ALAT METODE PENELITIAN METODOLOGI

29 Nutrient Agar Difco TM , TSIA Triple Sugar Iron Agar Oxoid TM , LIA Lysine Iron Agar Oxoid TM , larutan fisiologis NaCl 0.85, aquades dan spiritus.

C. ALAT

Alat- alat yang digunakan pada penelitian ini terdiri dari peralatan pembuatan tepung ubi garut dan ubi jalar, peralatan pembuatan cookies, peralatan ekstraksi, peralatan kandang, penyiapan sonde prebiotik, probiotik, sinbiotik dan peralatan pengujian mikrobiologi. Peralatan pembuatan tepung ubi garut meliputi oven pengering cabinet drier, electric slicer, willey mill dan ayakan 60 mesh. Peralatan pembuatan cookies ubi garut dan cookies ubi jalar adalah stand mixer, baskom, spatula, loyang, baking oven, cetakan cookies. Peralatan ekstraksi dan sterilisasi ekstrak gula meliputi magnetic stirrer, plate stirer , evaporator vakum, sentrifus, gelas ukur, botol penyemprot, kertas Whatman No. 1, filter membran steril 0.45 µm dan 0.2 µm Millipore. Peralatan pengujian mikrobiologi meliputi otoklaf, inkubator 37 o C, anaerobic jar, ANOXOMAT tm , Laminar hood , refrigerator, spektrofotometer, cawan petri, tabung reaksi, erlenmeyer, gelas piala, kertas label, alumunium foil, kapas, vorteks, micropipette 100-1000 µ m, tip 100-1000 µ m, syringe, bunsen dan ose. Alat yang digunakan untuk penyiapan sonde prebiotik, probiotik, sinbiotik adalah tabung sentrifus volume 2ml dan 12 ml, sentrifus berpendingin Mikro 22R Hettich TM . Alat-alat yang diperlukan untuk pemeliharaan dan perlakuan tikus adalah sonde, sekam, gelas ukur plastik, baskom, ember penampung air, gayung, kandang lengkap dengan tutupnya, wadah minum lengkap dengan corong kaca, wadah ransum, syringe volume 1ml dan pemanas air listrik.

D. METODE PENELITIAN

Penelitian yang dilakukan terdiri dari lima tahapan utama yaitu: 1 Penyiapan kultur, media pengujian dan bahan. Penyiapan bahan yang dimaksud adalah mulai dari pembuatan tepung ubi garut, ubi jalar dan SPF, ekstraksi gula dan oligosakarida 2 Pengujian potensi prebiotik secara in vitro, yaitu pengujian pertumbuhan BAL uji dan uji kompetisi antara BAL dengan patogen dalam media yang mengandung gula dan oligosakarida 3 Pengujian potensi prebiotik SPF dan ekstrak ubi garut secara in vivo 4. Skema penelitian digambarkan sebagai diagram alir seperti yang tertuang dalam Gambar 5. 30 Pengujian Potensi Prebiotik Ubi Jalar Pengujian Potensi Prebiotik Ubi Garut Gambar 5 Diagram alir penelitian Tepung ubi jalar Ubi garut Pembuatan cookies ubi garut Pembuatan tepung ubi garut Ekstraksi gula oligosakarida Ekstraksi gula oligosakarida Ekstraksi gula oligosakarida Tepung SPF Ekstraksi gula oligosakarida Ekstrak SPF Ekstrak cookies ubi jalar Ekstrak cookies ubi garut Ekstrak tepung ubi garut Pembuatan cookies ubi jalar Ekstraksi gula oligosakarida Ekstrak tepung ubi jalar Uji pertumbuhan BAL pada ekstrak oligosakarida secara in vitro Uji kompetisi BAL dengan patogen secara in vitro Uji potensi prebiotik secara in vivo Ubi jalar SPF 1 2 4 3 31

E. PENYIAPAN KULTUR, MEDIA PENGUJIAN DAN BAHAN 1. Penyiapan kultur