Setelah itu masukkan ke dalam tabung reaksi masing-masing 9mL, yang sebelumnya telah diukur dengan gelas ukur, tutup dengan kapas.
Masukkan seluruh tabung reaksi kedalam plastik lalu sterilisasi di autoklaf selama 15 menit, 121
˚C, 1,5 atm. Masukkan kedalam kulkas bersuhu 3˚C.
3.5.1.3 Pembuatan Media Salmonella Shigella Agar SSA
Masukkan akuades 250 mL ke dalam erlenmeyer, tutup dengan kapas. Sterilisasi di autoklaf selama 15 menit, 121
˚C, 1,5 atm. Timbang media SSA sebanyak 16 gr. Masukkan media SSA ke dalam erlenmeyer
yang telah di sterilisasi. Masukkan magnetic stir ke dalam Erlenmeyer lalu panaskan pada hotplate
selama ± 10 menit, 150˚C. Tuang media kedalam cawan petri ±20ml, dinginkan, bila telah mengeras masukkan kedalam
kulkas bersuhu 3˚C.
3.5.1.4 Pembuatan Media Endo Agar
Media Endo agar ditimbang sebanyak 5 gr lalu masukkan ke dalam gelas beker berisi 100 mL akuades. Masukkan magnetic stir ke
dalam gelas beker lalu panaskan di hotplate selama ± 10 menit, 150˚C.
Setelah itu masukkan ke dalam tabung erlenmeyer 250mL, tutup dengan kapas. Sterilisasi pada
autoklaf selama ± 2 jam, 120˚C, 1 atm. Tuang media kedalam cawan petri ± 20ml, dinginkan, bila telah mengeras
masukkan kedalam kulkas bersuhu 3˚C.
Gambar 3.1 Tahapan Pembuatan Media Kultur
3.5.1.5 Sterilisasi Alat dan Bahan a. Sterilisasi Basah
Sterilisasi basah dilakukan menggunakan autoklaf selama 15 menit, 121
˚C, 1,5 atm. Bahan dan alat yang di sterilisasi dalam autoklaf yaitu
media NA, Endo Agar, NB dan akuades dalam tabung erlenmeyer. Serta media NB pada tabung reaksi dan tip yang dibungkus dengan
plastik. Kemudian ketika telah dilakukan pengujian sampel, maka
cawan petri berisi media agar yang telah digunakan untuk pembiakan, media NB dalam tabung reaksi dan dalam erlenmeyer
yang telah digunakan untuk pengenceran sampel dibungkus dengan plastik lalu disterilisasi kembali.
b. Sterilisasi Kering
Sterilisasi kering dilakukan dalam oven ± 1 jam hingga mencapai suhu
150˚C. Bahan dan alat yang di sterilisasi dalam oven seperti cawan petri, spatula dan pinset yang sebelumnya telah
dibungkus dengan kertas.
3.5.1.6 Pengambilan dan Persiapan Sampel
Sampel dibeli di seluruh kantin kampus UIN Syarif Hidayatullah Jakarta yang menjual soto ayam yaitu sebanyak 6 kantin, dibeli dalam
kondisi hangat dalam kisaran waktu antara pukul 12.00 sampai jam 13.00. Sampel yang telah dibeli langsung dimasukkan kedalam kulkas
bersuhu 3 ˚C, sehingga kondisi makanan tersebut tidak akan mengalami
perubahan. Saat akan digunakan, sampel dikeluarkan dari kulkas, lalu diblender hingga halus dan di timbang sebanyak 20 gram.