HASIL DAN PEMBAHASAN 58 KESIMPULAN DAN SARAN 156

ix 3.3.1.2 Identifikasi Golongan Steroid dan Triterpenoid. 50 3.3.1.3 Identifikasi Golongan Flavonoid, Saponin, Tannin, Dan Kuinon 50 3.3.3 Uji Antioksidan 1,1-Di Phenil-2-Picryl Hidrazil DPPH Dengan Metode Peredaman Radikal Bebas 51

3.3.4 Uji Leukimia Ekstrak Buah Bawang Hutan Pada Lini Sel L

1210 53 3.3.4.1 Medium Untuk Pertumbuhan Sel 53 3.3.4.2 Cara Penyediaan Sel Untuk Uji Aktivitas Antikanker 53 3.3.4.3 Uji Aktivitas Antikanker Ekstrak Buah Bawang Hutan Pada Lini Sel L 1210 54 3.3.5 Identifikasi Komponen Kimia Buah Bawang Hutan Yang Memiliki Aktivitas Antikanker 54 3.3.6 Pengukuran Data UV, IR, NMR, dan MS 55 3.4 Skema Penelitian 56

BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN 58

4.1 Determinasi Tanaman 58 4.2 Pembuatan Ekstrak Etanol dan Partisi 58 4.3 Uji Antioksidan Dari Hasil Partisi Dengan Metode Peredaman Radikal Bebas 59 4.4 Pemurnian Dengan Kromatografi Kolom 59 4.4.1 Hasil Kromatografi Kolom Pertama Untuk Fraksi 8 61 4.4.2 Hasil Kromatografi Kolom Kedua Untuk Fraksi 9 62 4.5 Identifikasi Struktur Kimia Isolat 8.4.1 64 4.5.1 Hasil Analisis Spektrofotometer Ultraviolet Isolat 8.4.1 64 4.5.2 Hasil Analisis Spektrofotometer FTIR Isolat 8.4.1 64 4.5.3 Hasil Analisis Data Spektra 1 H –NMR dan 13 C –NMR Isolat 8.4.1 66

4.5.3.1 Spektra

1 H – NMR Untuk Isolat 8.4.1 66 4.5.3.2 Spektra 13 C – NMR Untuk Isolat 8.4.1 71 x

4.5.3.3 Spektra NMR 2 Dimensi HMQC; COSY dan HMBC Untuk Isolat 8.4.1

84 4.5.4 Hasil Analisis Spektrometer Massa MS Isolat 8.4.1 104 4.6 Identifikasi Struktur Kimia Isolat 9.4.2 110 4.6.1 Hasil Analisis Spektrofotometer Ultraviolet Isolat 9.4.2 110 4.6.2 Hasil Analisis Spektrofotometer FTIR Isolat 9.4.2 110 4.6.3 Hasil Analisis Data Spektra 1 H –NMR dan 13 C –NMR Isolat 9.4.2 112

