dibius dengan kombinasi ketamine 2 dan xylazin 2 dengan dosis masing masing 30 mgkg berat badan dan 5 mgkg berat badan secara intraperitoneal.
Darah diambil melalui vena pada sinus retro orbitalis dengan menggunakan mikrokapiler hematokrit Hrapkiewicz dan Medina 2007. Darah ditampung
dengan tabung Eppendorf yang telah ditetesi dengan EDTA sebanyak 0.05 ml seperti Gambar 8. Volume darah yang diambil adalah 0.5 ml. Darah tersebut
disimpan tidak lebih dari 24 jam Thrall 2004.
Gambar 8 Pengambilan darah mencit melalui vena sinus retro orbitalis mata.
3.3.6 Penghitungan Jumlah Eritrosit
Penghitungan total eritrosit dilakukan dengan menggunakan hemositometer. Darah dihisap dengan pipet eritrosit sampai batas 0.5 atau lebih. Kelebihannya
dihisap dengan kertas tisu. Bekas darah pada bagian luar pipet di hapus dengan kertas tisu. larutan Hayem dihisap sampai batas angka 101. Pipet dikocok
membentuk angka delapan selama 5-10 menit sampai larutan homogen. Sebanyak 2-3 tetes isi pipet eritrosit dibuang, kemudian ujung pipet ditempelkan pada cover
glass pada kamar hitung Neubauer Gambar 9 sampai semua bagian terisi oleh
larutan darah Thrall 2004. Sel darah merah dilihat dibawah mikroskop kemudian dihitung dengan menggunakan rumus:
n x 10 x 5 x 200 n
= jumlah sel yang terhitung pada ke-5 kotak 10
= tinggi kamar hitung 110 mm 5
= luas kamar hitung 15 mm
2
200 = faktor pengencer
Gambar 9 Kamar hitung neubauer. R adalah daerah untuk menghitung sel darah merah Wahyura 2010.
3.3.7 Penghitungan Hemoglobin
Tabung hemometer diisi dengan larutan HCl 0.1 N sampai tanda 2. Darah dihisap dengan pipet Sahli sampai tepat pada tanda 20 µl. Kelebihan darah yang
melekat pada ujung luar pipet dihapus dengan kertas tisu secara hati-hati jangan sampai darah dari dalam pipet berkurang. Darah tersebut dimasukkan ke dalam
tabung yang berisi larutan HCl tanpa menimbulkan gelembung udara kemudian ditunggu sampai pembentukan asam hematin terjadi. Asam hematin yang
terbentuk diencerkan dengan aquadest setetes demi setetes sambil diaduk dengan pengaduk dari gelas sampai didapat warna yang sama dengan warna standar.
Miniskus dari larutan dibaca dan nilainya dinyatakan dalam gdl Thrall 2004.
3.3.8 Penghitungan Jumlah Hematokrit PCV
Darah diambil langsung dari vena sinus retro orbitalis mata dengan menggunakan mikrohematokrit sampai terisi sekitar 23 bagian. Salah satu ujung
tabung ditutup dengan dempul clay. Setelah itu mikrohematokrit disentrifus dengan kecepatan 15.000 rpm selama 5 menit. Tinggi kolom eritrosit pada
mikrohematokrit diukur dengan refractometry dan nilainya dinyatakan dalam persen Thrall 2004.
3.3.9 Penghitungan Howell Jolly bodies
Howell Jolly bodies dihitung dengan menggunakan sediaan ulas darah yang
diwarnai dengan Giemsa. Darah yang keluar dari mikrohematokrit diteteskan pada object glass
. Darah diulas dengan object glass lain dengan cara ditarik pelan pelan
