29
Nutrient Agar Difco
TM
, TSIA Triple Sugar Iron Agar Oxoid
TM
, LIA Lysine Iron Agar
Oxoid
TM
, larutan fisiologis NaCl 0.85, aquades dan spiritus.
C. ALAT
Alat- alat yang digunakan pada penelitian ini terdiri dari peralatan pembuatan tepung ubi garut dan ubi jalar, peralatan pembuatan cookies, peralatan
ekstraksi, peralatan kandang, penyiapan sonde prebiotik, probiotik, sinbiotik dan peralatan pengujian mikrobiologi. Peralatan pembuatan tepung ubi garut meliputi
oven pengering cabinet drier, electric slicer, willey mill dan ayakan 60 mesh. Peralatan pembuatan cookies ubi garut dan cookies ubi jalar adalah stand mixer,
baskom, spatula, loyang, baking oven, cetakan cookies. Peralatan ekstraksi dan sterilisasi ekstrak gula meliputi magnetic stirrer,
plate stirer , evaporator vakum, sentrifus, gelas ukur, botol penyemprot, kertas
Whatman No. 1, filter membran steril 0.45 µm dan 0.2 µm Millipore. Peralatan
pengujian mikrobiologi meliputi otoklaf, inkubator 37
o
C, anaerobic jar, ANOXOMAT
tm
, Laminar hood , refrigerator, spektrofotometer, cawan petri,
tabung reaksi, erlenmeyer, gelas piala, kertas label, alumunium foil, kapas, vorteks, micropipette 100-1000
µ m, tip 100-1000 µ m, syringe, bunsen dan ose.
Alat yang digunakan untuk penyiapan sonde prebiotik, probiotik, sinbiotik adalah tabung sentrifus volume 2ml dan 12 ml, sentrifus berpendingin Mikro
22R Hettich
TM
. Alat-alat yang diperlukan untuk pemeliharaan dan perlakuan tikus adalah sonde, sekam, gelas ukur plastik, baskom, ember penampung air,
gayung, kandang lengkap dengan tutupnya, wadah minum lengkap dengan corong kaca, wadah ransum, syringe volume 1ml dan pemanas air listrik.
D. METODE PENELITIAN
Penelitian yang dilakukan terdiri dari lima tahapan utama yaitu: 1 Penyiapan kultur, media pengujian dan bahan. Penyiapan bahan yang
dimaksud adalah mulai dari pembuatan tepung ubi garut, ubi jalar dan SPF, ekstraksi gula dan oligosakarida 2 Pengujian potensi prebiotik secara in vitro,
yaitu pengujian pertumbuhan BAL uji dan uji kompetisi antara BAL dengan patogen dalam media yang mengandung gula dan oligosakarida 3 Pengujian
potensi prebiotik SPF dan ekstrak ubi garut secara in vivo 4. Skema penelitian digambarkan sebagai diagram alir seperti yang tertuang dalam Gambar 5.
30
Pengujian Potensi Prebiotik Ubi Jalar Pengujian Potensi Prebiotik Ubi Garut
Gambar 5 Diagram alir penelitian
Tepung ubi jalar Ubi garut
Pembuatan cookies ubi garut
Pembuatan tepung ubi garut
Ekstraksi gula oligosakarida
Ekstraksi gula oligosakarida
Ekstraksi gula oligosakarida
Tepung SPF
Ekstraksi gula oligosakarida
Ekstrak SPF Ekstrak cookies ubi jalar
Ekstrak cookies ubi garut Ekstrak tepung ubi
garut Pembuatan cookies ubi
jalar
Ekstraksi gula oligosakarida
Ekstrak tepung ubi jalar
Uji pertumbuhan BAL pada ekstrak oligosakarida secara in vitro
Uji kompetisi BAL dengan patogen secara in vitro
Uji potensi prebiotik secara in vivo Ubi jalar
SPF
1
2
4 3
31
E. PENYIAPAN KULTUR, MEDIA PENGUJIAN DAN BAHAN 1. Penyiapan kultur