4.6.3.1 Spektra

1 H-NMR Untuk Isolat 9.4.2 112

4.6.3.2 Spektra

13 C-NMR Untuk Isolat 9.4.2 118

4.6.3.3 Spektra NMR 2 Dimensi HMQC, COSY dan HMBC Untuk Isolat 9.4.2

126 4.6.4 Hasil Analisis Spektrometer Massa MS Isolat 9.4.2 150

BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN 156

5.1 Kesimpulan 156 5.2 Saran 157 DAFTAR PUSTAKA 158 LAMPIRAN 162 xi DAFTAR TABEL Nomor Judul Tabel Hal 2.1 Aktivitas antimikroba dari senyawa yang terdapat dalam tumbuhan bawang hutan 9 2.2 Perbedaan antara sel normal dengan sel kanker 25 2.3 Obat antikanker dan penggolongannya 38 2.4 Beberapa obat antikanker yang dijual secara komersial 39 4.1 Hasil bobot sampel yang dipartisi 58 4.2 Hasil uji aktivitas antioksidan hasil partisi 59 4.3 Hasil kromatografi kolom menggunakan eluen n-heksana : etil asetat 60 4.4 Hasil uji aktivitas antioksidan pada fraksi n-heksana 60 4.5 Hasil fraksinasi kromatografi kolom 1 untuk fraksi 8 61 4.6 Hasil uji aktivitas antioksidan pada fraksi 8 61 4.7 Hasil fraksinasi kromatografi kolom 2 untuk fraksi 9 62 4.8 Hasil uji aktivitas antioksidan pada fraksi 9 62 4.9 Data hasil spektrum FTIR Isolat 8.4.1 65 4.10 Korelasi pergeseran kimia karbon 13 C dan 1 H – NMR untuk isolat 8.4.1 berdasarkan RMI 2 D HMQC 83 4.11 Perbandingan pergeseran kimia proton dan karbon untuk senyawa isolat 8.4.1 dengan Scorodocarpin B 109 4.12 Data hasil spektrum FTIR isolat 9.4.2 111 4.13 Korelasi pergeseran kimia karbon 13 C dan 1 H – NMR untuk isolat 9.4.2 berdasarkan RMI 2 D HMQC 126 4.14 Perbandingan pergeseran kimia proton dan karbon untuk senyawa isolat 9.4.2 dengan Scorodocarpin B 154 xii DAFTAR GAMBAR Nomor Judul Gambar Hal 2.1 Tumbuhan bawang hutan Scorodocarpus borneensis Becc 8 2.2 Buah dari tumbuhan bawang hutan 8 2.3 Struktur kimia senyawa sesquiterpen dan beberapa alkaloid dari tanaman Scorodocarpus borneensis 10 2.4 Struktur kimia β-amyrin 11 2.5 Struktur kimia Vinblastine dan Vincristine 12 2.6 Reaksi penghambatan rantai DNA yang mengandung Adenin, Guanin, dan Sitosin 13 2.7 Mekanisme terbentuknya sel kanker 15 2.8 Pembelahan sel normal dengan metode semi konservatif 18 2.9 Pembelahan sel tidak terkendali dengan metode fragmentasi Okazaki 21 2.10 Pembelahan sel normal 24 2.11 Pembelahan sel kanker 24 2.12 Mekanisme reaksi 6-Merkaptopurin menjadi 6-Merkaptopurin ribosit 30 2.13 Mekanisme reaksi Folat menjadi Tetrahidrofolat THF 31 2.14 Reaksi dalam bentuk ion asam amino 32 2.15 Reaksi dalam bentuk asam amino 32 2.16 Struktur kimia Predmison 32 2.17 Struktur kimia D-4-amino-N 10 - metil pteroil asam glutamat 34 2.18 Struktur kimia a Diphenylpicrylhydrazyl radikal bebas 37 b Diphenylpicrylhydrazyl tereduksi 37 3.1 Diagram kerja isolasi buah bawang hutan 56 3.2 Diagram pemurnian hasil ekstrak partisi buah bawang hutan 57 4.1 Struktur molekul Doxorubisin 63 4.2 Spektrum UV Isolat 8.4.1 64 4.3 Spektrum FTIR Isolat 8.4.1 65 4.4 Spektra RMI proton untuk isolat 8.4.1 δH 0,86 - 2,11 ppm 67 xiii Nomor Judul Gambar Hal 4.5 Spektra RMI proton untuk isolat 8.4.1 δH 0,86 - 8,23 ppm 68 4.6 Spektra RMI proton untuk isolat 8.4.1 δH 2,9 - 5,5 ppm 69 4.7 Spektra RMI proton untuk isolat 8.4. 