30
BAB III METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian tentang efek antiinflamasi topikal ekstrak etanol daun Crescentia cujete
pada mencit betina galur Swiss diinduksi karagenan merupakan jenis penelitian eksperimental murni dengan menggunakan rancangan acak lengkap
pola searah.
B. Variabel Penelitian dan Definifi Operasional
1. Variabel Penelitian
a. Variabel utama 1 Variabel bebas
: Konsentrasi ekstrak etanol daun majapait. 2 Variabel tergantung
: a Jumlah sel-sel neutrofil yang bermigrasi
b Penekanan ekspresi siklooksigenase-2 didaerah subkutan. b. Variabel pengacau
1 Variabel pengacau terkendali a
Subyek uji : Mencit betina galur Swiss
b Umur : 6
– 8 minggu 2-3 bulan c Berat badan : 20-30 gram
d Keadaan subyek : Sehat 2 Variabel pengacau tidak terkendali
: kondisi patofisiologis mencit yang digunakan dalam penelitian.
2. Definisis oprasional
a. Inflamasi merupakan mekanisme pertahanan tubuh sebagai respon normal terhadap trauma fisik, zat kimia berbahaya atau agen
mikrobiologi. Adapun respon yang umumnya muncul meliputi rubor kemerahan, kalor panas, dolor nyeri dan tumor pembengkakan.
b. Migrasi Neutrofil merupakan sel leukosit yang bermigrasi dari pembuluh darah ke daerah subkutan punggung mencit dalam 3 bentuk berbeda
yaitu, berinti satu, berinti dua dan beriti ladam kuda pada pengukuran 24 jam setelah diinjeksikan karagenin 3.
c. Ekspresi COX-2 merupakan ekspresi COX-2 oleh sel neutrofil yang berwarna coklatgelap pada daerah subkutan jaringan kulit mencit selama
pengukuran 24 jam setelah diinjeksikan karagenin 3. d. Daun Crescentia cujete yang digunakan merupakan daun yang berwarna
hijau segar, tidak berlubang, serta tidak terdapat kotoran dari binatang kecil yang didapat dari tanaman milik warga di Jl. Garuda, No. 168,
Pringwulung, Yogyakarta. e. Ekstrak etanol daun Crescentia cujete merupakan hasil ekstraksi
simplisia daun Crescentia cujete seberat 15 gram yang dimaserasi pada 100 mL etanol 70 selama dua hari. Kemudian diremaserasi dalam
jumlah pelarut yang sama selama satu hari, disaring dengan kertas saring, dan dipekatkan pada waterbath hingga menjadi ekstrak kental.
f. Konsentrasi ekstrak etanol daun Crescentia cujete merupakan berat
ekstrak kental etanol daun Crescentia cujete gram dalam basis gram
dengan satuan bb. Konsentrasi ekstrak kental daun Crescentia cujete yang digunakan adalah 1,67; 2,5; dan 3,75 .
g. Efek antiinflamasi ekstrak etanol daun Crescentia cujete adalah kemampuan ekstrak etanol daun Crescentia cujete untuk mengurangi
migrasi sel-sel neutrofil dan penekanan ekspresi COX-2 pada daerah subkutan secara mikroskopik pada pengukuran 24 jam setelah injeksi
karagenin 3 . h. Injeksi subkutan merupakan injeksi yang dilakukan pada jaringan di
bawah kulit pada punggung mencit yang sudah dicukur rambutnya terlebih dahulu.
i. Pemberian topikal ekstrak daun Crescentia cujete dilakukan dengan cara
mengoleskan sediaan sebanyak 0,1 gram yang menutupi area seluas 2,25 cm
2
1,5 cm x 1,5 cm pada kulit punggung kulit mencit yang telah diinduksi karagenin 3 secara subkutan.
C. Bahan penelitian
Kategori