Sterilisasi alat dan bahan Bakteri Gram positif dan Gram negatif

13 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2.4 Sterilisasi alat dan bahan

Menurut Kharisma 2012 sterilisasi alat dan medium dilakukan dengan : 1. Pembakar Bunsen digunakan untuk mensterilkan peralatan seperti ose, jarum, dan spatula dengan cara membakar ujung peralatan tersebut di atas api Bunsen sampai berpijar. 2. Oven digunakan untuk mensterilkan cawan petri, kertas saring, beaker glass dan alat gelas lainnya yang tidak presisi. Penggunaan alat ini dengan memasukkan alat-alat tersebut ke dalam oven dan dipanaskan dengan suhu 160-170°C selama 1-2 jam. 3. Autoklaf digunakan untuk mensterilkan tabung reaksi bertutup, medium dan Erlenmeyer. Penggunaan alat ini dengan memasukkan alat-alat tersebut ke dalam autoklaf yang ditutup dengan rapat dan nyalakan autoklaf dengan suhu 121°C dan tekanan 1 atm selama 15 menit. Teknik sterilisasi dengan uap adalah metode yang paling dapat diandalkan untuk dekontaminasi pembuangan laboratorium dan sterilisasi peralatan kaca, medium, dan reagen dalam laboratorium Sultana, 2007.

2.5 Bakteri Gram positif dan Gram negatif

Bakteri merupakan sel prokariotik yang uniseluler sel tunggal dengan struktur internal sederhana. Reproduksi aseksual, khasnya dengan pembelahan sel sederhana. Bakteri yang diinokulasikan pada medium yang sesuai dan pada keadaan yang optimum bagi pertumbuhannya maka terjadi kenaikan jumlah yang amat tinggi dalam waktu yang relatif singkat yaitu 24 jam. Ukuran khas 0,5-1,5 µm x 1,0-0,3 µm. Sel-sel individu bakteri dapat berbentuk seperti elips, bola, batang silindris, atau spiral heliks Pelczar dan Chan, 1986. Berdasarkan komposisi dinding selnya, bakteri dibagi menjadi dua golongan, yaitu Gram positif dan Gram negatif. Bakteri Gram negatif mengandung lipid lemak atau substansi seperti lemak dalam persentase lebih tinggi dari pada yang dikandung bakteri Gram positif. Dinding sel bakteri Gram negatif juga lebih tipis dari pada sel bakteri Gram positif Pelczar dan Chan, 1986. 14 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta Tabel 2.1 Memperlihatkan perbedaan ciri bakteri Gram negatif dan bakteri Gram positif Pelczar dan Chan, 1986. Ciri Perbedaan relatif Gram postif Gram negatif Struktur dinding sel Tebal 15-80 nm, berlapis tunggal Tipis 10-15 nm, berlapis tiga multi Komposisi dinding sel Kandungan lipid rendah 1- 4 peptidoglikan ada sebagai lapisan tunggal, komponen utama merupakan lebih dari 50 berat kering pada sel bakteri Asam Tekoat Kandungan lipid tinggi 11- 22 peptidoglikan ada di dalam lapisan kaku sebelah dalam; jumlahnya sedikit, merupakan sekitar 10 berat kering Tidak ada asam tekoat Kerentanan terhadap penisilin Lebih rentan Kurang rentan Persyaratan nutrisi Relatif murni pada banyak spesies Relatif sederhana Resisten terhadap gangguan fisik Lebih resisten Kurang resisten

2.6 Bakteri Uji