Lampiran 6. Penentuan kandungan fenolik total a.
Asam Galat 1. Kosentrasi larutan induk
Replikasi 1 Replikasi 2
Replikasi 3
10,2 mg 10 mL
= 1020 µgmL
10,2 mg 10 mL
= 1020 µgmL
10,1 mg 10 mL
= 1010 µgmL
2. Konsentrasi seri larutan asam galat
Seri larutan asam galat
Konsentrasi larutan asam galat Replikasi 1
Replikasi 2 Replikasi 3
Seri 1 51,0 µgmL
51,0 µgmL 50,5 µgmL
Seri 2 76,5µgmL
76,5 µgmL 75,75 µgmL
Seri 3 102,0 µgmL 102,0 µgmL
101,0 µgmL Seri 4
127,5 µgmL 127,5 µgmL 126,25 µgmL Seri 5
153,0 µgmL 153,0 µgmL 151,5 µgmL
Contoh perhitungan konsentrasi larutan asam galat Replikasi 1 :
Larutan induk = 1020 µgmL
Konsentrasi larutan pembanding seri 1 V
1
x C
1
= V
2
x C
2
0,5 mL x1020 µgmL = 10 mL x C
2
C
2
= 51,0 µgmL
3. Pengukuran seri konsentrasi asam galat
Replikasi Konsentrasi
µgmL Absorbansi
asam galat Persamaan regresi linier
51,0 0,231
76,5 0,354
I 102,0
0,485 y = 0,0053x – 0,0462
127,5 0,632
r = 0,9995 153,0
0,767 Replikasi
Konsentrasi µgmL
Absorbansi asam galat
Persamaan regresi linier 51,0
0,242 76,5
0,363 II
102,0 0,489
y = 0,0052x – 0,0312 127,5
0,637 r = 0,9993
153,0 0,769
Replikasi Konsentrasi
µgmL Absorbansi
asam galat Persamaan regresi linier
50,5 0,221
75,75 0,346
III 101,0
0,481 y = 0,0054x – 0,0564
126,25 0,626
r = 0,9997 151,5
0,760
b. Pengukuran sampel Digunakan persamaan y = 0,0054x – 0,0564
Sampel replikasi 1
Konsentrasi sampel = 101 µgmL
Volume = 100 mL
Bobot sampel = 0,01 g
Absorbansi sampel = 0,449
y = 0,0054x – 0,0564 0,449 = 0,0054x – 0,0564
x =
0,449+ 0,0564 0,0054
= 93,59 µgmL Kandungan fenolik total =
x .
v m
= 0,09359
mgmL
.
100 ��
0,0101 �
= 926,6 mg ekuivalensi asam galat per g fraksi
Sampel replikasi 2
Konsentrasi sampel = 100 µgmL
Volume = 100 mL
Bobot sampel = 0,01 g
Absorbansi sampel = 0,448
y = 0,0054x – 0,0564 0,448 = 0,0054x – 0,0564
x =
0,448+ 0,0564 0,0054
= 93,41 µgmL Kandungan fenolik total =
x .
v m
= 0,09341
mgmL
.
100 ��
0,01 �
= 934,1 mg ekuivalensi asam galat per g fraksi
Sampel replikasi 3
Konsentrasi sampel = 99 µgmL
Volume = 100 mL
Bobot sampel = 0,01 g
Absorbansi sampel = 0,446
y = 0,0054x – 0,0564 0,446 = 0,0054x – 0,0564
x =
0,446+ 0,0564 0,0054
= 93,04 µgmL Kandungan fenolik total =
x .
v m
= 0,09304
mgmL
.
100 ��
0,0099 �
= 939,8 mg ekuivalensi asam galat per g fraksi
Lampiran 7. Data penimbangan aktivitas antioksidan a. Penimbangan DPPH untuk penentuan OT kuersetin
Replikasi 1 g Repilkasi 2 g Replikasi 3 g
Bobot kertas 0,2125
0,2086 0,2167
Bobot kertas + DPPH 0,2286
0,2245 0,2324
Bobot kertas + sisa 0,2126
0,2088 0,2168
Bobot DPPH 0,0160
0,0157 0,0156
b. Penimbangan DPPH untuk pengukuran seri konsentrasi kuersetin Replikasi 1 g Repilkasi 2 g
Replikasi 3 g Bobot kertas
0,2132 0,2093
0,2215 Bobot kertas + DPPH
0,2291 0,2254
0,2374 Bobot kertas + sisa
0,2133 0,2095
0,2216 Bobot DPPH
0,0158 0,0159
0,0158 c. Penimbangan DPPH untuk penentuan OT dan pengukuran seri
konsentrasi larutan uji
Replikasi 1 g Repilkasi 2 g Replikasi 3 g
Bobot kertas 0,2077
0,2115 0,2203
Bobot kertas + DPPH 0,2237
0,2275 0,2363
Bobot kertas + sisa 0,2079
0,2117 0,2204
Bobot DPPH 0,0158
0,0158 0,0159
d. Penimbangan kuersetin Replikasi 1 g Repilkasi 2 g Replikasi 3 g
Bobot kertas 0,2136
0,2082 0,2192
Bobot kertas + kuersetin 0,2239
0,2185 0,2294
Bobot kertas + sisa 0,2137
0,2084 0,2195
Bobot kuersetin 0,0102
0,0101 0,0099
e. Penimbangan fraksi etil asetat ekstrak metanolik daun apel beludru Replikasi 1 g Repilkasi 2 g Replikasi 3 g
Bobot kertas 0,2207
0,2185 0,2152
Bobot kertas + fraksi
0,2308
0,2286 0,2253
Bobot kertas + sisa
0,2207 0,2186
0,2154
Bobot fraksi
0,0101 0,0100
0,0099
Lampiran 8. Data perhitungan konsentrasi DPPH, larutan pembanding, dan larutan uji
a. Konsentrasi DPPH untuk pengukuran aktivitas kuersetin 1. Replikasi 1
BM = 394,33 Mol =
massa BM
=
15,8 mg 394,33
= 0,0401 mmol M =
mol volume
=
0,0401 mmol 0,1 L
= 0,4010 mM
2. Replikasi 2