1 δH 7,03 - 8,14 ppm 70 4.8 Spektra RMI karbon untuk isolat 8.4.1 δC 0,0 - 200 ppm 72 4.9 Spektra RMI karbon untuk isolat 8.4.1 δC 14,31 - 39,80 ppm 73 4.10 Spektra RMI karbon untuk isolat 8.4.1 δC 110 - 173,33 ppm 74 4.11 Spektra RMI kar bon untuk isolat 8.4.1 δC 29,40 - 30,2 ppm 75 4.12 Spektra RMI D EPT untuk isolat 8.4.1 δC 0 - 170 ppm 76 4.13 Spektra RMI DEPT untuk isolat 8.4.1 δC 110 - 170 ppm 77 4.14 Spektra RMI D EPT untuk isolat 8.4.1 δC 14,31 - 40,0 ppm 78 4.15 Spektra RMI DEPT untuk isolat 8.4.1 δC 14,31 - 40,0 ppm 79 4.16 Spektra RMI D EPT untuk isolat 8.4.1 δC 111,0 - 130,0 ppm 80 4.17 Spektra RMI DEPT untuk isolat 8.4.1 δC 14,31 - 40,0 ppm 81 4.18 Spektra RMI DEPT untuk isolat 8.4.1 δC 29,40 - 30,2 ppm 82 4.19 Spektra RMI 2D HMQC untuk isolat 8.4.1 δH 0 - 8,0 dan δC 0 - 200 ppm 85 4.20 Spektra RMI 2D HMQC untuk isolat 8.4.1 δH 7,0 - 7,6 dan δC 111,41 - 122,40 ppm 86 4.21 Spektra RMI 2D HMQC untuk isolat 8.4.1 δH 3,59 - 5,36 dan δC 39,80 - 130,09 ppm 87 4.22 Spektra RMI 2D HMQC untuk isolat 8.4.1 δH 0,87 - 2,99 dan δC 14,31 - 37,11 ppm 88 4.23 Spektra RMI 2D HMQC untuk isolat 8.4.1 δH 1,15 - 1,40 dan δC 25,55 - 32,09 ppm 89 4.24 Hasil analisis spektra COSY untuk senyawa isolat 8.4.1 90 4.25 Spektra RMI 2D COSY untuk isolat 8.4.1 δH 0,0 - 8,0 dan δH 0,0 - 8,0 ppm 91 xiv Nomor Judul Gambar Hal 4.26 Spektra RMI 2D COSY untuk isolat 8.4.1 δH 7,0 - 8,2 dan δH 7,03 - 8,2 ppm 92 4.27 Spektra RMI 2D COSY untuk isolat 8.4.1 δH 2,02 - 5,35 dan δH 2,00 - 5,35 ppm 93 4.28 Spektra RMI 2D COSY untuk isolat 8.4.1 δH 0,88 - 2,09 dan δH 0,80 - 2,09 ppm 94 4.29 Hasil analisis spektra HMBC untuk senyawa isolat 8.4.1 95 4.30 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 8.4.1 δH 0,0 - 8,0 dan δC 0,0 - 140 ppm 96 4.31 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 8.4.1 δH 1,2 - 1,6 dan δC 27,0 - 35 ppm 97 4.32 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 8.4.1 δH 6,9 - 7,61 dan δC 111,41 - 122,40 ppm 98 4.33 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 8.4.1 δH 7,03 - 7,61 dan δC 127,53 - 138,0 ppm 99 4.34 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 8.4.1 δH 2,02 - 3,60 dan δC 111,41 - 130,09 ppm 100 4.35 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 8.4.1 δH 2,09 - 3,60 dan δC 161,0 - 178 ppm 101 4.36 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 8.4.1 δH 2,98 - 5,35 dan δC 25,55 - 39,80 ppm 102 4.37 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 8.4.1 δH 0,88 - 2,98 dan δC 22,87 - 37,11 ppm 103 4.38 Spektra massa untuk isolat 8.4.1 Instrumen LC-MS 104 4.39 Pola fragmentasi senyawa isolat 8.4.1 106 4.40 Fragmentasi struktur kimia senyawa isolat 8.4.1 107 4.41 Struktur kimia Scorodocapine B dan Dehidroksil Scorodocarpine B 108 4.42 Spektrum Ultraviolet isolat 9.4.2 110 4.43 Spektrum FTIR isolat 9.4.2 111 xv Nomor Judul Gambar Hal 4.44 Spektra RMI proton untuk isolat 9.4.2 δH 0,86 - 8,00 ppm 113 4.45 Spektra RMI proton untuk isolat 9.4.2 δH 0,86 - 1,58 ppm 114 4.46 Spektra RMI proton untuk isolat 9.4.2 δH 1,9 - 3,5 ppm 115 4.47 Spektra RMI proton untuk isolat 9.4.2 δH 5,35 - 6,81 ppm 116 4.48 Spektra RMI proton untuk isolat 9.4.2 δH 6,96 - 8,00 ppm 117 4.49 Spektra RMI k arbon untuk isolat 9.4.2 δC 0,18 - 173,86 ppm 119 4.50 Spektra RMI karbon untuk isolat 9.4.2 δC 14,30 - 39,86 ppm 120 4.51 Spektra RMI karbon untuk isolat 9.4.2 δC 29,51 - 29,96 ppm 121 4.52 Spektra RMI karbon untuk isolat 9.4.2 δC 103,4 - 173,8 ppm 122 4.53 Spektra RMI DEPT untuk isolat 9.4.2 