Persiapan Eksplan, Pengkulturan, dan Inkubasi Kultur

39

3.3.1.3 Pengaruh Kultivar dan Kondisi Inkubasi Kultur Terhadap Kemampuan Inisiasi KE Dendrobium

Variasi respon inisiasi KE ketiga kultivar yang dikulturkan dalam kondisi inkubasi yang berbeda menunjukkan secara uji statistik perbedaan kultivar dan sistem inkubasi memberikan pengaruh yang nyata, namun tidak terdapat interaksi nyata dari kedua perlakuan tersebut. Pada penelitian ini juga terbukti bahwa D. Indonesia Raya ‘Ina’ merupakan kultivar dengan respon terbaik dalam inisiasi KE dengan waktu inisiasi tercepat 10.38 hsk,kemampuan regenerasi eksplan 96.5, pembentukan KE 91.3, bobot basah KE 0.32 g, dan ukuran KE 3.31 mm 3 Tabel 3.4. Kemampuan inisiasi KE terbaik berikutnya ditunjukkan oleh D. Sonia ‘Earsakul’. Sementara kemampuan inisiasi KE terendah ditunjukkan oleh D. ‘Gradita 10’. Inkubasi terang 12 jam fotoperiode di bawah lampu fluorescent dengan intensitas cahaya 13 µmol m -2 s -1 merupakan kondisi inkubasi yang sesuai untuk inisiasi KE dibanding inkubasi gelap. Perlakuan ini memiliki waktu inisiasi KE yang lebih cepat 12.45 hari, kemampuan regenerasi eksplan 94.5, pembentukan KE 89.8, bobot basah KE 0.33 g, dan ukuran KE 3.37 mm 3 Tabel 3.4. Pada sistem kultur gelap KE yang terinisiasi umumnya mengalami nekrosis dan ketika dipindahkan ke kondisi inkubasi terang KE mengalami pencoklatan dan akhirnya mati. Tabel 3.4. Pengaruh kultivar dan sistem inkubasi terhadap inisiasi KE Dendrobium Perlakuan Waktu inisiasi KE hari Kemampuan regenerasi eksplan Pembentukan KE Bobot basah KE g Ukuran KE mm 3 Kultivar D. Sonia ‘Earsakul’ 12.8 b 94.9 a 85.1 a 0.26 a 2.74 a D . Indonesia Raya ‘Ina’ 10.4 b 96.5 a 91.3 a 0.32 a 3.31 a D . ‘Gradita 10’ 23.4 a 73.8 b 66.8 b 0.20 b 1.84 b KK 10.67 8.25 11.27 8.75 9.40 Sistem Inkubasi Terang 12.5 b 94.5 a 89.8 a 0.33 a 3.37 a Gelap 18.4 a 77.6 b 57.1 b 0.19 b 1.96 b KK 9.98 7.33 10.05 9.11 9.68 Angka rataan yang diikuti oleh huruf yang sama pada kolom yang sama untuk masing-masing perlakuan tidak berbeda nyata berdasarkan Duncan’s New Multiple Range Test DMRT pada taraf 5. KE kalus embriogenik.

