28
sampel yang diperlukan adalah 150 ekor larva Artemia salina Leach tiap kali perlakuan.
3.3.4. Cara Pengambilan Sampel
Cara pengambilan sampel pada penelitian ini adalah dengan purposive random sampling terhadap larva Artemia salina Leach. Larva
Artemia salina Leach mempunyai kesempatan yang sama untuk diseleksi sebagai sampel karena populasinya telah homogen, cara dan jenis
penyediaannya sama.
3.4. Determinasi Tanaman
Identifikasi terhadap daun sirsak Annona muricata L untuk mengetahui identitas taksonominya di Pusat Konservasi Tumbuhan Kebun
Raya Bogor, LIPI.
3.5. Bahan yang Diuji
Bahan yang diuji adalah daun sirsak Annona muricata L yang didapatkan dari kebun rumah warga di desa Tinggarjaya, kecamatan
Jatilawang, Banyumas, Jawa Tengah yang akan diekstraksi dengan menggunakan pelarut metanol.
3.6. Alat dan Bahan Penelitian 3.6.1. Alat Penelitian
a. Neraca analitik
b. Tabung reaksi
c. Erlenmeyer
d. Gelas beker
e. Mikropipet
f. Rotary evaporator
g. Corong kaca
h. Pipet tetes
i. Cawan penguap
29
j. Bejana kaca maserasi
k. Batang pengaduk
l. Spatula
m. Oven
n. Hot plate stirrer
o. pH indicator paper
p. Seperangkat alat penetasan udang wadah plastik, lakban hitam,
sterofoam, aluminium foil, lampu q.
Well plate
3.6.2. Bahan Penelitian
a. Air laut
b. Akuades
c. Daun basah Annona muricata L
d. Pelarut metanol
e. Kertas saring
f. Telur Artemia salina Leach
g. DMSO
3.7. Cara Kerja Penelitian 3.7.1. Persiapan dan Pembuatan Simplisia
Daun sirsak yang didapatkan dari kebun warga daerah di desa Tinggarjaya, kecamatan Jatilawang, Banyumas, Jawa Tengah dilakukan
determinasi dahulu di Pusat Konservasi Tumbuhan Kebun Raya Bogor, LIPI untuk mengetahui spesiesnya. Setelah itu, 2 kg daun sirsak diambil,
disortir, serta dibersihkan. Daun sirsak yang telah dibersihkan kemudian dibawa ke Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat Balitro untuk
dikeringkan dan dihaluskan menjadi serbuk simplisia halus yang beratnya 572 gram. Serbuk simplisia disimpan pada suhu kamar 15-30°C.
5
3.7.2. Pembuatan Ekstrak Daun Sirsak Annona muricata L
Metode ekstraksi yang digunakan dalam penelitian ini adalah maserasi. Serbuk simplisia halus 572 gram dimasukkan ke dalam bejana