Alat Alat dan Bahan

26 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta dan dibiarkan dingin sebelum digunakan. Preparat sampel disiapkan dalam bentuk suspensi di atas kaca objek lalu difiksasi dengan melewatkan kaca objek pada api bunsen. Preparat kemudian diwarnai dengan larutan kristal violet 0,5 dan dibiarkan selama 1 menit, lalu dicuci dengan air mengalir selama 5 detik, diteteskan larutan lugol dan dibiarkan selama 1 menit, lalu dicuci kembali dengan air mengalir. Preparat kemudian dibilas dengan etanol 96 selama 30 detik sampai tidak ada lagi zat warna lugol, lalu dicuci dengan air mengalir. Preparat selanjutnya diteteskan larutan safranin selama 45 menit. Dicuci kembali dengan air mengalir. Preparat dikeringkan dengan cara diletakkan di atas tisu steril dan diamati dengan mikroskop cahaya dari perbesaran terkecil hingga terbesar Kumala et al., 2006.

3.3.8 Pembuatan Inokulum Bakteri Uji

Suspensi bakteri dibuat dengan cara, satu ose masing-masing bakteri uji pada media agar NA miring yang telah diinkubasi selama 24 jam diinokulasikan ke dalam larutan 9 mL NaCl 0,9. Kekeruhannya diseragamkan dengan menggunakan standar McFarland 3 10 9 CFUmL Noverita et al., 2009. Suspensi bakteri 10 9 CFUmL kemudian diencerkan sehingga diperoleh suspensi bakteri 10 6 CFUmL. Pengenceran dilakukan dengan cara dari suspensi bakteri 10 9 dipipet 1 mL dan dimasukkan ke dalam tabung yang berisi 9 mL NaCl 0,9 sehingga diperoleh suspensi bakteri 10 8 CFUmL. Suspensi bakteri 10 8 dipipet 1mL ke dalam tabung reaksi yang berisi 9 mL NaCl 0,9, sehingga diperoleh suspensi bakteri 10 7 CFUmL. Dari suspensi bakteri 10 7 diambil 1 mL ke dalam tabung reaksi yang berisi 9 mL NaCl 0,9 sehingga diperoleh suspensi bakteri 10 6 CFUmL Andidha, 2015.

3.3.9 Seleksi Kapang Endofit yang Berpotensi sebagai Antibakteri

Seleksi kapang endofit penghasil antibakteri dilakukan dengan menginokulasikan satu potongan agar isolat kapang murni yang berumur 7-14 hari ke media MHA yang telah mengandung bakteri uji. Masing-masing kultur