Alat : - neraca Cara kerja :
78 9.
Inkubasi larutan double broth secara aerob pada suhu 30° ± 1
o
C selama 24 ± 2 jam.
10. Baca hasil pengamatan
11. Tes konfirmasi : Inokulasi sebanyak 1 ose dari media single broth yang
ada pembentukan gas atau media yang berubah menjadi keruh ke dalam media LBBGB dan inkubasi pada suhu 30°
± 1
o
C selama 24 ± 2 jam. Bila tidak ada pembentukan gas, maka inkubasi diperpanjang lagi 24 ± 2
jam
12. Inokulasi 1 ose dari media double broth tersebut ke dalam media
LBBGB dan inkubasi pada suhu 30° ± 1
o
C selama 24 ± 2 jam. Bila tidak ada pembentukan gas, maka inkubasi diperpanjang lagi 24 ± 2 jam.
13. Periksa tabung LBBGB apakah ada pembentukan gas
14. Coliform positif bila pada tabung LSTB terjadi pembentukan gas atau
media jadi keruh, dan pada tabung LBGBB terjadi pembentukan gas. 15.
Hasil dari analisa dilihat pada seri pengenceran.dengan memperhatikan peraturan sebagai berukut:
a. Jika salah satu pengenceran memberikan hasil 3 tabung positif
artinya hasil konfirmasi Coliform positif maka: -
pilih pengenceran tertinggi dari 3 tabung dan juga semua tabung pada 2 pengenceran yang tertinggi berikutnya
- jika pengenceran tertinggi berikutnya tidak dilakukan analisa
maka pilih semua tabung dati hasil pengenceran tertinggi yang dianalisa
b. Jika tidak ada pengenceran yang memberikan hasil 3 tabung
positif, maka pilih pengenceran tertinggi yang memberikan hasil 1 tabung positif dan ditambah dengan semua tabung pada 2
pengenceran yang lebih tinggi berikutnya
c. Jika peraturan a dan b tidak dapat dipakai maka
- pilih semua tabung dari pengenceran terendah yang tidak
memberikan hasil positif ditambah semua tabung berikutnya dari 2 pengenceran lebih rendah yang dianalisa
- jika tabung yang positif hanya ditemukan pada pengenceran
terendah maka pilih semua tabung dari pengenceran ini ditambah semua tabung pada pengenceran berikutnya dari
dua pengenceran lebih tinggi yang dianalisa
16. Sebagai contoh Tabel 15 merupakah hasil rekonstitusi produk pada
pengenceran 10
-1
79 Tabel 15 Contoh hasil rekonstitusi produk sampel
Tabel 16 Indeks MPN
80 17.
Penentuan indeks MPN a.
Untuk setiap sampel, tentukan 3 digit profil dari tabung positif dari seri pengencerannya dan Tabel 15.
b. Gunakan profil untuk menentukan indeks MPN pada masing-
masing sampel dengan memakai Tabel 16. 18.
Perhitungan MPN a.
Hitung MPN untuk setiap sampel dengan mengalikan terbalik faktor pengenceran terendah yang dipilh dari indeks MPN
b. Hasil angka yang berkisar 1.0 dan 9.9 dikalikan dengan 10.
Gambar 7 Diagram perhitungan Coliform dengan tehnik MPN