0.00 0.05
0.10 0.15
0.20 0.25
0.30 0.35
0.40 0.45
0.50
37 42
50 60
65
A kt
iv it
as S
pe si
fi k
U m
g pr
ot e
in
Suhu
o
C
SBM PKM
Gambar 5. Aktivitas spesifik mananase ekstraseluler isolat N
Gambar 6. Isolat N sebelum dan setelah diwarnai dengan congo red 0,1
4.3. Penentuan pH Optimum Bufer Mananase Isolat N
Untuk mengetahui perkiraan pH optimum bufer enzim mananase isolat N, maka dilakukan reaksi enzim-substrat menggunakan bufer dengan pH yang
berbeda-beda pada suhu 60
o
C Suhu optimum aktivitas enzim yang telah diketahui dari percobaan sebelumnya. Substrat yang digunakan adalah LBG
0,55 cair. Hasil pengujian menunjukkan bahwa enzim mananase isolat N memiliki aktivitas tertinggi pada bufer pH 5. Pada penelitian terdahulu, Xu et al.
2009 menemukan beberapa galur Bacillus subtilis penghasil mananase yang juga memiliki aktivitas optimum pada pH 5. Sedangkan Fattah et al. 2009
menemukan enzim mananase dari Aspergillus oryzae yang memiliki aktivitas optimum pada pH 5,5. Aurora et al. 2003 menemukan enzim mananase dengan
aktivitas optimum pada pH 3,0. Enzim tersebut dihasilkan oleh Bacillus pumilus. Dalam Ooi dan Kikuchi 1995 disebutkan bahwa enzim mananase yang
dihasilkan oleh bakteri rata-rata memiliki aktivitas optimum pada pH netral atau sedikit asam.
Gambar 7. Aktivitas mananase isolat N pada berbagai pH bufer
4.4. Spesifisitas Substrat
Enzim mananase dari isolat N diujikan pada beberapa macam substrat yang mengandung manan, yaitu PKM, SBM, dan copra meal CM. Hasil
pengujian menunjukkan enzim mananase ini bekerja paling baik pada substrat PKM dengan rata-rata aktivitas sebesar 1,13 Uml pada kondisi reaksi 60
o
C dan bufer pH 5. Tingginya aktivitas mananase pada substrat PKM diduga disebabkan
kandungan manan yang lebih tinggi pada PKM 30-35 dibandingkan CM 25- 30 Sundu Dingle 2003 dan SBM 1-2 Hsiao et al. 2006.
4.5. Pengaruh Ion Logam terhadap Aktivitas Mananase Isolat N
Beberapa jenis garam diujikan untuk melihat bagaimana pengaruh ion logam terhadap aktivitas enzim mananase dari isolat N. Garam-garam yang
diujikan antara lain CuCl
2 .
2H
2
O; LiCl; CoCl
2 .
7H
2
O; MgCl
2 .
6H
2
O; FeCl
3 .
6H
2
O;
0.00 20.00
40.00 60.00
80.00 100.00
120.00
4 5
6 7
8 9
10
Ak tiv
ita s
R e
lat if
pH bufer
