41
BAB III METODE PENELI TIAN
3.1 Metode Penelitian
M etode yang digunakan pada penelitian adalah metode eksperimental dan deskriptif. M etode eksperimental dengan maksud mengetahui pengaruh atau
hubungan antara variabel bebas X yang disebut faktor perlakuan dengan variabel terikat Y yang disebut faktor pengamatan Arikunto, 2002. Dalam penelitian
eksperimental, sebagai variabel bebas adalah volume void, panjang gelombang, pH fase gerak, komposisi fase gerak, laju alir dan suhu kolom sedangkan variabel
terikat adalah faktor kapasitas, waktu retensi, faktor tailing, resolusi dan jumlah plat teoritis.
M etode penelitian deskriptif I dilakukan dengan menganalisis parameter validasi yang meliputi: linearitas, batas deteksi, batas kuantitasi, akurasi, presisi
dan selektivitas dengan indikator yang meliputi koefisien korelasi, konsentrasi minimum terdeteksi, konsentrasi minimum terkuantitasi, persen recovery dan
persen relative standard deviation dan waktu retensi. M etode penelitian deskriptif II dilakukan untuk merekam kadar natrium
sakarin, natrium siklamat, natrium benzoat, kalium sorbat, tartrazin, sunset yellow dalam beberapa sirup esens yang beredar di kota M edan.
3.2 Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian dilakukan di Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi USU M edan dari bulan Agustus 2012 sampai dengan Juli 2013.
Universitas Sumatera Utara
42
3.3 Alat dan Bahan Penelitian
3.3.1 Alat Penelitian
Alat-alat yang digunakan, antara lain: seperangkat alat KCKT Agilent 1290 Infinity Diode Array Detector, kolom Zorbax Eclipse Plus C-18 100 x 4,6 x
3,5 m Agilent, seperangkat alat spektrofotometer UV-Vis UV Probe 1800
Shimadzu, pH meter digital tipe pen ATC, sonikator Bransonic, timbangan analitik Boeco, pompa vacum Boeco, pompa vacum Bust, penyaring sellulosa
nitrat 0,4 5 µm; penyaring politetrafluoroetilena PTFE 0,45 µm, penyaring
syringe politetrafluoroetilena PTFE 0,4 5 µm, labu tentukur 10, 25, 50, 100, 500,
1000 ml Oberoi, pipet volume 1, 2, 3, 5, 10 ml Oberoi, gelas ukur 10, 50, dan 100 ml Oberoi, serta alat-alat gelas yang biasa digunakan di Laboratorium
Penelitian
3.3.2 Bahan Penelitian
Bahan yang digunakan adalah metanol Grade HPLC E. M erck, kalium dihidrogen fosfat anhidrat E. M erck, asam orthofosfat E. M erck, aqua
bidestilata steril Ekapharmindo Putramas, bahan baku natrium sakarin, natrium siklamat, natrium benzoat, kalium sorbat, tartrazin, dan sunset yellow Sigma
Aldrich, sampel sirup esens, sirup uji akurasi dan presisi.
3.4 ChemStation Software
Agilent 1290 Infinity Diode Array Detector dilengkapi dengan ChemStation Software 04.03.016, sehingga set up parameter optimasi dapat
dilakukan, antara lain: volume void, panjang gelombang, sistem elusi fase gerak, laju alir dan suhu kolom.
Universitas Sumatera Utara
43 ChemStation Software 04.03.016 memberikan beberapa tipe laporan. Tipe
Performance untuk metode yang belum dikalibrasi berupa deskripsi sinyal, waktu retensi, luas puncak, tinggi puncak, lebar puncak, faktor simetri, faktor kapasitas,
jumlah plat teoritis, selektivitas dan resolusi. Untuk metode yang dikalibrasi, selain laporan metode yang belum dikalibrasi juga disertai dengan nama senyawa untuk
masing-masing puncak. Sedangkan faktor tailing harus menggunakan tipe Performance plus Extended.
3.5 Sampel Sirup Esens
Kategori