δC 14,30 - 173,86 ppm 123 4.54 Spektra RMI DEPT untuk isolat 9.4.2 δC 103,40 - 173,86 ppm 124 4.55 Spektra RMI DEPT untuk isolat 9.4.2 δC 14,30 - 39,86 ppm 125 4.56 Spektra RMI 2D HMQC untuk isolat 9.4.2 δH 0 - 8 dan δC 0 - 140 ppm 127 4.57 Spektra RMI 2D HMQC untuk isolat 9.4.2 δH 5,35 - 7,19 dan δC 103,40 - 130,08 ppm 128 4.58 Spektra RMI 2D HMQC untuk isolat 9.4.2 δH 2,88 - 5,35 dan δC 25,64 - 39,87 ppm 129 4.59 Spektra RMI 2D HMQC untuk isolat 9.4.2 δH 0,88 -1,28 dan δC 14,31 - 29,51 ppm 130 4.60 Hasil analisis spektra COSY untuk senyawa isolat 9.4.2 131 4.61 Spektra RMI 2D COSY untuk isolat 9.4.2 δH 2,00 - 5,65 ppm 132 4.62 Spektra RMI 2D COSY untuk isolat 9.4.2 δH 0 - 8 ppm 133 4.63 Spektra RMI 2D COSY untuk isolat 9.4.2 δH 6,80 - 8,00 ppm 134 4.64 Spektra RMI 2 D COSY untuk isolat 9.4.2 δH 0,88 - 2,13 ppm 135 4.65 Hasil analisis spektrum HMBC untuk senyawa isolat 9.4.2 136 4.66 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 9.4.2 δH 0,0 - 8,0 dan δC 0,0 - 180,0 ppm 137 xvi Nomor Judul Gambar Hal 4.67 Spektra RMI 2D HMBC untuk i solat 9.4.2 δH 6,80 - 7,03 dan δC 103,40 - 112,44 ppm 138 4.68 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 9.4.2 δH 6,80 - 7,03 dan δC 103,40 - 112,44 ppm 139 4.69 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 9.4.2 δH 0 - 8,00 dan δC 112, 44 ̴ 131,69 ppm 140 4.70 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 9.4.2 δH 6,97 - 7,03 dan δC 112,06 – 123,15 ppm 141 4.71 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 9.4.2 δH 6,80 - 7,19 dan δC 128,25 - 150,20 ppm 142 4.72 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 9.4.2 δH 2,00 - 2,13 dan δC 130,08 - 173,86 ppm 143 4.73 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 9.4.2 δH 2,88 - 3,55 dan δC 112, 06 ̴ 173,86 ppm 144 4.74 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 9.4.2 δH 2,88 - 3,55 dan δC 112,06 - 130,08 ppm 145 4.75 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 9.4.2 δH 3,55 - 5,35 dan δC 23 - 40 ppm 146 4.76 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 9.4.2 δH 2,00 - 2,88 dan δC 25,95 - 39,87 ppm 147 4.77 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 9. 4.2 δH 0,88 - 1,57 dan δC 22,87 - 32,10 ppm 148 4.78 Spektra RMI 2D HMBC untuk isolat 9.4.2 δH 1,26 - 1,57 dan δC 27,41 - 32,10 ppm 149 4.79 Spektra massa untuk isolat 9.4.2 Instrumen LC-MS 150 4.80 Pola fragmentasi senyawa isolat 9.4.2 152 4.81 Fragmentasi struktur kimia senyawa isolat 9.4.2 153 4.82 Struktur kimia Scorodocapine B 155 xvii DAFTAR LAMPIRAN Nomor Judul Lampiran Hal 1 Tabel pergeseran kimia karbon isolat 8.4.1 dan isolat 9.4.2 dengan senyawa Scorodocarpin B 162 2 Tabel IC 50 dari uji aktivitas antikanker fraksi ekstrak n-heksana buah bawang hutan terhadap sel leukimia L 1210 163 3 Tabel IC 50 dari uji aktivitas antikanker fraksi etil asetat buah bawang hutan terhadap sel leukimia L 1210 164 4 Tabel IC 50 dari uji aktivitas antikanker fraksi n-heksana 8.4.1 buah bawang hutan terhadap sel leukimia L 1210 165 5 Tabel IC 50 dari uji aktivitas antikanker fraksi n-heksana 9.4.2 buah bawang hutan terhadap sel leukimia L 1210 166 6 Tabel IC 50 dari uji aktivitas antikanker doxorubisin kontrol positif terhadap sel leukimia L 1210 167 7 Tabel tes probit perhitungan IC 50 pada uji aktivitas antikanker 168 8 Perhitungan