Selanjutnya determinasi dilakukan dengan membandingkan simplisia tanaman yang digunakan dengan herbarium tanaman Macaranga tanarius L. koleksi
Laboratorium Botani Farmasi. Determinasi dilakukan di Laboratorium Botani Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.
2. Pengumpulan bahan uji
Bahan uji yang digunakan adalah daun Macaranga tanarius L. yang diperoleh dari tanaman Macaranga tanarius L. yang tumbuh di daerah Paingan,
Maguwoharjo, Depok, Sleman, Yogyakarta. Daun dipanen pada bulan April 2015 dengan kriteria daun yang masih segar, berwarna hijau, tidak terlalu tua atau
muda, dan tidak berlubang.
3. Pembuatan serbuk daun Macaranga tanarius L.
Daun Macaranga tanarius L. yang telah dikumpulkan, dicuci dengan air mengalir, kemudian ditiriskan untuk meniadakan air pada daun. Selanjutnya daun
dikeringkan di bawah sinar matahari dengan bantuan kain, selanjutnya dikeringkan kembali dalam oven pada suhu 45˚C-50
o
C. Setelah daun benar-benar kering, daun diserbuk dan diayak dengan menggunakan ayakan nomor 40.
Penyerbukan daun dilakukan di LPPT Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.
4. Penetapan kadar air pada serbuk kering daun Macaranga tanarius L.
Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Gravimetri dengan menggunakan alat moisture balance. Sebanyak 5 gram serbuk Macaranga
tanarius L. dimasukkan ke dalam alat dan diratakan kemudian bobot serbuk ditimbang sebagai bobot sebelum pemanasan. Serbuk dipanaskan pada suhu 105º
C selama 3 jam hingga berat konstan dan ditimbang bobot serbuk setelah
pemanasan. Selisih bobot serbuk sebelum dan setelah pemanasan merupakan kadar air dar serbuk yang diselidiki. Persyarataan serbuk yang baik yaitu kurang
dari 10 Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan, 1995.
5. Pembuatan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.
a. Pembuatan ekstrak kental daun Macaranga tanarius L.
Gambar 4. Flowchart langkah pembuatan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.
Oven suhu 40
C ± 24 jam
Didapatkan bobot tetap
ekstrak kental daun
Macaranga tanarius L.
Ekstrak cair
Ekstrak Kental
Uapkan pada water bath untuk
menghilangkan aquadest
40 gram serbuk M.tanarius
Maserasi 140 rpm selama 72 jam
Remaserasi 2x Maserat
- Saring dengan corong buchner - Dipekatkan dengan Rotary evaporator 3 rpm
pada suhu 65 C
100 mL metanol 70 dan 100 mL aquadest
b. Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.
Gambar 5. Flowchart langkah pembuatan fraksi etanol-heksan dari hasil ekstrak kental metanol-air daun Macaranga tanarius L.
6. Penetapan konsentrasi terpekat