g. Kadar Klorofil Yoshida et al., 1976
Sampel sebanyak 0.5 gram dihomogenisasi dengan aseton hingga mencapai konsentrasi 80. Kemudian didiamkan di ruang gelap selama 2 malam untuk
memperoleh kelarutan komponen klorofil yang lebih baik. Supernatan diambil melalui kertas saring ke dalam labu takar 30 ml, lalu ditepatkan dengan aseton.
Ekstrak klorofil diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 645 nm dan 663 nm. Setelah itu kadar klorofil diukur dengan menggunakan rumus sebagai
berikut.
Keterangan : Ca
= Kadar klorofil a Cb
= Kadar klorofil b C = Kadar klorofil
D663= Absorbansi pada panjang gelombang 663 nm D645= Absorbansi pada panjang gelombang 645 nm
Vs = Volume sampel ml
Fp = Faktor pengenceran
h. Zat Pigmen Angkak
Analisa kadar pigmen dilakukan terhadap kadar pigmen merah. Pengukuran dilakukan dengan menggunakan spektrofotometer spectronic tipe 20D merek
Bausch dan Lomb. Sebanyak 1 ml larutan VCO yang telah mengandung ekstrak zat pigmen
dilarutkan dalam 10 ml aseton, lalu disentrifuse. Pengukuran dilakukan dengan panjang gelombang 385 nm, dengan aseton sebagai blanko. Hasil pengukuran
dibaca sebagai persen tranmisi. Pembacaan harus berada pada kisaran 20-80 . Untuk memperoleh kadar pigmen dalam absorbansi, maka nilai persen tranmisi
Ca = { 12.7 x D663 – 2.69 x D645 } x Vs1000 x Fp Cb = { 22.9 x D645 – 4.68 x D663 } x Vs1000 x Fp
C = Ca + Cb
T perlu diubah menjadi nilai absorbansi A dan dikalikan dengan faktor pengencer FP. Rumus yang digunakan adalah sebagai berikut:
i. Nilai pH AOAC, 1995
Analisis derajat keasaman pH ditentukan menggunakan alat pH meter yang sebelumnya telah dikalibrasi terlebih dahulu. Alat pH meter dinyalakan dan
dibiarkan stabil selama 15-20 menit, kemudian elektroda dibilas dengan larutan buffer atau akuades. Bila menggunakan akuades, elektroda dikeringkan dengan
kertas tissue. Elektroda dicelupkan ke dalam larutan buffer dan didiamkan beberapa saat hingga diperoleh pembacaan yang stabil. Angka pH meter
disesuaikan dengan pH buffer, yaitu buffer pH 4 dan buffer pH 7. pH meter dikalibrasi terlebih dahulu dengan buffer pH 7 dan pH 4. Pengukuran pH sampel
dilakukan dengan mencelupkan elektroda dalam 20 ml sampel yang ditempatkan dalam pot plastik. Besarnya nilai pH adalah pembacaan setelah stabil dalam 1
menit. Elektroda diangkat lalu dibilas dengan air destilata dan selanjutnya dapat digunakan untuk pengukuran pH sampel berikutnya.
j. Aktivitas Antioksidan Metode
Kategori