tidak berpasangan. Sedangkan untuk parameter uji sebelum dan sesudah freeze- thaw untuk tiap-tiap formula dibandingkan dengan uji T berpasangan untuk data yang terdistribusi normal, bila tidak normal maka digunakan uji Wilcoxon berpasangan. Hasil p-value yang kurang dari sama dengan 0,05 menunjukkan adanya perbedaan signifikan.