de A a A a A c B

33 penggunaan auksin yang secara tunggal dan konsentrasi ZPT yang belum tepat. Zuyasna 2004 melaporkan bahwa, pembentukan embrio somatik tertinggi pada kacang tanah didapatkan pada media yang mengandung 3 mg L -1 picloram, sedangkan Novita 2013 melaporkan bahwa, embrio somatik pada kedelai dapat dibentuk dengan meregenerasikan kalus embriogenik pada media kombinasi 10 mg L -1 2,4-D dan 10 mg L -1 NAA. Secara visual, kalus yang awalnya remah berubah menjadi kompak. Selain itu, sebagian besar kalus menjadi coklat. Pada eksplan yang berasal dari daun, kalus yang awalnya berwarna kekuningan Gambar 3.7B kemudian berubah warna menjadi coklat dan akhirnya kalus tersebut mati Gambar 3.7C. Perlakuan picloram dengan konsentrasi rendah 0.1 mg L -1 menghasilkan struktur kalus yang kompak namun sedikit berair. Pada perlakuan ini terlihat struktur embrio fase globular Gambar 3.7D namun kalus berubah menjadi kuning kehitaman. Setelah 8 minggu dan sub kultur ke media yang sama, kalus tidak menunjukkan perkembangan dan akhirnya mati. Upaya untuk meregenerasikan kalus-kalus embriogenik ase globular masih belum berhasil dilakukan. Serangkaian percobaan telah dilakukan mulai dari penurunan konsentrasi auksin, penambahan arang aktif pada media, dan kombinasi auksin rendah 0.1 mg L -1 dengan BAP rendah 0.001 mg L -1 .

3.4 Kesimpulan

Keberhasilan induksi tunas kacang bogor dipengaruhi oleh interaksi antara media perlakuan dengan jenis eksplan yang digunakan pada semua peubah yang diamati persentase eksplan bertunas, jumlah tunas, jumlah daun dan tinggi tanaman. Jenis eksplan axis memberikan respon lebih baik daripada eksplan leaflet. Media perlakuan terbaik untuk proliferasi tunas adalah media yang mengandung 2.0 mg L -1 BAP, sedangkan media terbaik untuk induksi perakaran secara in vitro adalah media yang mengandung kombinasi 2.0 mg L -1 BAP dengan 0.1 mg L -1 NAA. ZPT 2,4-D dan picloram dapat menginduksi kalus embriogenik kacang bogor namun belum mampu menghasilkan embrio somatik fase hati, torpedo dan kotiledon. Media terbaik untuk induksi kalus embriogenik adalah 2,4-D 5 mg L -1 dan eksplan terbaik adalah daun in vitro. Kalus yang dihasilkan berwarna kekuningan dengan tekstur yang kompak. Picloram menghasilkan kalus warna kekuningan dengan tekstur yang remah dan sedikit berair. Daftar Pustaka Anchirina VM, Yiridoe EK, Bennett-Lartey SO. 2001. Enhancing sustainable production and genetic resource conservation of Bambara groundnut. A survey of indigenous agricultural knowledge systems. Outlook on Agriculture. 304:281-288. Barwale UB, Kerns HR, Widholm JM. 1986. Plant regeneration from callus cultures of several soybean genotypes via embryogenesis and organogenesis. Planta. 1674:473-481. 34 Brough SH, Azam-Ali SN. 1992. The effect of soil moisture on the proximate composition of bambara groundnut Vigna subterranea L. Verdc.. Journal of the Science of Food and Agriculture. 602:197-203. Chengalrayan K, Hazra S, Gallo-Meagher M. 2001. Histological analysis of somatic embryogenesis and organogenesis induced from mature zygotic embryo-derived leaflets of peanut Arachis hypogaea L.. Plant Science. 1613:415 –421. Collinson ST, Sibuga KP, Tarimo AJP, Azam-Ali SN. 2000. Influence of sowing date on the growth and yield of bambara groundnut landraces in Tanzania. Experimental Agriculture. 361:1-13. Gamborg OL, Miller RA, Ojima K. 1968. Nutrient requirements of suspension cultures of soybean root cells. Exp Cell Res. 501:151-158. George EF, Debergh PC. 2008. Micropropagation: uses and methods. Di dalam: George EF, Hall MA, De Klerk GJ, editor. Plant propagation by tissue culture. 3rd edition. Dordrecht. Netherlands NL: Springer Verlag. hlm. 29- 64. Hartweck LM, Lazzeri PA, Cui D, Collins GB, Williams EG. 1988. Auxin- orientation effects on somatic embryogenesis from immature soybean cotyledons. In vitro Cell Dev Biol. 248:821-828. Hazarika BN. 2003. Acclimatization of tissue-cultured plants. Curr Sci. 8512:1704-1712. Hazarika BN. 2006. Morpho-physiological disorder in in vitro culture of plants. Sci Hort. 1082:105-120. Jimenez VM. 2005. Involvement of plant hormones and plant growth regulators on in vitro somatic embryogenesis. Plant Growth Regul. 472:91 –110. Khaleda L, Al-Forkan M. 2006. Genotypic variability in callus induction and plant regeneration through somatic embryogenesis of five deepwater rice Oryza sativa L. cultivars of Bangladesh. African Journal of Biotechnology. 516:1435-1440. Kobayashi AK, Bespalhok JC, Pireira LFP, Vieira LGE. 2003. Plant regeneration of sweet orange Citrus sinensis from thin section of mature stem segments. Plant Cell Tiss Organ Cult. 741:223-225. Konate S, Kone M, Kouakou HT, Kouadio JY, Zouzou M. 2013. Callus induction and proliferation from cotyledon explants in bambara groundnut. African Crop Science Journal. 213:255-263. Kone M, Kouakou TH, Kone D, Kouadio YJ, Zouzou M and Ochatt JS. 2009. In vitro culture of bambara groundnut Vigna subterranea L. Verdc. Fabaceae: Effect of plant growth regulators, explant type and genotype on callus induction and differentiation. Agronomie Africaine. 211:15-23. Kone M, Patat-Ochatt EM, Conreux C, Sangwan RS, Ochatt SJ. 2007. In vitro morphogenesis from cotyledon and epicotyl explants and flow cytometry distinction between landraces of Bambara groundnut Vigna subterranea L. Verdc., an under-utilised grain legume. Plant Cell Tissue Organ Cult. 881:61-75. Lacroix B, Assoumou Y, Sangwan RS. 2003. Efficient in vitro direct shoot organogenesis of fertile plants from embryo explants of Bambara groundnut Vigna subterranea L. Verdc.. Plant Cell Report. 2112:1153-1158.