3.4 Alat dan Bahan Penelitian
3.4.1 Alat Penelitian
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah gelas beker 250mL dan 500 mL, erlenmeyer 500mL, tabung ukur 100mL dan 10
mL, tabung reaksi, rak tabung reaksi, cawan petri, bunsen, spatula, pinset, pipet
, ose, batang L, korek api, tip 1000μ dan 100μ, mikropipet 1000μL dan 100μL, blender, autoklaf, oven, inkubator, kulkas, laminar, vortex,
timbangan, hot plate,magnetic stir, tisu, kapas, aluminium foil, handscoon, masker, larutan untuk pewarnaan Gram KKU, lugol, alkohol 90,
safranin, mikroskop, minyak immersi, larutan MF 0.5 dan swab kapas kering.
3.4.2 Bahan Penelitian
Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah soto ayam, media Nutrient Broth NB, Nutrient Agar NA, Salmonella Shigella Agar
SSA dan Endo Agar.
3.5 Cara Kerja Penelitian
3.5.1 Tahap Persiapan 3.5.1.1 Pembuatan Media Nutrien Agar NA
Media NA ditimbang sebanyak 5 gr, masukkan ke dalam gelas beker yang telah berisi akuades 250 mL. Masukkan magnetic stir ke dalam
gelas beker kemudian panaskan pada hotplate selama ± 20 menit, 150˚C.
Setelah itu masukkan ke dalam tabung erlenmeyer 250mL, tutup dengan kapas. Lakukan sterilisasi di autoklaf selama
15 menit, 121˚C, 1,5 atm. Tuang media kedalam cawan petri ±20ml, dinginkan, bila telah mengeras
masukkan kedalam kulkas bersuhu 3˚C.
3.5.1.2 Pembuatan Media Nutrien Broth NB
Media NB ditimbang sebanyak 5 gr, masukkan ke dalam gelas beker yang telah berisi akuades 625 mL. Masukkan magnetic stir ke dalam
gelas beker kemudian panaskan pada hotplate selama ± 10 menit, 150˚C.
Setelah itu masukkan ke dalam tabung reaksi masing-masing 9mL, yang sebelumnya telah diukur dengan gelas ukur, tutup dengan kapas.
Masukkan seluruh tabung reaksi kedalam plastik lalu sterilisasi di autoklaf selama 15 menit, 121
˚C, 1,5 atm. Masukkan kedalam kulkas bersuhu 3˚C.
3.5.1.3 Pembuatan Media Salmonella Shigella Agar SSA
Masukkan akuades 250 mL ke dalam erlenmeyer, tutup dengan kapas. Sterilisasi di autoklaf selama 15 menit, 121
˚C, 1,5 atm. Timbang media SSA sebanyak 16 gr. Masukkan media SSA ke dalam erlenmeyer
yang telah di sterilisasi. Masukkan magnetic stir ke dalam Erlenmeyer lalu panaskan pada hotplate
selama ± 10 menit, 150˚C. Tuang media kedalam cawan petri ±20ml, dinginkan, bila telah mengeras masukkan kedalam
kulkas bersuhu 3˚C.
3.5.1.4 Pembuatan Media Endo Agar
Media Endo agar ditimbang sebanyak 5 gr lalu masukkan ke dalam gelas beker berisi 100 mL akuades. Masukkan magnetic stir ke
dalam gelas beker lalu panaskan di hotplate selama ± 10 menit, 150˚C.
Setelah itu masukkan ke dalam tabung erlenmeyer 250mL, tutup dengan kapas. Sterilisasi pada
autoklaf selama ± 2 jam, 120˚C, 1 atm. Tuang media kedalam cawan petri ± 20ml, dinginkan, bila telah mengeras
masukkan kedalam kulkas bersuhu 3˚C.
Gambar 3.1 Tahapan Pembuatan Media Kultur