13
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
2.4 Sterilisasi alat dan bahan
Menurut Kharisma 2012 sterilisasi alat dan medium dilakukan dengan : 1. Pembakar Bunsen digunakan untuk mensterilkan peralatan seperti ose, jarum,
dan spatula dengan cara membakar ujung peralatan tersebut di atas api Bunsen sampai berpijar.
2. Oven digunakan untuk mensterilkan cawan petri, kertas saring, beaker glass dan alat gelas lainnya yang tidak presisi. Penggunaan alat ini dengan
memasukkan alat-alat tersebut ke dalam oven dan dipanaskan dengan suhu 160-170°C selama 1-2 jam.
3. Autoklaf digunakan untuk mensterilkan tabung reaksi bertutup, medium dan Erlenmeyer. Penggunaan alat ini dengan memasukkan alat-alat tersebut ke
dalam autoklaf yang ditutup dengan rapat dan nyalakan autoklaf dengan suhu 121°C dan tekanan 1 atm selama 15 menit.
Teknik sterilisasi dengan uap adalah metode yang paling dapat diandalkan untuk dekontaminasi pembuangan laboratorium dan sterilisasi peralatan kaca,
medium, dan reagen dalam laboratorium Sultana, 2007.
2.5 Bakteri Gram positif dan Gram negatif
Bakteri merupakan sel prokariotik yang uniseluler sel tunggal dengan struktur internal sederhana. Reproduksi aseksual, khasnya dengan pembelahan sel
sederhana. Bakteri yang diinokulasikan pada medium yang sesuai dan pada keadaan yang optimum bagi pertumbuhannya maka terjadi kenaikan jumlah yang
amat tinggi dalam waktu yang relatif singkat yaitu 24 jam. Ukuran khas 0,5-1,5 µm x 1,0-0,3 µm. Sel-sel individu bakteri dapat berbentuk seperti elips, bola,
batang silindris, atau spiral heliks Pelczar dan Chan, 1986. Berdasarkan komposisi dinding selnya, bakteri dibagi menjadi dua
golongan, yaitu Gram positif dan Gram negatif. Bakteri Gram negatif mengandung lipid lemak atau substansi seperti lemak dalam persentase lebih
tinggi dari pada yang dikandung bakteri Gram positif. Dinding sel bakteri Gram negatif juga lebih tipis dari pada sel bakteri Gram positif Pelczar dan Chan,
1986.
14
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Tabel 2.1 Memperlihatkan perbedaan ciri bakteri Gram negatif dan bakteri Gram
positif Pelczar dan Chan, 1986. Ciri
Perbedaan relatif Gram postif
Gram negatif
Struktur dinding sel Tebal 15-80 nm, berlapis tunggal
Tipis 10-15 nm, berlapis tiga multi
Komposisi dinding sel
Kandungan lipid rendah 1- 4
peptidoglikan ada
sebagai lapisan
tunggal, komponen
utama merupakan lebih dari 50
berat kering pada sel bakteri Asam Tekoat
Kandungan lipid tinggi 11- 22 peptidoglikan ada di
dalam lapisan kaku sebelah dalam; jumlahnya sedikit,
merupakan sekitar
10 berat kering
Tidak ada asam tekoat Kerentanan terhadap
penisilin Lebih rentan
Kurang rentan
Persyaratan nutrisi Relatif murni pada banyak
spesies Relatif sederhana
Resisten terhadap
gangguan fisik Lebih resisten
Kurang resisten
2.6 Bakteri Uji