3.3.1.4 Pengaruh Kultivar dan Komposisi Media Terhadap Kemampuan Inisiasi KE Dendrobium

Pada penelitian ini berhasil dibuktikan bahwa perlakuan kultivar dan media, dan interaksi kedua perlakuan memberikan pengaruh yang nyata pada semua peubah inisiasi KE yang diamati. Perbedaan kultivar memberikan pengaruh yang lebih besar dibandingkan dengan faktor media. Kultivar D. Indonesia Raya ‘Ina’ memiliki kemampuan inisiasi KE yang lebih baik dan berbeda nyata dibandingkan dengan kultivar yang lain. Kultivar ini memiliki rerata waktu 40 inisiasi kalus 8.94 hsk, kemampuan regenerasi eksplan mencapai 97.1, persentase pembentukan KE sebesar 92.2, bobot basah KE 0.30 g, dan ukuran KE 3.47 mm 3 Gambar 3.6. Sementara IM-3 medium ½ MS + 1.5 mg L -1 TDZ + 0.5 mg L -1 BA merupakan media yang paling sesuai untuk inisiasi KE dan berbeda nyata dengan media yang lain. Media IM-3 memiliki waktu inisiasi kalus tercepat 8.29 hari, kemampuan regenerasi eksplan 99.6, pembentukan KE 92.8, bobot basah KE 0.36 g, dan ukuran KE 3.81 mm 3 . Respon inisiasi KE terbaik selanjutnya berturut-turut diperlihatkan pada media IM-2, IM-1, IM-4 Gambar 3.7. Tabel 3.5. Pengaruh interaksi kultivar dan komposisi media terhadap waktu inisiasi kalus embriogenik KE hari, kemampuan regenerasi eksplan , dan pembentukan KE Dendrobium Media inisiasi IM Waktu inisiasi hari Kemampuan regenerasi Pembentukan KE D-1 D-2 D-3 D-1 D-2 D-3 D-1 D-2 D-3 IM-1 9.3 b 9.7 ab 17.4 d 92.5 b 97.2 ab 72.2 c 90.0 b 93.8 b 62.2 b IM-2 9.2 b 8.3 c 16.6 de 96.7 a 98.9 a 76.7 c 96.7 a 95.2 ab 66.7 b IM-3 8.1 c 7.1 d 16.3 e 98.2 a 99.7 a 82.7 b 96.0 a 98.7 a 76.7 a IM-4 8.4 c 7.9 cd 14.8 f 95.7 ab 98.8 a 89.1 a 86.7 bc 96.8 a 81.1 a IM-5 11.4 a 10.4 a 22.1 ab 87.1 c 93.9 b 64.4 d 81.1d 79.9 d 54.4 c IM-6 10.1 b 10.1 a 22.8 a 87.7 c 94.5 b 66.7 d 76.7 e 87.5 c 56.7 c IM-7 9.8 b 8.8 bc 21.3 b 89.6 bc 95.8 b 75.6 c 85.6 c 89.8 bc 55.6 c IM-8 9.4 b 9.2 b 19.9 c 93.2 b 97.9 ab 82.2 b 90.2 b 95.9 ab 62.2 b KK 8.31 9.21 11.56 7.04 8.85 10.26 9.66 10.12 12.55 D-1: D. Sonia ‘Earsakul’; D-2: D. Indonesia Raya ‘Ina’; D-3: D. ‘Gradita 10’. Angka rataan yang diikuti oleh huruf yang sama pada kolom yang sama pada setiap peubah tidak berbeda nyata berdasarkan Duncan’s New Multiple Range Test DMRT pada taraf 5. Tabel 3.6. Pengaruh interaksi kultivar dan komposisi media terhadap bobot basah kalus embriogenik KE g dan ukuran KE mm 3 kultur Dendrobium Media inisiasi IM Bobot basah KE g Ukuran KE mm 3 D. Sonia ‘Earsakul’ D. Indonesia Raya ‘Ina’ D. ‘Gradita 10’ D. Sonia ‘Earsakul’ D. Indonesia Raya ‘Ina’ D. ‘Gradita 10’ IM-1 0.23 bc 0.34 ab 0.19 b 2.78 b 3.93 a 1.61 c IM-2 0.26 b 0.36 a 0.23 ab 3.02 b 4.17 a 2.39 b IM-3 0.34 a 0.37 a 0.23 ab 4.10 a 4.23 a 2.10 b IM-4 0.30 a 0.30 b 0.27 a 3.21 b 3.41 b 3.10 a IM-5 0.18 c 0.26 c 0.13 c 2.00 c 3.05 bc 1.43 c IM-6 0.20 c 0.25 c 0.17 c 1.89 c 2.89 c 1.54 c IM-7 0.21 c 0.24 c 0.18 bc 2.23 c 2.78 c 2.23 b IM-8 0.26 b 0.28 bc 0.21b 2.52 bc 3.28 bc 2.44 b KK 9.58 10.21 12.15 10.39 10.33 13.77 Angka rataan yang diikuti oleh huruf yang sama pada kolom pada setiap peubah yang sama tidak berbeda nyata berdasarkan Duncan’s New Multiple Range Test DMRT pada taraf 5. Pada pengaruh interaksi terlihat bahwa TP D. Indonesia Raya ‘Ina’ yang dikultur pada medium IM-3 merupakan kombinasi perlakuan terbaik dalam inisiasi KE. Kombinasi perlakuan tersebut menunjukkan waktu inisiasi tercepat hingga 7.1 hsk dengan kemampuan regenerasi eksplan 99.7, KE 98.7, bobot basah KE 0.37 g, dan ukuran KE 4.23 mm 3 Tabel 3.5; Tabel 3.6. 41 Gambar 3.6. Pengaruh kultivar terhadap inisiasi kalus embriogenik Dendrobium IM-1 medium ½ MS + 1 mg L -1 TDZ + 0.5 mg L -1 BA Kontrol, IM-2 medium ½ MS + 1 mg L -1 TDZ +1 mg L -1 BA, IM-3 medium ½ MS + 1.5 mg L -1 TDZ + 0.5 mg L -1 BA, IM-4 medium ½ MS + 1.5 mg L -1 TDZ + 1 mg L -1 BA, IM-5 VW + 1 mg L -1 Thiamin + 2 mg L -1 TDZ + 1 mg L -1 Kinetin, IM-6 VW + 2 mg L -1 TDZ + 0.5 mg L -1 Kinetin, IM-7 VW + 1 mg L -1 TDZ + 1 mg L -1 Kinetin, dan IM-8 VW + 1 mg L -1 TDZ + 0.5 mg L -1 Kinetin. Gambar 3.7. Pengaruh media terhadap inisiasi kalus embriogenik Dendrobium a a a a b b 20 40 60 80 100 120 Kemampuan Regenerasi Kalus Embriogenik D. Sonia Earsakul D. Indonesia Raya Ina D. Gradita 10 b b a 5 10 15 20 Waktu Inisiasi Kalus hari D. Sonia Earsakul D. Indonesia Raya Ina D. Gradita 10 b a c 1 2 3 4 Ukuran Kalus mm3 D. Sonia Earsakul D. Indonesia Raya Ina D. Gradita 10 b a c 0.1 0.2 0.3 0.4 Bobot Basah Kalus g D. Sonia Earsakul D. Indonesia Raya Ina D. Gradita 10 a b a ab a a a b b c b c bc cd c d 20 40 60 80 100 120 Kemampuan Regenerasi Kalus Embriogenik IM-1 IM-2 IM-3 IM-4 IM-5 IM-6 IM-7 IM-8 c c cd b d a cd c b cd ab c a cd a d 5 10 15 20 Waktu Inisiasi Kalus hari Ukuran Kalus mm3 IM-1 IM-2 IM-3 IM-4 IM-5 IM-6 IM-7 IM-8 b b a b cd d c c 0.1 0.2 0.3 0.4 Bobot Basah Kalus g IM-1 IM-2 IM-3 IM-4 IM-5 IM-6 IM-7 IM-8 E A A B C D E B C D