3.6.4. Analisis Vitamin Larut Air Tepung Pisang Awak
Analisis vitamin larut air menggunakan metode HPLC sama dengan analisis vitamin larut lemak yaitu dimulai dengan tahapan penyiapan larutan
sampel, antara lain sebagai berikut: i.
Untuk standar, ambil dan timbang standar vitamin sebanyak 0,005 gram dan encerkan dengan aquabidest sampai 100 ml, masukkan ke dalam labu ukur
10 ml. j.
Kemudian ambil 10 ml dari larutan tersebut dan masukkan ke dalam labu ukur 10 ml.
k. Ambil dan timbang sampel sebanyak 300 mg dan larutkan dengan 100 ml
aquabidest larutan 1. Lalu masukkan ke dalam labu ukur 100 ml. l.
Ambil sebanyak 10 ml larutan 1 dan encerkan sampai 100 ml dengan aquabidest.
m. Ambil sebanyak 100 ml dari larutan sebelumnya dan masukkan ke dalam
labu ukur 10 ml. n.
Kemudian masukkan sampel dan standar ke dalam waterbath selama 5 menit agar larutan tercampur sempurna dan gelembung yang ada di dinding tabung
hilang. o.
Lalu pindahkan sampel dan standar ke dalam tabung effendorf dengan menggunakan spuit 5 cc.
p. Masukkan sampel dan standar ke dalam alat HPLC dan tunggu hasilnya.
Universitas Sumatera Utara
Adapun pedoman penggunaan HPLC adalah sebagai berikut: a.
Preparasi sampel -
Sampel harus dalam bentuk larutan -
Untuk skala analisis sampel dalam uL, konsentrasi sampel yang diinjeksikan tidak boleh terlalu pekat karena dapat menyumbat kolom.
Konsentrasi maksimal adalah sekitar 40 ppm. b.
Preparasi fase gerak -
Fase gerak eluen yang digunakan harus dalam kualitas p.a ataupun grade HPLC, untuk air, digunakan aquabidest.
- Sebelum digunakan, eluen harus disaring dengan milipore kemudian
diwagaskan didigest dengan sonikator sekitar 30 menit untuk menghilangkan udara terlarut.
- Eluen harus dimasukkan ke dalam tabung eluen sebelum alat dinyalakan,
untuk menghindari adanya gelembung pada selang penghubung. -
Tabung eluen yang sudah diisi harus diberi label sesuai dengan eluen yang digunakan
c. Penyalaan alat
- Sebelum alat dinyalakan, pastikan dalam slang penghubung antara tabung
eluen dengan pompa tidak terdapat gelembung udara. Jika terdapat gelembung, buka penutup pompa kemudian buka katup slang di ujung
pompa dan sedot secepanya gelembung tersebut dari slang dengan alat penyedot gelembung yang tersedia kemudian tutup katup dan tutup pompa
kembali seperti semula.
Universitas Sumatera Utara
- Hubungkan kabel alat ke sumber listrik.
- Nyalakan tombol paling bawah alat HPLC tombol detektor.
- Nyalakan tombol tengah HPLC kolom.
- Nyalakan tombol paling atas dari HPLC pompa.
- Nyalakan tombol power CPU kemudian tombol power pada monitor Al
Anshori, 2007.
3.6.5. Mengitung Sumbangan Vitamin terhadap Angka Kecukupan Gizi
Kategori