penentuan nilai IC 50 untuk uji aktivitas antikanker pada fraksi n-heksana buah bawang hutan 169 9 Tabel IC 50 dari uji aktivitas antioksidan tiga fraksi hasil partisi ekstrak etanol pekat buah bawang hutan 170 10.1 Tabel IC 50 uji aktivitas antioksidan pada fraksi n-heksana buah bawang hutan 171 10.2 Tabel IC 50 uji aktivitas antioksidan pada fraksi n-heksana buah bawang hutan 172 11 Tabel IC 50 uji aktivitas antioksidan pada fraksi 8 n-heksana buah bawang hutan 173 12 Tabel IC 50 uji aktivitas antioksidan pada fraksi 9 n-heksana buah bawang hutan 174 13 Tabel IC 50 dari uji aktivitas antioksidan Vitamin C kontrol positif 175 14 Perhitungan penentuan nilai IC 50 untuk uji aktivitas antioksidan pada fraksi n-heksana buah bawang hutan 176 15 Hasil identifikasideterminasi tumbuhan 177 16 Surat izin penelitian di LIPI 178 xviii Nomor Judul Lampiran Hal 17 Kondisi alat spekroskopi massa MS 179 18 Kondisi alat HPLC 180 19.1 Foto penelitian 181 19.2 Foto penelitian 182 19.3 Foto penelitian 183 19.4 Foto penelitian 184 19.5 Foto penelitian 185 i ISOLATION AND ELUSIDATION OF BIOACTIVE COMPOUND CHEMICAL STRUCTURE OF ANTI-CANCER FROM FRUITS OF FORESTRY ONION Scorodocarpus borneensis Becc ABSTRACT Forestry onion Scrodocampus borneensis Becc is growth in east kalimantan and riau which is a community used as diare medicine because of alkaloid compounds. That research was doing isolation and getting chemical structure from activity of anti cancer compound L 1210 . That isolation has been maseration process with fruit of forestry onion. That result do partition and then be analyzed coloumn chromatography with stationary phase is silica gel and mobile phase is n-hexane and ethyl acetat. After that coloumn chromatography find two alkaloid compounds and then do identify with UV, FTIR, NMR- 1 H, NMR- 13 C DEPT, and NMR-2D COSY, HMQC, and HMBC. That compounds called as Dehidroksi Scorordocarpin B had activity of anticancer L 1210 with IC 50 of 1,7053 µgmL Scorodocarpin B had been activity of anticancer L 1210 with IC 50 of 1,1061 µgmL. Keywords: Forestry Onions, Dehidroksi Scorodocarpin B, Scorodocarpin B, anticancer ii ISOLASI DAN ELUSIDASI STRUKTUR KIMIA SENYAWA BIOAKTIF ANTI KANKER DARI BUAH TUMBUHAN BAWANG HUTAN Scorodocarpus borneensis Becc ABSTRAK Bawang hutan Scorodocarpus borneensis Becc adalah tanaman yang tumbuh di Kalimantan Timur dan Riau yang secara tradisional digunakan masyarakat sebagai obat diare dan diketahui mengandung senyawa alkaloid. Pada penelitian ini dilakukan isolasi dan penentuan struktur kimia pada senyawa yang memiliki aktifitas antikanker L 1210 . Isolasi dilakukan dengan maserasi buah bawang hutan, lalu dipartisi dan dikromatografi kolom dengan fasa diam silika gel dan fasa gerak n-heksana dan etil asetat. Hasil kromatografi kolom ditemukan dua senyawa alkaloid yang dilanjutkan dengan identifikasi dengan analisis UV, FT-IR, NMR- 1 H, NMR- 13 C DEPT, dan NMR-2D COSY, HMQC, dan HMBC. Senyawa yang ditemukan tersebut dinyatakan sebagai Dehidroksi Scorordocarpin B dengan memiliki aktivitas antikanker L 1210 dengan IC 50 sebesar 1,7053 µgmL, dan Scorodocarpin B dengan memiliki aktivitas antikanker L 1210 dengan IC 50 sebesar 1,1061 µgmL. Kata Kunci : Bawang Hutan, Dehidroksi Scorodocarpin B, Scorodocarpin B, Antikanker. 1

BAB 1 PENDAHULUAN