Alat : - neraca Cara kerja :

78 9. Inkubasi larutan double broth secara aerob pada suhu 30° ± 1 o C selama 24 ± 2 jam. 10. Baca hasil pengamatan 11. Tes konfirmasi : Inokulasi sebanyak 1 ose dari media single broth yang ada pembentukan gas atau media yang berubah menjadi keruh ke dalam media LBBGB dan inkubasi pada suhu 30° ± 1 o C selama 24 ± 2 jam. Bila tidak ada pembentukan gas, maka inkubasi diperpanjang lagi 24 ± 2 jam 12. Inokulasi 1 ose dari media double broth tersebut ke dalam media LBBGB dan inkubasi pada suhu 30° ± 1 o C selama 24 ± 2 jam. Bila tidak ada pembentukan gas, maka inkubasi diperpanjang lagi 24 ± 2 jam. 13. Periksa tabung LBBGB apakah ada pembentukan gas 14. Coliform positif bila pada tabung LSTB terjadi pembentukan gas atau media jadi keruh, dan pada tabung LBGBB terjadi pembentukan gas. 15. Hasil dari analisa dilihat pada seri pengenceran.dengan memperhatikan peraturan sebagai berukut: a. Jika salah satu pengenceran memberikan hasil 3 tabung positif artinya hasil konfirmasi Coliform positif maka: - pilih pengenceran tertinggi dari 3 tabung dan juga semua tabung pada 2 pengenceran yang tertinggi berikutnya - jika pengenceran tertinggi berikutnya tidak dilakukan analisa maka pilih semua tabung dati hasil pengenceran tertinggi yang dianalisa b. Jika tidak ada pengenceran yang memberikan hasil 3 tabung positif, maka pilih pengenceran tertinggi yang memberikan hasil 1 tabung positif dan ditambah dengan semua tabung pada 2 pengenceran yang lebih tinggi berikutnya c. Jika peraturan a dan b tidak dapat dipakai maka - pilih semua tabung dari pengenceran terendah yang tidak memberikan hasil positif ditambah semua tabung berikutnya dari 2 pengenceran lebih rendah yang dianalisa - jika tabung yang positif hanya ditemukan pada pengenceran terendah maka pilih semua tabung dari pengenceran ini ditambah semua tabung pada pengenceran berikutnya dari dua pengenceran lebih tinggi yang dianalisa 16. Sebagai contoh Tabel 15 merupakah hasil rekonstitusi produk pada pengenceran 10 -1 79 Tabel 15 Contoh hasil rekonstitusi produk sampel Tabel 16 Indeks MPN 80 17. Penentuan indeks MPN a. Untuk setiap sampel, tentukan 3 digit profil dari tabung positif dari seri pengencerannya dan Tabel 15. b. Gunakan profil untuk menentukan indeks MPN pada masing- masing sampel dengan memakai Tabel 16. 18. Perhitungan MPN a. Hitung MPN untuk setiap sampel dengan mengalikan terbalik faktor pengenceran terendah yang dipilh dari indeks MPN b. Hasil angka yang berkisar 1.0 dan 9.9 dikalikan dengan 10. Gambar 7 Diagram perhitungan Coliform dengan tehnik MPN

IV. Referensi

NZTM 2, Section 48: Product Test Methods: Enteric Indicator Organisms, June 2000 81 LAMPIRAN 16. Analisa khamir dan kapang

I. Alat : - neraca

- sendok - pipet ukur - tabung reaksi - cawan petri - Incubator II. Bahan : - Tryptic Soy Broth TSB - Yeast Extract Glucose Chloramphenicol Agar YGC

III. Cara kerja :

1. Timbang sample milk powder sebanyak 6 gram dan larutkan dalam 54 ml larutan TSB pengenceran 10 -1 2. Pipet 1 ml larutan sample yang telah diencerkan dan masukkan dalam cawan petri steril 3. Tuangkan media YGC ± 15 ml ke dalamnya, kocok agar tercampur rata dan biarkan memadat 4. Inkubasi selama 5 hari pada suhu 25° ± 1 o C 5. Amati dan hitung jumlah koloni yeast and mould yang tumbuh

IV. Referensi