25
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
BAB 3 METODE PENELITIAN
3.1 Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi Pusat Laboratorium Terpadu PLT dan Laboratorium Farmakognosi dan Fitokimia, Universitas Islam
Negeri Syarif Hidayatullah, Jakarta. Waktu penelitian dimulai pada bulan Februari
hingga bulan Juni 2015.
3.2 Alat
Alat yang digunakan pada penelitian ini yaitu : Laminar Air Flow, incubator Memmert, spektrofotometer Hitachi, shaker Stuart Scientific, alat
sentrifus Hettich zentrifugen, Oven Memmert, timbangan Scout Pro, mikroskop cahaya Shimadzu, autoklaf Jall American, autoklaf digital ALP,
hot plate ARE Heating Magnetic Stirrer, kertas saring steril, paper disc, micro pipet dan tip, magnetic stirrer, pinset, cawan petri, tabung reaksi, jarum ose, ose
bulat, beaker glass, gelas ukur, tabung reaksi, bunsen, glass object, cover glass, kaca arloji, batang pengaduk, batang penyebar kaca segitiga, spatula, labu
Erlenmeyer, dan alat-alat gelas lainnya yang umum digunakan pada Laboratorium Mikrobiologi.
3.3 Bahan
3.3.1 Tanaman
Sampel tumbuhan yang digunakan dalam penelitian ini adalah tanaman Parijoto Medinilla speciosa Reinw. ex Blume yang diperoleh dari lereng
Gunung Muria pada bulan Februari 2015. Bagian tumbuhan yang digunakan dalam penelitian ini adalah bagian ranting buah dan ranting daun. Tanaman ini
telah dideterminasi di Herbarium Bogoriense, LIPI, Cibinong, Bogor.
3.3.2 Bahan Kimia Sterilisasi Permukaan :
Larutan Natrium Hipoklorit NaOCl 5,25 Baycline, etanol 70, dan akuades steril.
26
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
3.3.3 Medium Pertumbuhan Mikroba :
a. Medium yang digunakan untuk isolasi dan pemurnian kapang endofit yaitu: Potato Dextrose Agar Merck
b. Medium yang digunakan untuk kultur dan pertumbuhan bakteri yaitu : Nutrient Broth Merck, Nutrient Agar Merck.
c. Medium yang digunakan untuk fermentasi kapang endofit Potato Dextrose Broth PDB, Yeast Extract Merck, dan CaCO
3
. d. Medium yang digunakan untuk uji aktivitas antibakteri yaitu: Mueller
Hinton Agar Oxoid.
3.3.4 Bahan Uji Aktivitas Antibakteri
a. Bakteri uji : Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Salmonella enterica sv typhimurium ATCC 14028, Shigella
dysenteriae ATCC 13313, dan Bacillus subtilis ATCC 6633. b. Bahan pewarnaan Gram: Kristal violet 0,5, cairan Lugol, etanol 96,
Safranin. c. Antibiotik : Kloramfenikol
d. Bahan pengenceran inokulum: NaCl fisiologis 0,9
3.4 Cara Kerja